Kim, Y.;Woo, S.C.;Song, G.C.;Park, H.Y.;Im, B.S.;Kim, G.W.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제15권9호
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pp.1237-1243
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2002
We have developed a reliable and noninvasive method for swine genotyping of single locus nuclear gene with aged single hair follicles delivered by general mail. The method is based on booster and nested PCR amplification with step-wise increase of primers and dNTPs concentrations followed by restriction endonuclease digestion. To establish this method, the ryanodine receptor (RYR 1) locus which is an economically important trait in swine industry was employed for genotyping experiment. The 3-step PCR amplication method is much less dependent on the quantity and quality of template DNA and produces enough amplification product for the detection on the ethidium bromide-stained gel such as RFLP analysis. A total of 120 pigs were subjected to the RYR 1 genotyping analysis using three-step PCR method which amplified enough quantity of PCR products from the aged single hair follicles for RFLP analysis and genotyping results were identical to the results of the corresponding ethanol-fixed skeletal muscle tissue. This approach will be a great help for porcine breeders and investigators in genotyping of swine. They can receive genotyping results later by simply plucking single hairs of their pigs at farm and sending them in general mail to the diagnostic laboratory which eliminates the inconveniences to collect ear tissue or blood cells from pigs, or the investigator's need for travel to farms in order to collect fresh hair samples.
Objectives: Calpain, a calcium-dependent cysteine proteinase, may be one of the proteolytic enzymes that mediate cartilage degradation associated with rheumatoid arthritis. The object of this study is to ascertain immunohistochemically whether calpain is present in the inflamed joints of collagen-induced arthritis of rats, and examine the effect of Cortex Acanthopanacis Senticosi on the expression of calpain. Methods: Male Lewis rats, around 200g of body weight, were immunized with bovine type II collagen. After 3 weeks from first immunization, rats were divided into arthritic control (n=6) group and Cortex Acanthopanacis Senticosi-treated (n=6) group. Non-immunized rats served as the normal (n=6) group. All animals were sacrificed at 15 days post-treatment and tibiotarsal joints were removed. Calpain immunohistochemistry was performed on the midsagittal section of the tibiotarsal joint. Results: All animals of the control and treated groups showed ankylosing osteoarthritis. However, the animals of the treated group showed alleviation in the fibrous ankylosis, destruction of articular cartilage and destruction of subchondral bony tissue compared with the animals of the control group. Calpain was expressed in the chondrocyte lacunae of growing articular cartilage, in the skeletal muscle fibers, in the peripheral nerves, and in the vessel walls around the joints of all groups. In the control and treated groups, calpain was also expressed in proliferating synovial epithelia, subsynovial stroma cells, surface of articular cartilage, and fibrous pannus around destructive subchondral bony tissue. However, the expression density of calpain in the treated group was diminished compared with the control group, especially in surface of articular cartilage and fibrous pannus. Conclusions: These observations indicated that calpain plays an important role in the destruction of cartilage and bone in collagen-induced arthritis of rats, and also indicated that Cortex Acanthopanacis Senticosi inhibits the development of arthritis by decreasing the expression of calpain.
Seo, Dae Yun;Lee, Sung Ryul;Heo, Jun-Won;No, Mi-Hyun;Rhee, Byoung Doo;Ko, Kyung Soo;Kwak, Hyo-Bum;Han, Jin
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제22권3호
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pp.235-248
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2018
Ursolic acid (UA) is a natural triterpene compound found in various fruits and vegetables. There is a growing interest in UA because of its beneficial effects, which include anti-inflammatory, anti-oxidant, anti-apoptotic, and anti-carcinogenic effects. It exerts these effects in various tissues and organs: by suppressing nuclear factor-kappa B signaling in cancer cells, improving insulin signaling in adipose tissues, reducing the expression of markers of cardiac damage in the heart, decreasing inflammation and increasing the level of anti-oxidants in the brain, reducing apoptotic signaling and the level of oxidants in the liver, and reducing atrophy and increasing the expression levels of adenosine monophosphate-activated protein kinase and irisin in skeletal muscles. Moreover, UA can be used as an alternative medicine for the treatment and prevention of cancer, obesity/diabetes, cardiovascular disease, brain disease, liver disease, and muscle wasting (sarcopenia). In this review, we have summarized recent data on the beneficial effects and possible uses of UA in health and disease managements.
The pharmacological properties of ginseng are mainly attributed to ginsenosides, the active constituents that are found in the extracts of different species of ginseng. Lately; the studies on ginsenosides are mainly focused on IH-901, a major intestinal bacterial metabolite of ginsenosides. In this study; we examined the anti-diabetic activity of IH-901 in C57BU61 db/db mice model. IH-901 was administrated orally at a dose of 20 mg/kg for 5 weeks. During the experimental period, body weight and blood glucose levels were measured every week. After 5 weeks, db/db mice were sacrificed and diabetic parameters were analyzed. IH-901 treated group showed a significant decrease in fasting blood glucose levels (from 10.5 mM to 9.4 mM), insulin resistance index (from 163.6 to 100.2) and triglyceride levels (from 115.3 to 70.1) compared to the diabetic control. In Pancreatic islets morphology; IH-901 treated group revealed much less infltrated mononuclear cells, indicating that IH-901 recovered ${\beta}$-cell damage due to hyperglycemia. In addition, IH-901 upregulated expressions of glucose transporter 4 (GLUT4) and PPAR-${\gamma}$ in skeletal muscle and adipose tissue, respectively. Taken together IH-901might be a potential anti-hyperglycemic agent with insulin sensitizing effect.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제30권4호
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pp.271-281
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2004
Adenoid cystic carcinoma is malignant tumor in salivary gland, and its behavior is very invasive. Of all malignant tumor adenoid cystic carcinoma is occured in frequency of 4.4% in major salivary gland, and 1.29% in minor salivary gland. Histopathologically, adenoid cystic carcinoma is characterized by a cribriform appearance, and tubular form and solid nest type tumor can be seen. The tumor cell structure composed of modified myoepithelial cell, and basaloid cell. Extracellular matrix of this tumor cell contains variable ground substance with basement membrane component. Basement membrane matrix composed of collagen fibers, glycoproteins, proteoglycans, and its function is well known that it participate in differentiation, proliferation, and growth of tumor cell. Basement membrane molecule is essential for invasion of peripheral nerve, blood vessel, skeletal muscle in tumor cell of adenoid cystic carcinoma. In many studies, the tumor cell of adenoid cystic carcinoma containing modified myoepithelial cell participate in synthesis of proteoglycan. In this study, tissue sample of adenoid cystic carcinoma of human salivary gland were obtained from 15 surgical specimen, and all specimen were routinely fixed in 10% formalin and embedded. Serial $4-{\mu}m$ thick sections were cut from paraffin blocks. the histopathologic evaluation was done with light microscopy. And, the immunohistochemical staining, characteristics of glycosaminoglycan were observed. For biochemical analysis of glycosaminoglycan, isolation of crude glycosaminoglycan from tumor tissue and Western bolt analysis were carried out. With transmission electomicroscopy, tumor cell were observed. Biologic behavior of adenoid cystic carcinoma was observed with distribution and expression of basement membrane of glycosaminoglycan in tumor cells, The results obtained were as follows: 1. In immunohistochemical study, chondroitin sulfate is postively stained in tumor cell and interstitial space, dermatan sulfate is weakly stained in ductal cell. But keratan sulfate is negatively stained. 2. In immunohistochemical study, heparan sulfate is strong positive stained in tumor cell and basement membrane, especially in invasion area to peripheral nerve tissue. 3. In transmission electromicroscpic view, the tumor cells are composed modifed myoepithelial cells, and contains many microvilli and rough endoplasmic reticulum. 4. In Western blot analysis, the expression of glycosaminoglycan is expressed mostly in heparan sulfate. From the results obtained in this study, tumor cell of adenoid cystic carcinoma is composed modified myoepithelial cell, and glycosaminoglycan of basement membrane molecule of heparan sulfate and chondroitin sulfate mostly participate in the development and invasiveness of adenoid cystic carcinoma by immunohistochemical study and western blot analysis.
성호르몬은 근육의 발달(아나볼릭 효과)에 관여하는 것으로 잘 알려져 왔으며 인체의 치료제로 넓게 사용되고 있다. 돼지고기에는 주로 성선(정소와 난소)에서 생산되어 고기에 축적된 다양한 아나볼릭 효과를 나타내는 성호르몬이 많이 존재하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구는 돼지고기에 존재하는 아나볼릭 스테로이드를 추출하여 근육세포의 증식과 분화에 미치는 영향을 파악하고자 실시하였다. 본 연구에서 돼지의 각 조직으로부터 아나볼릭 스테로이드를 추출하는 3가지 방법(M1, M2, M3)을 개발하였다. 3가지 모든 추출방법에서 아나볼릭 스테로이드가 추출되었으며 특히 M3에서 조직 1g당 가장 많은 양을 획득할 수 있었다. M3를 이용하여 아나볼릭 스테로이드를 추출했을 때 돼지고기의 근육과 지방에서는 스테로이드 호르몬 양이 수컷에서 가장 높았고, 혈청에서는 nandrolone 과 testosterone의 양은 수컷에서 가장 높았으며, estrone와 $17{\beta}$-estradiol의 양은 비슷하였다. 근육세포 증식은 돼지 아나볼릭 스테로이드의 농도 의존적으로 촉진되었으며, M3에서 가장 빠르게 증식되었다. 근육세포의 분화는 추출된 아나볼릭 스테로이드 처리구가 대조구보다 더 효과적으로 분화가 잘 되는 것을 세포 모양과 유전자(AR, myoD, desmin, myogenin)를 통하여 확인할 수 있었다. 특히 M3에서 추출된 아나볼릭 스테로이드에서 myogenin과 AR 유전자가 유의적으로 높게 발현되었다(p<0.001). 전체적으로 돼지의 아나볼릭 스테로이드는 근육세포의 성장과 분화를 촉진하였다. 따라서 돼지고기에 있는 아나볼릭 스테로이드의 섭취를 통해 인체 근육의 성장과 발달에 긍정적 효과를 나타낼 수 있을 것으로 사료된다.
Cancer cachexia는 지방조직과 근육계 조직의 손실에 따른 체중의 현격한 감소를 특징으로 하고 있어 궁극적으로는 암 치료제에 대한 반응을 낮출 뿐만 아니라, 삶의 양은 물론 질도 낮추게 되는 시급히 해결되어야 하는 미충족 의료수요중의 하나이다. 아직까지 임상에서는 수많은 노략에도 불구하고 일부 완화시킬 수 있는 약제가 있기는 하나, 전반적으로 해결이 가능한 약제나 치료 방법이 아직은 없는 실정이다. 그러므로 이를 해결할 수 있는 방법으로 동물모델이 필요한 질환이라 하겠다. 이러한 배경하에 연구자 등은 우선 동물모델을 수립하고 이를 기반으로 적절한 치료제를 개발하기 목적으로 본 연구에서는 C26 대장 선암 세포를 이용한 Cancer cachexia 동물모델을 수립하여 이 모델에서의 변화를 소개함으로써 향후 더 진보된 치료제 개발이나 병태생리를 연구하는데 도움을 주고자 본 연구를 시행하여 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. C26 adenocarcinoma를 대퇴부 주입 후 시간 경과에 따라 몸무게의 변화가 현저하여 2주 이후에 유의한 몸무게의 감소, 식욕부진, 활동감소가 관찰되었고, 이때의 혈청 Cytokine 및 이를 조절하는 여러가지 전사인자의 변화가 선행되었고, 현저한 근육계의 근감소가 관찰되었으며, 실험동물은 3주에 40%가 사망하는 변화를 보였다. 연구자 등은 본 동물모델은 향후 새로운 치료약제 개발이나 Cancer cachexia 병태생리 연구에 매우 도움이 되는 수립하기 간편하며, 기저 분자생물학적 변화를 관찰할 수 있는 우수한 Cancer cachexia 모델이라 결론지을 수 있었다.
Park Sun Young;Kim Jong-Keun;Kim In Jin;Choi Bong Kyu;Jung Kyu Yong;Lee Seoul;Park Kyung Jin;Chairoungdua Arthit;Kanai Yoshikatsu;Endou Hitoshi;Kim Do Kyung
Archives of Pharmacal Research
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제28권4호
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pp.421-432
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2005
In order to understand the renal reabsorption mechanism of neutral amino acids via amino acid transporters, we have isolated human L-type amino acid transporter 2 (hLAT2) and human T-type amino acid transporter 1 (hTAT1) in human, then, we have examined and compared the gene structures, the functional characterizations and the localization in human kidney. Northern blot analysis showed that hLAT2 mRNA was expressed at high levels in the heart, brain, placenta, kidney, spleen, prostate, testis, ovary, lymph node and the fetal liver. The hTAT1 mRNA was detected at high levels in the heart, placenta, liver, skeletal muscle, kidney, pancreas, spleen, thymus and prostate. Immunohistochemical analysis on the human kidney revealed that the hLAT2 and hTAT1 proteins coexist in the basolateral membrane of the renal proximal tubules. The hLAT2 transports all neutral amino acids and hTAT1 transports aromatic amino acids. The basolateral location of the hLAT2 and hTAT1 proteins in the renal proximal tubule as well as the amino acid transport activity of hLAT2 and hTAT1 suggests that these transporters contribute to the renal reabsorption of neutral and aromatic amino acids in the basolateral domain of epithelial proximal tubule cells, respectively. Therefore, LAT2 and TAT1 play essential roles in the reabsorption of neutral amino acids from the epithelial cells to the blood stream in the kidney. Because LAT2 and TAT1 are essential to the efficient absorption of neutral amino acids from the kidney, their defects might be involved in the pathogenesis of disorders caused by a disruption in amino acid absorption such as blue diaper syndrome.
목적: 활액막 육종에서 TLE1의 발현과 정상 조직에서의 발현을 비교하고 환자의 예후와의 관련성을 알아 보고자 한다. 대상 및 방법: 2001년 1월부터 2008년 9월까지 삼성서울병원에서 수술 및 치료를 시행한 36예의 활액막 육종 환자들의 조직과 정상 대조군 조직들에서 TLE1의 발현을 비교 분석하였다. TLE1의 발현 정도를 음성, 약 양성, 중등도 양성, 강 양성으로 분류하였고, 환자들의 전체 생존율을 분석하여 관련성을 알아보았다. 결과: 정상 간엽조직에서는 TLE1의 발현이 관찰되지 않았고, 분화가 빠른 정상 혈관의 내피세포와 상피세포에서 TLE1의 발현이 약하게 관찰되었다. 활액막 육종 36예 중 35예에서 TLE1의 발현을 확인할 수 있었다. 이 중 28예에서는 중등도 이상의 발현, 5예에서는 약한 발현, 2예는 매우 강한 강도의 발현을 보였으며, 활액막 육종에서 TLE1의 발현 정도와 예후와는 통계적 연관성이 없었다. 결론: TLE1은 향후 활액막 육종의 진단에 효과적으로 사용될 수 있을 것으로 생각되며, 정상 조직에서의 발현도가 낮으므로 종양의 표적 치료시의 좋은 target으로 사용될 수 있는 새로운 인자로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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