본 연구는 체세포를 이용하여 생산된 복제 한우 수소의 번식능력을 검토하기 위해 실시하였다. 복제 한우 수소(C-38 및 C-39) 또는 일반 한우 종모우로부터 정액을 채취하여 정자의 수 및 동결 전 후의 생존성 등을 살펴보았으며, 정자의 운동성 등은 computer assisted sperm analysis(CASA)를 이용하여 측정하였다. 또한, 이들의 수정 능력을 확인하기 위하여 체외수정과 인공수정을 각각 실시하였다. 정액 성상에서는 복제 수소들과 일반 종모우 간에 정액의 양, 정자의 농도 및 동결융해 후의 생존성 등에서 차이가 나타나지 않았다. CASA를 이용한 분석에서 운동성, 곡선 운동 속도(VCL), 직선운동 속도(VSL) 및 평균 진행 속도(VAP) 등은 복제 수소의 정액이 일반 종모우의 정액에 비하여 유의적으로 높았다 (p<0.05).체외수정에 따른 수정란의 분화율 및 배반포로의 발달율은 복제 수소와 일반종모우 간에 차이가 나타나지 않았다. 복제소 정액(C-38)을 이용하여 인공수정을 한 5두의 체세포 복제 대리모에서 암 수 각각 한 두씩의 건강한 복제 후대 송아지 2두를 생산하였다. 이상의 결과를 종합하여 보면, 실험에 공시된 복제 수소 개체간의 차이가 나타나기는 하였지만, 복제 수소는 정액 성상과 정자의 운동성 등에서 일반 종모우와 차이가 없었으며, 또한 인공수정을 통해 송아지를 생산함으로써 정상적인 번식능력이 있음을 확인하였다.
Clomiphene citrate. antiestrogen, was given to 39 infertile males whose spermatogenesis were disturbed and the efficacy of the drug was evaluated at the Department of Urology in 1980. (Table 1). Patients were divided into 3 clinical observation groups such as group I composed of 19 cases of idiopathic azoospermia, group II consisted of 15 cases of oligospermia following the vasovasostomy, and group III comprised 5 cases of testicular azoospermia. (Table 2). Clinical characteristics of these patients were as follows: Age of the patients ranged from 26 to 43 years old with mean of 34, and that of their wives ranged from 24 to 41 years old with mean of 31. Duration of marital life ranged from 1 to 21 years with mean of 5 years. Sizes of testis ranged from 6 to 25 ml with mean of 16 ml. Coital frequency ranged from 0.5 to 6 per week with mean of 2.4 per week. Levels of plasma FSH ranged from 3.15 to 23.06 lU/1 with mean of 8.15 lU/1, those of LH ranged from 2.98 to 19.89 lU/1 with mean of 8.18 lU/1 and those of testosterone ranged from 3.09 to 9.97 ng/ml with mean of 6.48 ng/ml. (Table 3). Clomiphene citrate was given in dosage of 50 mg per day (in d.) orally to 31 patients for 3 to 9 months and in dosage of 100 mg per day (b.i.d.) orally to 8 patients for 3 to 9 months. (Table 8). Semen samples were analysed monthly on each patient by routine analysis techniques. For the assessment of the efficacy of Clomiphene citrate on faulty spermatogenesis following empirical criteria were used: For semen quality: Improvement (I) represents that semen parameter increased more than 25% from basal level after the treatment, Unchange (U) expresses that semen parameter increased less than 25% of basal level or not changed after the treatment and Deterioration (D) means that semen parameter decreased from basal level after the treatment. For fertility unit (total counts ${\times}$ motility ${\times}$ morphology ${\div}10^6$): Improvement (I) represents that fertility unit increased more than 10 units after the treatment, Unchange (U) expresses that fertility unit increased less than 10 units or not changed after the treatment, and Deterioration (D) means that fertility unit decreased after the treatment. (Table 4). Results obtained from the Clomiphene therapy were as follows: Changes of spermiograme before and after the Oomiphene therapy shown in the Table 5. Sperm counts increased from 23 to 31 ${\times}10^6$/ml in group I, from 17 to 29 ${\times}10^6$/ml in group II. Other parameters of spermiogramme were not changed significantly after the treatment. Fertility units increased from 14 to 18 units after the treatment in group I, and from 16 to 18 units after the treatment in group II. Effectiveness of Clomiphene citrate on spermatogenesis was summarised in the Tables 6 and 7. After the treatment, sperm count increased in 11 patients, motility increased in 6 patients, morphology increased in 4 patients and fertility units increased in 9 patients. No sperm could be produced by Clomiphene citrate in group III of testicular azoospermia. Dosage of 50 mg of Clomiphene citrate per day for 3 to 6 months was proved to be the most effective in the present series. (Table 8). Pregnancy occurred in 2 patients after the treatment. No particular side effects were noted by the treatment. Pharmacologic compounds used for male infertility were shown in the Table 9. Reported results of Clomiphene citrate were shown in the Table 10.
Objective: Oxidative stress plays a key role in the pathogenesis of male infertility. But, the adverse effects of oxidative biomarkers on sperm quality remain unclear. This study aimed to investigate the levels of nitric oxide (NO), 8-hydroxydesoxyguanosine (8-OHdG), and total antioxidant capacity (TAC) oxidative biomarkers in seminal plasma and their relationship with sperm parameters. Methods: A total of 77 volunteers participated in the study, including fertile (n = 40) and infertile men (n = 37). NO, 8-OHdG, and TAC levels were measured using the ferric reducing ability of plasma, Griess reagent method and an enzyme-linked immunosorbent assay kit, respectively. Results: The mean values of sperm parameters in the infertile group were significantly lower than those in the fertile group (p< 0.001). The mean 8-OHdG in the seminal plasma of infertile men was significantly higher (p= 0.013) than those of controls, while the mean TAC was significantly lower (p= 0.046). There was no significant difference in NO level between the two groups. The elevated seminal 8-OHdG levels were negatively correlated with semen volume, total sperm counts and morphology (p< 0.001, p= 0.001 and p= 0.052, respectively). NO levels were negatively correlated with semen volume, total sperm counts and morphology (p= 0.014, p= 0.020 and p= 0.060, respectively). Positive correlations between TAC and both sperm count and morphology (p= 0.043 and p= 0.025, respectively) were also found. Conclusion: These results suggested that increased levels of NO and 8-OHdG in seminal plasma could have a negative effect on sperm function by inducing damage to the sperm DNA hence their fertility potentials. Therefore, these biomarkers can be useful in the diagnosis and treatment of male infertility.
Male factor infertility or sub-fertility contributed half of all cases of infertility while the semen abnormality is the current topic of argument. Conventional analysis of semen showed poor correlation with fertility. Therefore, evaluation of current semen analysis method is necessary to improve standards of semen assessment. The goal of this study was to investigate that correlation between motion kinematic before and after capacitation and litter size in porcine. Sperm motility and kinematics were measure by computer-assisted sperm analysis (CASA). The motility of spermatozoa was positively correlated with curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP), and mean amplitude of head lateral displacement (ALH) (p<0.05). Where as VCL positively correlated with VSL, VAP and ALH (p<0.01). Straight-line velocity (VSL) was positively correlated with VAP and ALH (p<0.01). VAP was significantly positively correlated with ALH (p<0.01). Also, we found significant positive correlation among variation of VSL, VAP and ALH (p<0.05). No motility and kinematic parameter are correlated with litter size. However, litter size was significantly correlated with breed (p<0.05). Our results suggested that analysis of sperm motility and kinematics using CASA is questionable for prediction of litter size. However, it has some practical importance to evaluate semen commercially.
본 연구는 돼지 동결-융해 정자의 전배양시 aseorbie acid (Ase)와 ferrous sulfate (Fe$^{2+}$)가 정자의 수정능력획득, 첨체반응 및 난자내 침입능력에 미치는 영향을 검토하였다. 정자의 전배양시 0~1.0 mM의 Fe$^{2+}$의 첨가는 비전배양에 비해 높은 첨체반응 (P<0.05) 및 정자침입율을 얻었다. 이와 같은 결과는 0~0.5mM의 Ase 첨가 시 첨체반응율에서는 같은 결과를 나타냈지만 정자침입율은 오히려 정자의 전배양 보다는 비전배양시 높은 비율을 나타냈다. 한편, Fe$^{2+}$가 함유 되어있는 배양액내에서 2시간동안 정자의 전배양시 0.1 mM Asc의 첨가는 0.5 mM Ase의 첨가에 비해 유의적으로 높은 첨체반응율을 나타냈으나 (P<0.05), Ase의 농도사이에서 정자침입율에는 차이가 없었다. 또한, Ase가 함유된 배양액내에서 정자의 전배양시 0.1 mM Fe$^{2+}$를 첨가했을 때 첨체반응율은 Fe$^{2+}$ 무첨가시 유의적으로 높았으나 (P<0.05), 오히려 가장 낮은 정자침입율을 나타냈다. 이와 같은 결과는 체외에서 돼지정자의 처리시 Fe$^{2+}$ 또는 Ase의 첨가와 정자의 전배양에 의해 첨체반응과 정자침입에 효과적인 작용을 하는 것으로 생각된다.
The quality characteristics of semen are important indicators of the fertility of a boar. Development of genetic markers for the semen quality in boars will be beneficial to the improvement of porcine fertility. We investigated the relationship between the polymorphisms of epidermal growth factor (EGF), prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (PTGS2) and prolactin receptor (PRLR) genes, and semen quality traits in boars. The genomic DNA of 233 boars (157 Duroc and 86 Landrace) from a central testing station was subjected to genotyping for surveying gene frequency. The EGF, PTGS2 and PRLR genotypes were determined using the restriction fragment length polymorphism method. Thirty-seven normal, mature Duroc boars from an AI center were also genotyped and their semen quality traits were collected. The effect of genotype on semen quality traits was analyzed by the least-squares means method using data corrected for season. The frequencies of the AA genotype of EGF, PTGS2 and PRLR in Duroc boars were 0.14, 0.01 and 0.66, respectively. In Landrace, the frequencies of the AA genotype were 0.03, 0.09 and 0.62, respectively. Boars with the BB genotype in EGF, with the AB genotype in PTGS2 and with the AA genotype in PRLR had significantly better semen quality with a higher percentage of normal sperm and a lower percentage of immature sperm than those with other genotypes. These findings imply that polymorphisms of EGF, PTGS2 and PRLR genes might be used as markers for improving the semen quality of boars.
El-Ratel, Ibrahim Talat;Attia, Kandil Abdel Hai;El-Raghi, Ali Ali;Fouda, Sara Fikry
Animal Bioscience
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제34권5호
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pp.844-854
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2021
Objective: The potential of extra virgin olive oil (EVOO), betaine (BET), and ginger (GIN), as natural antioxidants, in reducing negative effects of heat stress on physiological responses, antioxidant capacity, semen quality and fertility of bucks under heat stress were investigated. Methods: Forty adult Animal Production Research Institute line rabbit bucks were distributed randomly into four experimental treatments of ten rabbits each. The first treatment was fed the commercial pellet diet (CPD) without supplementation and served as a control. The other three treatments were fed CPD supplemented with EVOO (300 mg), BET (1,000 mg), and GIN (200 mg) per kg diet for 3 consecutive months during the summer season. Results: Supplementation of EVOO, BET, or GIN improved (p<0.05) the sexual desire, progressive motility, vitality, intact acrosome and membrane integrity, sperm cell concentration, sperm outputs and fertility. Seminal plasma total proteins, globulin, total antioxidant capacity, glutathione and glutathione S-transferase, and initial fructose increased (p<0.05), while total lipids, aspartate and alanine aminotransferases and malondialdehyde decreased (p<0.05) compared with the control. In comparing the natural antioxidants treatments, GIN evoked the largest improvement. Conclusion: The inclusion of GIN (200 mg/kg diet) appeared to improve the sexual desire, semen quality and oxidative stress of bucks. This may be a beneficial supplement for the management of rabbit bucks used in natural mating or artificial insemination.
1. Diluted chicken semen can be preserved at 2 to 5$^{\circ}C$ for 24 to 48 hr with resultant fertility of greater than 90% of that of fresh semen. Turkey semen can be preserved at 10 to 15$^{\circ}C$ for 6 to 24 hr and provide economical fertility. 2. Frozen chicken semen has given variable results; a 21 to 93% fertility ranges as compared to 92 to 94% expected with fresh semen. Highest fertility levels obtained with frozen turkey semen intravaginally inseminated have been 61 and 63% using DMSO and glycerol, respectively, as cryoprotectants. 3. The use of glycerol as a cryoprotectant reauires that its concentration in semen be reduced to less than 2% either by dialysis or centrifugation after thawing and before intravaginal insemination if optimal fertility is to be obtained. 4. The temperature at which cryoprotectants are added to semen and the time allowed for equilibration are important for subsequent fertility pre- and post-freezing. 5. The type of container used for packaging the semen, freeze or cooling rates, thaw rates and level of cryoprotectant all interact in affecting cell survival. 6. Plastic freeze straws as a packaging device for semen offers the following advantages: easy to handle, require minimal storage space, offer a wide range of freeze and thaw rates, and insemination can be made directly from them upon thawing. 7. Controlled slow cooling rates of 1 to 8$^{\circ}C$/min have thus far provided the best results for cooling chicken semen throught the transition phase change (liquid to solid) or critical temperature range of +5 to -20 or -35$^{\circ}C$. 8. Highest fertilities have been achieved with frozen chicken semen where a slow thaw rate (2。 to 5$^{\circ}C$) has been used regardless of the freeze rate. 9. To maintain a constant high level of fertility throughout a breeding season with frozen semen, a higher absolute number of spermatozoa must be inseminated (2 to 3 times as many) as compared to fresh semen since a, pp.oximately 50% are destroyed during processing and freezing. 10. The quality of semen may vary with season and age of the male. Such changes in sperm quality could be accentuated by storage effects. Thus, the correct number of spermatozoa may very well vary during the course of a breeding period. 11. As to time of insemination, it is best to avoid inseminating chicken hens within 1-2 hr after or 3-5 hr before oviposition; and turkey hens during or 7-10 hr before oviposition. 12. The physiological receptiveness of the oviduct at the time of insemination is a very important biological factor influencing fertility levels throughout the breeding season.
For evaluating the boar semen quality, sperm motility (MOT) is an important parameter because the movement of spermatozoa indicates active metabolism, membrane integrity and fertilizing capacity. Estrogen receptors 2(ESR2) is involved in estrogen related apoptosis in cell cycle spermatogenesis, but their functions have not been confirmed in pig until now. Therefore, this study was conducted to analyze their association with sperm motility and kinematic characteristics. DNA samples from 105 Duroc pigs with records of semen motility and kinematic characteristics [Total motile spermatozoa (MOT), Curvilinear velocity(VCL), Straight-line velocity(VSL), the ratio between VSL and VCL(LIN), Amplitude of Lateral Head displacement(ALH)] were analyzed. A SNP in coding region of ESR2 g.35547A > G in exon 5 was associated with MOT (p < 0.05) in Duroc population. Therefore, we suggest that the porcine ESR2 gene may be used as a molecular marker for Duroc boar semen quality, although its functional effects were not defined yet. These results might shed new light on the roles of ESR2 in spermatogenesis as candidate gene for boar fertility, but still the lack of association across populations should be considered.
Choi Eun Mi;Cho Jung Hoon;Jang Jun Bock;Lee Kyung Sub
대한한의학회지
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제26권4호
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pp.31-38
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2005
Objectives: This study was conducted to investigate the effects of Morindae officinalis Radix (巴戟) on the spermatogenesis and antioxidant activities in the Sprague Dawley (SD) rat. Materials and Methods: We choose the 2-month-old SD rats, and administered the extract powder of Morindae officinalis Radix once in a day for 28 days. The control rats were administered normal water in the same way and duration. We observed changes of body weight, surgically isolated testis, epididymis, vascular gland and prostate gland before and after administration of Morindae officinalis Radix extracts in SD Rats. Also we compared the testicular tissue, especially seminiferous tubules between the control and treated groups by histochemical methods. In addition, we examined the total, normal, morphologic and motile sperm in the cauda epididymis, and the activity of catalase and peroxidase in the isolated testis tissue. Results: There was no significant difference between control and treatment groups in the body weight, testis, vascular and prostate gland, but the weight of epididymis showed significant difference in the control group. The concentration of total sperm, the motility and normality of spermatozoa was significantly different when compared with the control group, respectively. In the histological examination of testicular tissues, the tendency of increasement of angiogenesis between seminiferous tubules was observed. And the concentration of spermatogonia, primary and secondary spermatocyte and sperm were higher than that of control testicular tissues. Finally, the activity of catalase and peroxidase related inhibitory molecules of oxidation were slightly increased in the treatment group than those of control group. Conclusions: This study shows that Morindae officinalis Radix has the beneficial effect on the concentration, morphology and motility of sperm, the important factor in male fertility. We can suggest that Morindae officinalis Radix has an effect on the spermatogenesis in the SD rat.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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