Hong, Joon Ki;Lim, Myung-Ho;Kim, Jin A;Kim, Jung Sun;Lee, Seung Bum;Suh, Eun Jung;Lee, Soo In;Lee, Yeon-Hee
Plant Breeding and Biotechnology
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v.2
no.3
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pp.289-300
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2014
A tissue-specific and developmentally expressed gene was isolated from Chinese cabbage (Brassica rapa L. ssp. pekinensis), designated BrREF (B. rapa Rubber elongation factor). BrREF transcripts were expressed at high levels in seedlings and at low levels in flower buds and roots. To study the activity of this promoter, the 2.2 kb upstream sequence of BrREF gene was fused to a β-glucuronidase (GUS) reporter gene and was introduced into Arabidopsis thaliana and B. napus by Agrobacterium-mediated transformation. Strong expression of GUS driven by the BrREF promoter was detected in the cotyledons and hypocotyls of transgenic plant seedlings, but GUS expression was weak in roots, excluding the root tips. GUS expression in the cotyledons and hypocotyls decreased dramatically as the seedlings matured and was not detected in the tissues of mature plants. During floral development, GUS expression was observed in immature anthers. These findings suggest that the BrREF promoter can modulate the tissue-specific and developmental expression of gene at the early stages of growth and development.
The regulation of gene expression in procaryotes is accomplished primarily at the level of transcription. Initiation of transcription is subject to numerous promoter-specific controls which act to ensure coordinate expression of disparate genes. The kinetics of formation of a functional("open") complex at a promoter, prior to the catalytic steps of RNA chain initiation and elongation, is thought to play a major role in controlling the efficiency of transcription of that promotor, since the subsequent processes of nucleotide binding and phosphodiester bond formation are rapid and are not promoter-specific (Mangel and Chamberlin, 1974 Shimamoto et al., 1981)
An, Jeong-O;Jang, Hyeong-Uk;Lee, Hong-Won;An, Ik-Seong;Ham, Seung-Ju;Jeong, Jun-Gi
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.367-369
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2001
Recombinant lipase gene (pYEGA ${\alpha}$ -lip) originated from Bacillus stearothermophillus Ll was overexpressed in Saccharomyces cerevisiae. The lipase gene expression level was compared by controlling a constant specifjc growth rates( ${\mu}$ = 0.03, 0.05, 0.07 and $0.1h^{-1}$. Cell g개wth was successfully controlled at the desired rates by feeding rate of glucose and the formation of by-product or accumulation of the glucose was not observed. Above the growth rate of $0.1h^{-1}$. the desired growth rate could not be achieved caused accumulation of by-products(ethanol). The lipase production increased as the specific growth rate decreased. The specific production rate at the lowest specific growth rater(${\mu}$ =0.03) was above 2- folds than the others.
The key to development of barnase-barstar transgene based hybrid seed technology is the availability of tightly regulated tapetum specific promoter, as any leaky expression of the barnase gene leads to several unintended effects. In the present study, we used two different tapetum specific promoters i.e. promoter of the RTS gene isolated from rice cultivar IR64 and the OsG6b promoter from japonica rice cultivar Hayayuki to express the barnase gene in rice transgenic lines. While viable male sterile transgenic lines could not be obtained with RTS promoter we could develop single copy male sterile lines when the barnase gene was expressed under the OsG6b promoter.
Park, Yongsoon;Moon, Hyoun-Jung;Paik, Doo-Jin;Kim, Deog-Yoon
Nutrition Research and Practice
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v.7
no.3
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pp.185-191
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2013
In previous studies, we found that the consumption of legumes decreased bone turnover in ovariectomized rats. The purpose of the present study is to determine whether the protective effects on bone mineral density (BMD) and the microarchitecture of a diet containing legumes are comparable. In addition, we aim to determine their protective actions in bones by studying bone specific gene expression. Forty-two Sprague-Dawley rats are being divided into six groups during the 12 week study: 1) rats that underwent sham operations (Sham), 2) ovariectomized rats fed an AIN-93M diet (OVX), 3) ovariectomized rats fed an AIN-93M diet with soybeans (OVX-S), 4) ovariectomized rats fed an AIN-93M diet with mung beans (OVX-M), 5) ovariectomized rats fed an AIN-93M diet with cowpeas (OVX-C), and 6) ovariectomized rats fed an AIN-93M diet with azuki beans (OVX-A). Consumption of legumes significantly increased BMD of the spine and femur and bone volume of the femur compared to the OVX. Serum calcium and phosphate ratio, osteocalcin, expression of osteoprotegerin (OPG), and the receptor activator of nuclear factor ${\kappa}B$ ligand (RANKL) ratio increased significantly, while urinary excretion of calcium and deoxypyridinoline and expression of TNF-${\alpha}$ and IL-6 were significantly reduced in OVX rats fed legumes, compared to OVX rats that were not fed legumes. This study demonstrates that consumption of legumes has a beneficial effect on bone through modulation of OPG and RANKL expression in ovariectomized rats and that legume consumption can help compensate for an estrogen-deficiency by preventing bone loss induced by ovarian hormone deficiency.
Lee, Jung Bok;Kim, Jin Mee;Kim, Sun Jong;Park, Jong Hyuk;Hong, Seok Ho;Roh, Sung Il;Kim, Moon Kyoo;Yoon, Hyun Soo
Molecules and Cells
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v.19
no.1
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pp.31-38
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2005
Human embryonic stem (hES) cells have unique features including unlimited growth capacity, expression of specific markers, normal karyotypes and an ability to differentiate. Many investigators have tried to use hES cells for cell-based therapy, but there is little information about the properties of available hES cell lines. We compared the characteristics of three hES cell lines. The expression of SSEA-1, -3, -4, and APase, was examined by immunocytochemistry, and Oct-4 expression was analyzed by RT-PCR. Differentiation of the hES cells in vitro and in vivo led to the formation of embryoid bodies (EBs) or teratomas. We examined the expression of tissue-specific markers in the differentiated cells by semiquantitative RT-PCR, and the ability of each hES cell line to proliferate was measured by flow cytometry of DNA content and ELISA. The three hES cell lines were similar in morphology, marker expression, and teratoma formation. However there were significant differences (P < 0.05) between the differentiated cells formed by the different cell lines in levels of expression of tissue-specific markers such as renin, kallikrein, Glut-2, ${\beta}-$ and ${\delta}-globin$, albumin, and ${\alpha}1-antitrypsin$ (${\alpha}1-AT$). The hES cell lines also differed in proliferative activity. Our observations should be useful in basic and clinical hES cell research.
Cytochrome P450s (CYP) enzymes play a central role in the metabolism of both endogenous and xenobiotic chemical compounds. In particular, therapeutic drugs, natural products and environmental toxicants regulate expression of the tissue-specific CYP enzymes, This can cause CYP-mediated interactions among the chemical compounds such as the ingested drugs and toxicants, resulting in changes in their metabolism. This can lead to the modifications of their therapeutic and toxic effects. Intense investigations in this field throughout the last several decades have resulted in considerable progress in understanding the molecular mechanisms mediating the regulation of CYP gene expression. Now, it is well established that xenobiotic chemicals regulate the expression of specific CYP genes, and the corresponding xenobiotic-sensing receptors that mediate the expression control of specific CYP genes and their signal transduction pathways are involved in this process. This review summarizes the molecular mechanisms by which the well-known major xenobiotic-sensing receptors and other regulators affect the induction of CYP gene expression in response to exposure to various chemicals.
Kim, Shi-Yeon;Min, Kyoung-Jin;Joe, Eun-Hye;Min, Do-Sik
Proceedings of the Korean Society of Plant Biotechnology Conference
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2004.10a
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pp.74-79
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2004
Little is known about the effect of epigallocatechin-3 gallate (ESCG), a major constituent of green tea, on the expression of cyclooxygenase (COX)-2. Here, we studied the role of phospholipase D (PLD) isozymes in EGCG-induced COX-2 expression. Stimulation of human astrocytoma cells (U87) with EGCG induced formation of phosphatidylbutanol, a specific product of PLD activity, and synthesis of COX-2protein and its product, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$). Pretreatment of cells with 1-butanol, but not 3-butanol, suppressed EGCG-induced COX-2 expression and $PGE_2$ synthesis. Furthermore, evidence that PLD was involved in EGCG-induced COX-2 expression w3s provided by the observations that COX-2 expression was stimulated by over-expression of PLD1 or PLD2 isozymes and treatment with phosphatidic acid(PA), and that prevention of PA dephosphorylation by 1-propranolol significantly potentiated COX-2expression Induced by EGCG. EGCG induced activation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK), and specific Inhibition of p38 MAPK dramatically abolished EGCG-Induced PLD activation, COX-2 expression, and $PGE_2$ formation. Moreover, protein kinase C (PKC) inhibition suppressed EGCG-induced p38 MAPK activation, COX-2 expression, and $PGE_2$ accumulation. The same pathways as those obtained in the astrocytoma cells were active in primary rat astrocytes, suggesting the relevance of the findings. Collectively, our results demonstrate for the first time that PLD isozymes mediate EGCG-induced COX-2 expression through PKC and p38 in immortalized astroglial line and normal astrocyte cells.
Tissue-specific gene expression is regulated by epigenetic modification involving trans-acting factors. Here, we identified that the human MAGEB16 gene and its mouse homolog, Mageb16, are only expressed in the testis. To investigate the mechanism governing their expression, the promoter methylation status of these genes was examined in different samples. Two CpG islands (CGIs) in the 5' upstream region of MAGEB16 were highly demethylated in human testes, whereas they were methylated in cells without MAGEB16 expression. Similarly, the CGI in Mageb16 was hypomethylated in mouse testes but hypermethylated in other tissues and cells without Mageb16 expression. Additionally, the expression of these genes could be activated by treatment with the demethylation agent 5'-aza-2'-deoxycytidine (5'-aza-CdR). Luciferase assays revealed that both gene promoter activities were inhibited by methylation of the CGI regions. Therefore, we propose that the testis-specific expression of MAGEB16 and Mageb16 is regulated by the methylation status of their promoter regions.
Objective: Caspase-mediated apoptosis plays a crucial role in the regulation of endometrial and placental function in females. Caspase activity is tightly controlled by members of the inhibitors of apoptosis proteins (IAPs) family. However, the expression and regulation of IAPs at the maternal-conceptus interface has not been studied in pigs. Therefore, we determined the expression of IAP family members baculovirus IAP repeat-containing 1 (BIRC1) to BIRC6 at the maternal-conceptus interface in pigs. Methods: We obtained endometrial tissues from pigs at various stages of the estrous cycle and pregnancy, conceptus tissues during early pregnancy, and chorioallantoic tissues during mid- to late pregnancy and analyzed the expression of IAPs. Furthermore, we determined the effects of the steroid hormones estradiol-17β (E2) and progesterone on the expression of IAPs in endometrial explant tissue cultures. Results: During the estrous cycle, BIRC2 and BIRC5 expression varied cyclically, and during pregnancy, endometrial BIRC1, BIRC2, BIRC3, BIRC4, and BIRC5 expression varied in a stage-specific manner. Conceptus and chorioallantoic tissues also expressed IAPs during pregnancy. The BIRC2 and BIR3 mRNAs were localized to luminal epithelial cells, and BIRC4 proteins to glandular epithelial cells in the endometrium. Exposure of endometrial tissues to E2 increased the expression of BIRC6, while progesterone increased the expression of BIRC1, BIRC4, and BIRC6 in a dose-dependent manner. Conclusion: These results indicated that IAPs were expressed in the endometrium during the estrous cycle and at the maternal-conceptus interface during pregnancy in a stage-specific manner. In addition, steroid hormones were found to be responsible for the expression of some IAPs in pigs. Together, the results suggested that IAPs may play important roles in endometrial and placental functions by regulating caspase action and apoptosis at the maternal-conceptus interface.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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