목적: 인간간엽줄기세포를 연골세포로 분화유도하는 성장인자 규명 및 주사침 크기 차이에 따른 세포증식 증진 비교이다. 연구 재료 및 방법: 인간간엽줄기세포를 연골세포유도배지에서 14, 21, 28일 배양하여 BMP-2, BMP-4, BMP-6, BMP-7, BMP-13, FGF-2, FGF-18, IGF-1, TGF-β1. TGF-β2, TGF-β3를 투여한 군들과 대조군에서 SOX-5, SOX-6, SOX-9 및 FOXO1A의 발현량을 분석하였다. 18, 21, 26 게이지(G) 주사침을 사용하여 배양접시에 인간간엽줄기세포를 접종하고 24, 48, 72시간 후 각각 세포증식을 측정하였다. 결과: 기존에 알려진 FGF, IGF-1, TGFβ1와 함께, BMP-2, BMP-4, BMP-6, BMP-7 등 BMP family 성장인자들에 의하여 연골세포분화 전사인자 유전자들인 SOX-5, SOX-6, SOX-9, FOXO1A의 유전자발현이 증가하였다. 48시간에서는 가장 작은 주사침인 26G군이 대조군 및 18G군에 비하여 유의한 세포증식 증진을 보였으며, 72시간에서도 가장 작은 주사침인 26G군이 대조군에 비하여 유의한 세포증식 증진을 보였다. 결론: 인간간엽줄기세포의 연골세포분화 유도능을 가진 성장인자들을 고찰할 수 있었고 주사침 크기에 따른 세포증식 변화를 규명할 수 있었다.
Objective : Cancer-testis (CT) genes are considered promising candidates for immunotherapeutic approaches. The aim of this study was to investigate which CT genes should be targeted in immunotherapy for brain tumors. Methods : We investigated the expression of 6 CT genes (MAGE-E1, SOX-6, SCP-1, SSX-2, SSX-4, and HOMTES-85) using reverse-transcription polymerase chain reaction in 26 meningiomas and 32 other various brain tumor specimens, obtained from the patients during tumor surgery from 2000 to 2005. Results : The most frequently expressed CT genes of meningiomas were MAGE-E1, which were found in 22/26 (85%) meningioma samples, followed by SOX-6 (9/26 or 35%). Glioblastomas were most frequently expressed SOX-6 (6/7 or 86%), MAGE-E1 (5/7 or 71%), followed by SSX-2 (2/7 or 29%) and SCP-1 (1/7 or 14%). However, 4 astrocytomas, 3 anaplastic astrocytomas, and 3 oligodendroglial tumors only expressed MAGE-E1 and SOX-6. Schwannomas also expressed SOX-6 (5/6 or 83%), MAGE-E1 (4/6 or 67%), and SCP-1 (2/6 or 33%). Conclusion : The data presented here suggest that MAGE-E1 and SOX-6 genes are expressed in a high percentage of human central nervous system tumors, which implies the CT genes could be the potential targets of immunotherapy for human central nervous system tumors.
본 연구에서는 폐수처리장의 바이오필터로부터 Comamonas sp. NLF-7-7 균주를 분리하고 유전체서열을 PacBio RS II와 Illumina HiSeqXten 플랫폼을 사용하여 분석하였다. 염색체의 크기는 3,333,437 bp로 G + C 구성 비율은 68.04%, 총 유전자수는 3,197개, rRNA는 9개 및 tRNA는 49개로 구성되었다. 본 유전체는 오염물질분해와 플록형성에 관여하는 황산화 경로 유전자(SoxY, SoxZ, SoxA 및 SoxB)와 플록형성 경로 유전자(EpsG, EpsE, EpsF, EpsG, EpsL 및 glycosyltransferase)를 포함하고 있다. 이러한 Comamonas sp. NLF-7-7 균주는 폐수를 정화하는데 활용될 수 있다.
Retinoic acid (RA)는 Vitamin A의 대사산물로서 토끼 관절 연골세포의 탈분화를 유도하는 물질로 알려져 있다. 그러나 RA가 탈분화를 조절하는 정확한 메커니즘은 잘 알려져 있지 않다. 따라서, Nitric Oxide (NO)가 유도하는 탈분화에 미치는 RA의 분자적 기전에 관한 연구를 수행하였다. 그 결과, RA는 NO가 유도하는 탈분화를 촉진시키는 것을 확인 할 수 있었다. 이와 같은 결과는 Western blot analysis를 통해 연골세포 분화의 표지 단백질인 type II collagen 및 Sox-9의 발현양상을 통해 확인 할 수 있었으며, Alcian blue staining을 통해 연골세포의 기질을 구성하고 있는 단백질인 sulfated proteoglycan의 발현량을 통해서도 확인 할 수 있었다. 또한, RA는 NO 가 유도하는 ERK의 활성을 더욱 증가 시켰다. ERK의 억제자인 PD98059를 사용하여 ERK의 활성을 억제하였을 때 RA가 감소시키는 type II collagen 및 Sox-9의 발현과 sulfated proteoglycan의 생성 양상이 PD98059에 의해 다시 회복되는 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 모든 결과를 종합해 볼 때, RA는 NO가 유도하는 탈분화를 ERK 신호전달경로를 통해 조절하는 것을 확인 할 수 있었다.
Objective : This study investigates the effect of valproic acid (VPA) on expression of neural stem/progenitor cells (NSPCs) in a rat spinal cord injury (SCI) model. Methods : Adult male rats (n=24) were randomly and blindly allocated into three groups. Laminectomy at T9 was performed in all three groups. In group 1 (sham), only laminectomy was performed. In group 2 (SCI-VPA), the animals received a dose of 200 mg/kg of VPA. In group 3 (SCI-saline), animals received 1.0 mL of the saline vehicle solution. A modified aneurysm clip with a closing force of 30 grams was applied extradurally around the spinal cord at T9, and then rapidly released with cord compression persisting for 2 minutes. The rats were sacrificed and the spinal cord were collected one week after SCI. Immunohistochemistry (IHC) and western blotting sample were obtained from 5 mm rostral region to the lesion and prepared. We analyzed the nestin immunoreactivity from the white matter of ventral cord and the ependyma of central canal. Nestin and SOX2 were used for markers for NSPCs and analyzed by IHC and western blotting, respectively. Results : Nestin and SOX2 were expressed significantly in the SCI groups but not in the sham group. Comparing SCI groups, nestin and SOX2 expression were much stronger in SCI-VPA group than in SCI-saline group. Conclusion : Nestin and SOX2 as markers for NSPCs showed increased expression in SCI-VPA group in comparison with SCI-saline group. This result suggests VPA increases expression of spinal NSPCs in SCI.
Park, Jeong Jin;Kim, Bong Jun;Youn, Dong Hyuk;Choi, Hyuk Jai;Jeon, Jin Pyeong
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제63권5호
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pp.559-565
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2020
Objective : Conflicting results regarding SOX17 genes and the risk of intracranial aneurysms (IA) exist in the Korean population, although significant positive correlations were noted in genome-wide association studies in European and Japanese populations. Therefore, we aimed to investigate an association between SOX17 gene variants and IA using exome sequencing data. Methods : This study included 26 age-gender matched IA patients and 26 control subjects. The SOX17 gene variants identified from whole-exome sequencing data were examined. Genetic associations to estimate odds ratio (OR) and 95% confidence interval (CI) were performed using the software EPACTS. Results : The mean age of the IA and control groups were 51.0±9.3 years and 49.4±14.3 years, respectively (p=0.623). Seven variants of SOX17, including six single nucleotide polymorphisms and one insertion and deletion, were observed. Among these variants, rs12544958 (A>G) showed the most association with IA, but the association was not statistically significant (OR, 1.97; 95% CI, 0.81-4.74; p=0.125). Minor allele frequencies of the IA patients and controls were 0.788 and 0.653, respectively. None of the remaining variants were significantly associated with IA formation. Conclusion : No significant association between SOX17 gene variants and IA were noted in the Korean population. A large-scale exome sequencing study is necessary to investigate any Korean-specific genetic susceptibility to IA.
Jong-Nam Oh;Mingyun Lee;Gyung Cheol Choe;Dong-Kyung Lee;Kwang-Hwan Choi;Seung-Hun Kim;Jinsol Jeong;Chang-Kyu Lee
Animal Bioscience
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제36권8호
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pp.1180-1189
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2023
Objective: Discovering the mechanism of cell specification is important to manipulate cellular lineages. To obtain lineage-specific cell lines, the target lineage needs to be promoted, and counterpart lineages should be suppressed. Embryos in the early blastocyst stage possess two different cell populations, the inner cell mass (ICM) and trophectoderm. Then, cells in the ICM segregate into epiblasts (Epi) and primitive endoderm (PrE). PrE cells in embryos show specific expression of platelet-derived growth factor (PDGF) and its receptor, PDGF receptor A (PDGFRA). In this study, we suppressed PDGF signaling using two methods (CRISPR/Cas9 injection and inhibitor treatment) to provide insight into the segregation of embryonic lineages. Methods: CRISPR/Cas9 RNAs were injected into parthenogenetically activated and in vitro fertilized embryos. The PDGF receptor inhibitor AG1296 was treated at 0, 5, 10, and 20 µM concentration. The developmental competence of the embryos and the number of cells expressing marker proteins (SOX2 for ICM and SOX17 for PrE) were measured after the treatments. The expression levels of the marker genes with the inhibitor were examined during embryo development. Results: Microinjection targeting the PDGF receptor (PDGFR) A reduced the number of SOX17-positive cell populations in a subset of day 7 blastocysts (n = 9/12). However, microinjection accompanied diminution of Epi cells in the blastocyst. The PDGF receptor inhibitor AG1296 (5 µM) suppressed SOX17-positive cells without reducing SOX2-positive cells in both parthenogenetic activated and in vitro fertilized embryos. Within the transcriptional target of PDGF signaling, the inhibitor significantly upregulated the Txnip gene in embryos. Conclusion: We identified that PDGF signaling is important to sustain the PrE population in porcine blastocysts. Additionally, treatment with inhibitors was a better method to suppress PrE cells than CRISPR/Cas9 microinjection of anti-PDGF receptor α gene, because microinjection suppressed number of Epi cells. The PDGF receptor might control the number of PrE cells by repressing the proapoptotic gene Txnip. Our results can help to isolate Epi-specific cell lines from blastocysts.
The cap-and-trade system against the air pollutants in the Seoul Metropolitan Area (SMA), Korea has been implemented since 2008 and will be implemented other areas in Korea on 2020. In this study, to identify the outcome and effectiveness of the cap-and-trade system in the SMA, (1) the rate of change for NOx and SOx emissions, (2) differences between the real emission and allocated amount, and (3) the status of trading are reviewed. It was found that the NOx and SOx emissions from the sources under the cap-and-trade system decreased in the SMA but the reduction was mainly due to the reduction of fuel usage not related to the system. It was found that the average percentage of annual emission in the SMA to the allocated amount between 2008 and 2018 was 66.9% for NOx and 69.3% for SOx, respectively. It suggests that there was over allocation of the emission amounts. The average trading prices in the SMA were 0.193 $/kg for NOx and 0.128 $/kg for SOx, far lower than those in RECLAIM, 131.942 $/kg and 81.677 $/kg, respectively. It was suggested that (1) the cap system for NOx and SOx emissions should be implemented only for the area with high emission ratio from large point sources, (2) the trade system is not suitable for the effective implementation of the cap system, and (3) Korean government should not allow over allocation in order to ensure sound market function without delaying the introduction of technology.
In this study, the anti-osteoarthritis effects of Cynanchum wilfordii, Phlomis umbrosa, and Angelica gigas extract (CPAE), observed and confirmed in previously clinical studies were further investigated by in vitro and in vivo studies. Anabolic biomarkers related to healthy cartilage maintenance, such as aggrecan, type II collagen ${\alpha}$-1 (Col2a1), sex determining region Y-box-9 (Sox-9), and catabolic biomarkers related to osteoarthritis, such as cyclooxygenase-2 (Cox-2), matrix metalloproteinase-13 (Mmp13), and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($Nf{\kappa}b$), were evaluated by quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction and reporter gene assay. In vitro study results showed significant changes in both anabolic and catabolic biomarkers. For anabolic factors, significant changes in the level of aggrecan (P<0.05), Col2a1 (P<0.05), and Sox-9 (P<0.01) activation were shown after treatment of cartilage cells with CPAE (50 ng/mL) with similar efficacy compared to insulin growth factor, the positive control (100 ng/mL). For catabolic factors, significant changes in the inhibition activity of Cox-2 (P<0.05), Mmp13 (P<0.01), and $Nf{\kappa}b$ (P<0.05) were shown for CPAE (50 ng/mL) with similar efficacy compared to Celecoxib, the positive control ($10{\mu}M$). In the in vivo carrageenan-induced paw edema model study results showed that CPAE-treated groups (100 mg/kg) and Celecoxib-treated groups (60 mg/kg) showed comparably significant efficacy of inhibition by 37.1% and 52.1%, respectively. Furthermore, CPAE (200 mg/kg) showed similar effect to Celecoxib (60 mg/kg) with an inhibition rate of 54.3%. This result confirms that CPAE effectively inhibited the inflammation-induced osteoarthritis symptoms.
내분비계 장애물질 (Endocrine Disruptors: EDs)이란 ‘내분비 기능에 변화를 일으켜, 생체 또는 그 자손의 건강에 위해한 영향을 미치는 외인성 물질’로서 세계야생생물보호기금 (World Wildife Fund: WWF)의 목록에는 67 여종, 일본 후생성에서는 142 여종의 물질을 내분비계 장애물질로 분류하고 있다. 이렇게 분류된 내분비계장애물질 가운데에는 많은 종류의 농약이 포함되어 있으며, 이들이 자연상태계에 미치는 영향에 대한 많은 보고가 있다. 양서류는 먹이연쇄의 중위포식자로 내분비계 장애물질의 순환 및 생채축적 회로에서 중요한 위치를 갖는다. 또한 농경지나 계류 등에 서식하며 산란하는 습성이 있다. 이러한 서식지는 농약 등에 노출받기 쉬우므로 환경오염평가 대상동물로 중요하다. 본 연구에서는 국내에서 사용되고 있는 제초제, 살충제 등이 양서류 발생에 미치는 영향을 평가하고, 이들 물질에 의한 노출을 평가할 수 있는 biomarker 유전자를 발굴하고자 하였다. 우리나라 전역에 많이 분포하는 무당개구리(Bombina orientalis)의 초기 배아발생 과정에서 이들 농약을 처리하였을 때, 물질의 종류에 따라 정도의 차이는 있으나 농도 의존적으로 배아 및 올챙이의 치사율이 높게 나타났다. 또한 농약은 배아 및 올챙이의 기형을 유발하였다. 기형의 종류는 농약에 따라 서로 상이한 형태로도 나타났으나, 특히 몸통휨 또는 꼬리휨등의 척추골 기형이 많이 나타났다. 환경 위해성 평가 biomarker 유전자로서 골격계 형성에 관여하는 Sox9 유전자를 선택하였다. 무당개구리에서 처음으로 Sox9 유전자를 동정하였으며, 농약을 처리한 실험군에서의 Sox9 유전자의 발현 양상은 대조군에 비하여 높게 나타났다. 본 연구결과 생태계에서 내분비계 장애물질의 위해성 평가를 위해 양서류 초기배아의 치사 및 기형의 정도를 관찰하는 방법이 유효할 것으로 사료된다. 또한 야생동물의 biomarker 유전자를 발굴과 이를 이용한 위해성 평가는 더욱 정밀한 평가법으로 유용할 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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