• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제2권1호
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• pp.14-20
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• 1992

Some microorganisms isolated from soil, including some bacteria and fungi, were found to secrete an extracellular soymilk-clotting enzyme. Among them, an isolated fungus showed the highest soymilk-clotting activity and the strain was assigned to genus Penicillium based on its cultural and morphological characteristics, and designated as Penicillium sp. L-151K. Soymilk-clotting enzymes A and B produced by Penicillium sp. L-151K were purified by ammonium sulfate precipitation and chromatographies on Sephadex G-25, CM-Sephadex, Sephadex G-100 and phenyl-Toyopearl gel. The two purified enzymes A and B were found to be homogeneous by polyacrylamide gel electrophoresis at pH 9.5. The molecular weights of enzyme A and B were 24, 000 and 40, 000, respectively, by gel filtration on Sephadex G-100. Enzymes A and B coagulated soymilk optimally at $60^\circ{C}$ and were stable up to $50^\circ{C}$. Both enzymes were most active at pH 5.8 for soymilk coagulation, and were stable with approximately 80% of original activity from pH 3.0 to 5.0. Each enzyme was an acidic protease with an optimum pH of 3.0 for casein digestion. The soymilk-clotting efficiency of these enzymes was improved with $CaCl_2\;or\;MgCl_2$ when making soymilk-curd.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권1호
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• pp.76-80
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• 1990

두유응고 효소생산균으로 분리, 보고한 균주 중 생산능이 우수한 Bacillus licheniformis 192균주의 두유응고 효소생산을 위한 최적조건을 검토하였다. 최적배지 조성은 potato starch 1.5, 두유 2.0, 대두박 추출액 10 및 KH2PO4 0.6(pH6.1)였으며 35-4$0^{\circ}C$에서 3일간 배양하였을 때 가장 높은 효소활성을 나타내었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제36권1호
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• pp.45-50
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• 1993

생선 시료로부터 대두유를 배지원으로 $10^{\circ}C$에서 증식배양하고, 조효소액의 효소활성을 조사하여 대두유 응고활성이 높고 단백질 분해활성이 낮은 호냉성 세균을 최종 선발하여 Pseudomonas sp.로 잠정 동정하였다. 조효소액의 대두유 응고활성은 $20{\sim}60^{\circ}C$에서 관찰되었고 최적온도는 $40^{\circ}C$였으며, 단백질 분해활성의 최적온도는 $40^{\circ}C$였고 $30^{\circ}C$이하 및 $60^{\circ}C$ 이상에서는 단백질 분해활성이 나타나지 않았다. 조효소의 활성은 pH$5.8{\sim}7.3$ 범위에서 pH가 증가함에 따라 감소되었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제22권3호
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• pp.273-279
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• 1993

박테리아 Bacillus sp. K-295G-7이 생산하는 두유응고효소 I 및 II에 의한 11S globulin (glycinin)의 가수분해 패턴을 조사하였다. 효소 I 과 II에 의한 acidic subunit의 응고시간은 약 4-5 분이었다. 전기 영동의 결과, acidic subunit (A$_3$, M.W=45,000)는 효소반응 2분 이내에 완전히 가수분해되어 분자량 16,000, 20,000의 새로운 band를 형성하였다. 한편 효소 II의 작용으로 약 30,000의 분자량을 가진 분해산물을 생성하였고 효소 I 과 II의 basic subunit 에 대한 가수분해 패턴은 유사하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제33권2호
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• pp.154-160
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• 1990

토양 시료로 부터 선별과정을 거쳐 대두유를 응고시킬 수 있는 extracellular 대두유응고효소를 생산하는 균주를 분리하고 분리세균 K-324-7균주에 의한 효소생산의 확인과 형태적 생리적 성질을 조사한 결과 Bacillus cereus로 동정되었다. Bacillus K-324-7 분리균이 생산하는 대두유 응고효소는 황산암모늄 0.8포화 용액에서 가장 높은 활성을 나타내었으며, 최적활성 pH는 6.1이며, 최적활성온도는 $70^{\circ}C$이었다. 또한 pH 안정성은 pH $6.0{\sim}7.0$ 사이에서 안정하였고 열안정성은 $50^{\circ}C$ 이하의 온도에서 인정하였다. 한편 대두유 응고효소의 생산 배양조건을 검토한 결과 탄소원은 glucose 0.2%, 질소원은 peptone 0.2%, 무기염은 $KH_2PO_4$ 0.5%, pH는 6.5, 배양온도는 $35^{\circ}C$로 배양기간은 3일 정도가 적당하였으며 그 이상 배양하면 생성된 효소의 활성이 감소됨을 알 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권2호
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• pp.109-115
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• 1991

Twenty-five fungal strains producing an extracellular soybean milk clotting enzyme were isolated from 146 soil samples, and identified as 11 species belonging to six genera of Aspergillus oryzae (5 strains), Aspergillus flavus (2 strains), Aspergillus parasiticus (1 strain), Aspergillus tamarii (2 strains), Aspergillus niger (4 strains), Aspergillus fumigatus (2 strains), Mucor hiemalis (2 strains), Wallemia sebi (4 strains), Scopulariopsis condida (1 strain), Fusarium redolens(1 strain) and Verticillum lecanii (1 strain). Among them, Aspergillus oryzae 020 and Aspergillus tamarii 287 showed relatively high soybean milk clotting activity. The coagulabilities of the enzyme from representative strains of those species decreased as the pH of soybean milk increased from 6.0 to 7.0 The optimum temperature for soybean milk clotting enzymes of those strains were 65$^{\circ}C$.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권2호
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• pp.109-114
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• 1989

150개의 토양시료로부터 두유 응고효소를 생산하는 세균 17균주를 분리하였으며 이들 균주는 Bacillus cereus(8균주), Bacillus pumilus(8균주) 및 Bacillus licheniformis(1균주)로 동정하였다. 분리된 두유 응고효소 생산균주중 Bacillus pumilus 118 및 Bacillus licheniformis 192균주가 비교적 높은 두유응고효소 활성을 나타내었고 이들 두 균주의 효소활성은 pH6.0~7.0의 범위에 있어서 pH7.0에 가까울수록 저하되며 그 최적온도는 $65^{\circ}C$였다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.447-450
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• 2000

대두단백을 응고시키는 균체외 효소를 생산하는 박테리아를 포함하는 미생물을 토양으로부터 분리하였다. 이 미생물효소를 이용하여 대두 펩타이드를 생산하는 최적분해조건을 검토하였고, pH 6.1, $65^{\circ}C$에서 1시간 효소처리를 하여 11S globulin를 가수분해, 대두 펩타이드를 얻었다. 효소반응으로 얻은 응고물은 치밀한 구조를 지녔다. 효소반응 가수분해물인 펩타이드 Y와 W는 등전침전으로 얻은 가수분해물에 비해 그 용해성이 뛰어났다.