Jeong, Dong Kee;Sharma, Neelesh;Nguyen, Thanh Luan;Kim, Jong Hyun;Oh, Sung Jong
한국수정란이식학회지
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제29권4호
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pp.351-359
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2014
Phasianus colchicus is not only a beautiful bird but also a great value in science and under the threat of endanger. Hence, the aim of this study was to isolate the pheasant male germ cells (mGCs) and then induce them into elongated sperm-like cells in vitro. The mGCs were purified and enriched by a two-step plating method based on the different adherence velocities of mGCs and somatic cells. The percentage of the c-kit positive cells and c-kit negative cells examined by flow cytometry analysis (FCA) was 92.87% and 2.57%, respectively. Subsequently, the mGCs were induced for 48h in DMEM/F12 medium supplemented factors such as retinol acid, testosterone and bovine FSH, followed by 5 weeks in culture. We found that some elongated sperm-like cells appeared initially in vitro under inducement of stimulated factors. The elongated sperm-like cells showed in the expression of changed morphology and post-transcriptional marker such as spermatid associated (SPERT), spermatid perinuclear RNA binding protein (STRBP), round spermatid basic protein 1 (RSBN1) and SPER1L. Moreover, in DNA content identified assay, induced cells showed that the 1C DNA population markedly increased in differentiated group but it was not change in undifferentiated group. Successful in vitro differentiation of pheasant testicular germline cells into spermatids appears to offer extremely attractive potential for the conservation of endangered birds and treatment of male infertility.
Four extenders such as tris-fructose-citrate, Tris-glucose-citrate, glycine-glucose-citrate and lactose that the more frequently utilized types of semen extenders used for freezing dog semen evaluated with sperm motility, viability and acrosomal score in the processing procedures to prior freezing and after frozen-thawing respectively. Each extender contained 4% glycerol and 20% egg yolk were treated by same methods in dilution, freezing, storage and thawing. The results were obtained as follows; 1. The sperm motility and viability in procedure from dilution to frozen-thawing appeared superiorly with recovery rate of 53.2%, 54.8% in tris-fructose-citrate but appeared inferiorly with recover rate of 8.4%, 8.3% in lactose to others. 2. In the processing procedure course to prior-freezing, glycine-glucose-citrate appeared superiorly with decrease rate of 5.4% in motility, and lactose with decrease rate of 4.6% in viability, but tris-glucose-citrate appeared inferiorly with decrease rate of 12.2%, 11.4% in the sperm motility and viability. 3. During frozen-thawing, tris-fructose-citrate appeared superiorly with decrease rate of 35.2% in motility and 30.7% in viability but lactose appeared inferiorly with decrease rate of 76.7% in motility and 75.7% in viability. 4. The variation of acrosome morphology in the total processing procedures appeared that glycine-glucose citrate were superior with acrosome score of 0.1191$\pm$0.029, that tris-fructose-citrate were inferior with acrosome score of 0.1941$\pm$0.045 to others.
2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin (TCDD), a ubiquitous environmental contaminant, causes a variety of adverse effects on the male reproductive system in rats. The effect of green tea extract (GTE) was investigated on the testicular function in Spragure-Dawley rats after a single exposure of 10$\mu\textrm{g}$ TCDD/kg body weight. The exposure of rat to TCDD significantly increased the weights of the epididymis and ventral prostate, yet significantly decresed the weight of the seminal vesicle when compared to the controls (p<0.05). In a combined treatment of TCDD with GTE, the organ weight changes caused by TCDD treatment disappeared. Significant decreases in sperm motility and sperm numbers were observed in the TCDD-treated rats, when compared to the control (p<0.05). GTE treatment reversed the decrease of sperm motility and sperm numbers caused by TCDD. There were no differences in sperm morphology, histological changes of the reproductive organs, and spermatogenesis between all the treated groups. In the ventral prostate and seminal vesicle, TCDD increased the CYP1A1 mRNA level, however, it did not affect the estrogen receptor $\beta$ (ER-$\beta$) mRNA level. GTE treatment did not influence the effect of TCDD on the levels of CYP1A1 and Er-$\beta$ mRNA. These results seem to indicate that green tea protects the testicular function against TCDD-induced reproductive toxicity, not because of a receptor-mediated mechanism but rather due to a secondary change of testes or accessory sex organs.
Kim, Sung Jae;Paik, Doo-Jin;Lee, Joong Shik;Lee, Hyo Serk;Seo, Ju Tae;Jeong, Mi Seon;Lee, Jae-Ho;Park, Dong Wook;Han, Sangchul;Lee, Yoo Kyung;Lee, Ki Heon;Lee, In Ho;So, Kyeong A;Kim, Seon Ah;Kim, Juree;Kim, Tae Jin
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제44권4호
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pp.207-213
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2017
Objective: This study investigated the prevalence of infections with human papillomavirus, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, and Mycoplasma genitalium in the semen of Korean infertile couples and their associations with sperm quality. Methods: Semen specimens were collected from 400 men who underwent a fertility evaluation. Infection with above five pathogens was assessed in each specimen. Sperm quality was compared in the pathogen-infected group and the non-infected group. Results: The infection rates of human papillomavirus, C. trachomatis, U. urealyticum, M. hominis, and M. genitalium in the study subjects were 1.57%, 0.79%, 16.80%, 4.46%, and 1.31%, respectively. The rate of morphological normality in the U. urealyticum-infected group was significantly lower than in those not infected with U. urealyticum. In a subgroup analysis of normozoospermic samples, the semen volume and the total sperm count in the pathogen-infected group were significantly lower than in the non-infected group. Conclusion: Our results suggest that infection with U. urealyticum alone and any of the five sexually transmitted infections are likely to affect sperm morphology and semen volume, respectively.
The aims of the study were to establish a short-term screening test for detecting testicular toxicity of chemicals in rats and to determine whether a 2-week administration period is sufficient to detect testicular toxicity of 2-bromopropane (2-BP) as an example. Male Sprague-Dawley rats were subcutaneously administered with 1000 mg/kg/day of 2-BP or its vehicle for 2 weeks. Ten male rats each were sacrificed on days 3, 7 and 14 after the initiation of treatment. Parameters of testicular toxicity included genital organ weights, testicular sperm head counts, epididymal sperm counts, motility and morphology, and qualitative and quantitative histopathologic examinations. The early histopathological changes observed on day 3 of treatment included degeneration of spermatogonia and spermatocytes, multinuclear giant cells, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, and decreased number of spermatogonia in stages II and V. On day 7 of treatment, atrophy of seminiferous tubules, exfoliation of germ cells, degeneration of spermatogonia and spermatocytes, multinuclear giant cells, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, decreased number of spermatogonia in stages II and V, and decreased number of spermatocytes in stages VII and XII. On day 14 after treatment, a significant decrease in the weights of testes and seminal vesicles was found. Atrophy of seminiferous tubules, exfoliation of germ cells, degeneration of spermatogonia and spermatocytes, mature spermatid retention, vacuolization of Sertoli cells, decreased number of spermatogonia in stages II and V, and decreased number of spermatocytes in all spermatogenic stages were also observed. In addition, a slight non-significant decrease in testicular sperm head counts, daily sperm production rate and epididymal sperm counts was found. The results showed that 2 weeks of treatment is sufficient to detect the adverse effects of 2-BP on male reproductive organs. It is considered that the short-term testicular toxicity study established in this study can be a useful tool for screening the testicular toxic potential of new drug candidates in rats.
KH204가 음경해면체 이완과 생식기능에 미치는 영향을 규명하기 위해 효능을 실험한 결과 토끼의 음경해면체를 $1{\times}10^{-6}M$ pheylephrine으로 수축시킨 후 KH204를 61, 183 및 549 mg/L의 축적용량으로 처리하여 각각 6.8, 10.1 및 16%의 용량의존적인 이완효과를 관찰하였다. 흰쥐를 이용한 생식기능 실험은 KH204를 61, 183 및 549 mg/kg으로 10주간 장기투여에서 생식장기인 고환조직의 중량 및 정자수 증가에 유의한 효과를 나타내었다. 정자 형태검사는 대조군과 비슷한 수치로 나타내어 고농도로 장기투여에도 정자군과 비슷한 수치로 나타내어 고농도로 장기투여에도 정자 기형에 문제가 없음을 확인하였다. 이상의 결과로 KH204가 특별한 부작용이 없이 음경해면체를 농도의존적으로 이완시키는 효과가 있어, 음경발기를 개선시키는 효과뿐만 아니라 고환성 원인 또는 정자생산 기능부전으로 보이는 남성불임에서 또한 효능이 있음을 시사하였다.
Jha, Pankaj Kumar;Paul, Ashit Kumar;Rahman, M. Bozlur;Tanjim, M.;Bari, Farida Yeasmin;Alam, M. Golam Shahi
한국수정란이식학회지
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제28권1호
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pp.31-39
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2013
Alpha-tocopherol as an antioxidant acts in preservation of chilled semen by preserving cell membrane damage from lipid peroxidation. Optimum concentrations of ${\alpha}$-tocopherol in egg yolk-citrate (EYC) extender need to be studied in crossbred bull's semen. Different concentrations of ${\alpha}$-tocopherol viz. 0, 1, 2, 4 and 6mg per ml of extender were used. Semen was collected once a week from four bulls used to regular collection, aged 4 to 7 years, weighing 320 to 450 kg, and with body condition score 4 to 4.5 and scrotal circumference 23 to 32 cm. Semen was evaluated routinely and sperm morphology was viewed under light microscope at ${\times}1,000$ magnification after fixing with buffered formal saline. Over 90% had normal head, acrosome, mid-piece and tail. Semen was diluted with egg-yolk-citrate extender to produce $15{\times}10^6$ spermatozoa/ml and 0, 1, 2, 4 and 6 mg/ml ${\alpha}$-tocopherol were added. The semens amples were kept at $8^{\circ}C$. Sperm motility and viability were examined daily up to 5 days under light microscopy at ${\times}200$ magnification. Sperm viability was acceptable (${\geq}40%$) up to the $4^{th}$ day with all concentrations of ${\alpha}$-tocopherol and up to the $5^{th}$ day with 2 mg/ml ${\alpha}$-tocopherol. Sperm motility was acceptable (${\geq}40%$) up to the $3^{rd}$ day irrespective of ${\alpha}$-tocopherol concentration, and up to the $4^{th}$ day with 2 mg/ml ${\alpha}$-tocopherol. It is suggested that the lifespan of chilled semen may be extended up to 4 days by adding 2mg/ml ${\alpha}$-tocopherol.
The main purpose of this study was to improve the efficiency and quality of in vitro embryo production in Korean Native Cows (KNC). We examined the effects of ovarian morphologies (Experiment 1) and the culture vessel (Experiment 2) on in vitro maturation (IVM). We measured the subsequent development rates and cell numbers of blastocysts. In Experiment 1, the ovaries of KNC were divided into six groups, based on follicle and corpus luteum (CL) morphology. The development rates to the 2- and 8-cell stages were similar among the six groups. The development rates to blastocyst stages were significantly higher in the group without a CL or follicle (WOCL/F) than in the groups with follicular cysts (FCs), regressive CLs (RCLs) or cystic CLs (CCLs) (p<0.05). The cell number of the inner cell mass (ICM) of blastocysts in the FCs and RCLs groups, and the number of cells in the trophectoderm (TE) in the WOCL/F group, FCs, growing CLs (GCLs) and RCLs were significantly higher than in other groups (p<0.05). The total cell number (TCN) in the WOCL/F, FC and RCL groups was also significantly higher than in other groups (p<0.05). The ICM cell number/TCN ratio was significantly higher in the FC and RCL groups than in the GCL and DF groups (p<0.05). In Experiment 2, oocyte IVM was carried out in culture dishes, in 0.25- or 0.5-ml straws used for freezing sperm. The development rate to the 2-cell stage was significantly higher in the 0.5-ml straw group than in the 0.25-ml straw group. The development rates to the blastocyst stage were similar in the dish and the two straw groups. There were no differences in the cell numbers of ICM, TE or TCN or ICM cell number/TCN ratios between groups.
본 연구는 수컷 살조개 Protothaca (Notochione) yessoensis의 정자 형성 과정 중 생식세포들의 분화와 성숙정자의 미세구조 특징에 관한 몇 가지 특징을 투과전자현미경 관찰에 의해 조사하였다. 본 종의 정자형태는 원시형(primitive type)으로, 이매패강, 이치아강(Heterodonta)에 속하는 다른 종들과 유사하다. 생식세포에 인접하여 연결되어 있는 보조세포들은 생식세포들의 발달을 위해 영양공급에 관여한다. 본 종의 정자의 핵형은 긴 원통형이며 첨체의 형태는 모자모양이다. 정자는 길이가 대략 $46{\sim}50{\mu}m$이며, 길다란 정핵(길이 약 $2.44{\mu}m$)과, 첨체(길이 $0.45{\mu}m$), 그리고 미부 편모(약 $42{\sim}46{\mu}m$)로 이루어져 있다. 미부 편모의 악소님(axoneme)은 9+2 구조를 나타낸다. 첨체소포의 특징으로써 basal ring의 기저부위에서 측면부위는 전자밀도가 불투명한 부위를 나타내나, 첨체소포의 앞쪽 정단부위는 전자밀도가 비교적 투명한 부위로 나타나는 특징을 보인다. 이것이 이치아강에 속하는 백합과와 또 다른 여러 과들에 속하는 종들의 정자들이 갖는 첨체소포의 공통특징이다. 따라서 이치아강이 갖는 이들 첨체소포가 갖는 공통특징은 분류의 key 또는 중요한 도구로써 계통 분류를 위해 사용될 수 있다. 정자 중편에 있는 미토콘드리아 수는 4개로 이치아강 내에서 백합과의 3종을 제외한 모든 종들과 다른 과들의 종들에서 공통으로 나타나고 있는데, 예외로, 개조개, 백합, 가무락조개 만은 중편의 미토콘드리아가 5개로 이루어져 있다. 미토콘드리아 수는 과나 또는 상과 수준에서 종들의 분류학적 분석을 할 경우, 분류 key 또는 중요한 도구로 사용될 수 있다.
냉각이 개 정자의 기능(생존력, 활력, 첨체고유성)과 형태(기형율)에 미치는 영향을 알아보기 위해 23마리 개의 정소상체에서 정자를 회수하여 다음과 같은 실험에 사용하였다. 정자를 3% BSA가 첨가된 0.3M glucose(G-BSA)에 희석한 후 실험 1에서 서로 다른 온도, 0, 10, $37^{\circ}C$에 30분동안 냉각하여 $37^{\circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력, 생존력, 첨체고유성을 검사하였다. 실험 2에서 $0^{\circ}C$와 4$^{\circ}C$에서 정자를 서로 다른 시간 (5, 10, 15, 30분)동안 노출시켜 $37^{\circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력 및 생존력을 검사하였다. 또한 sugars가 개정자의 기능과 형태에 미치는 영향을 알아보기 위해 여러 종류의 sugars (0.3M)를 준비하고 $0^{\circ}C$에서 정자를 sugardyddor에 노출시켜 $37^{\circ}C$에서 가온한 후 정자의 활력, 생존력 및 기형정도를 관찰하였다. 본 실험결과 개 정조상체유래의 정자는 냉각온도가 감소할수록 정자의 기능이 급격하게 감소하여 냉각에 민감하게 나타났다.(P<0.05), 특히 정자의 활력이 다른 정자의 기능, 생존력과 첨체고유성에 비해 냉각에 민감하게 나타났다. 정자를 $0^{\circ}C$와 $4^{\circ}C$에서 서로 다른 시간(5, 10, 15, 30분) 동안 냉각하였을 때 30분 동안 냉각된 정자가 그 외의 시간 동안 냉각된 정자에 비해 생존력이 저하되었다. (P<0.05). 이상의 결과 개 정소상체유래의 정자는 냉각에 비교적 민감하였으며 정자의 냉각에 대한 민감성을 완화시키는 첨가제로 단당류뿐만 아니라 다당류에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.선택에 대한 인식이 낮음을 알 수 있었다. 부페식당에서 가장 좋아하는 음식의 국적은 54.4%가 한국음식으로 나타났다. 부페식사에서 '약간' 또는 ‘대단히 과식했다'고 응답한 경우가 64.0%로 많은 대상자들이 과식하는 것으로 나타났는데 이로 인한 건강 및 영양문제에 대한 교육이 필요하고 운영면에서는 이러한 일종의 음식의 낭비를 줄일 수 있는 방안에 대한 연구가 필요하다고 사료되었다. 5) 향후 부페식당의 발전방향에 대한 의견 부페식당의 발전방향에 대해 '가지수를 줄여서라도 가격을 짜게 하자'는 의견이 82.9%로 대부분 조사 대상자들이 현재 부페가격에 대해 부정적인 반응을 보였다. '한국음식을 더 많이 해서 전통음식과 친밀한 장소로 발전시키자', '계절식품을 이용하고 비슷한 종류의 음식은 빼서 가격을 낮추자', '연령에 따라서, 또, 성인에서는 성별에 따라 가격 차이를 두자'는 의견 등이 있었다.이용한 배반포의 체외생산에 있어서 배양액내 항산화제의 첨가는 체외성숙단계에서만 효과적이었다. 이것은 아마도 항산화제가 체외성숙 시 난포란 내에서 일어나는 여러 가지 생화학 반응의 처리시간과 관련하여 활성화시킴으로써 난포란의 생존력을 높인 것이라고 사료되기 때문에 앞으로는 돼지 난포란의 효율적인 체외성숙에 대해서 배양액내 첨가물질은 물론 나아가서 방법론적인 측면에서 더욱 연구되어져야 할 것이다.ed from Nusselt's film condensation theory on tilted plate. Using those two expressions, a correlation was formulated as a function of heat flux and tilt angle, to determine the total thermal resistance of a tilted thermosyphon. The correlation formula showed a good agreement with the experimental
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[게시일 2004년 10월 1일]
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