• International Journal of Oral Biology
• /
• 제45권2호
• /
• pp.70-75
• /
• 2020

The aim of this study was to identify strain KCOM 1265 isolated from subgingival plaque at the species level by comparing 16S ribosomal RNA gene (16S rDNA) and genome sequences. The whole genome of strain KCOM 1265 was extracted using the phenol-chloroform extraction method. 16S rDNA was amplified using polymerase chain reaction and sequenced using the dideoxy chain termination method. Pairwise genome comparison was performed using average nucleotide identity (ANI) and genome-to-genome distance (GGD) analyses. The data showed that the percent similarity of 16S rDNA sequence of strain KCOM 1265 was 99.6% as compared with those of Fusobacterium polymorphum ATCC 10953^T and Fusobacterium hwasookii KCOM 1249^T. The ANI values of strain KCOM 1265 with F. polymorphum ATCC 10953^T and F. hwasookii KCOM 1249^T were 95.8% and 93.0%, respectively. The GGD values of strain KCOM 1265 with F. polymorphum ATCC 10953^T and F. hwasookii KCOM 1249^T were 63.9% and 49.6%, respectively. These results indicate that strain KCOM 1265 belongs to F. polymorphum.

• 한국지하수토양환경학회:학술대회논문집
• /
• 한국지하수토양환경학회 2003년도 추계학술발표회
• /
• pp.438-441
• /
• 2003

The present study reports the novel physiological function of dissimilatory perchlorate reduction by two strains JB101 and JB109 isolated from a sewage treatment facility in Incheon, South Korea. The physiological data of the isolates showed good correspondence with the members of the family Enterobacteriaceae. The partial 16S rRNA and 16S rDNA sequence of strains JB101 and JB109 showed similarity of 99.8% to Citrobacter amalonaticus and 98% to Citrobacter farmari, respectively. The study infers toward possibility of Citrobacter spp. to form an important group of dissimilatory perchlorate reducers within the (equation omitted) subclass of Proteobacteria because the majority of the known. members belong to two monophyletic groups namely Dechloromonas and Dechlorosoma in $\beta$ subclass of Proteobacteria.

• 미생물학회지
• /
• 제45권2호
• /
• pp.155-162
• /
• 2009

계통적으로 근연하며 지리적 분포가 유사한 두 종의 Spirastrella 속의 해양 해면, S. panis와 S. abata의 배양 가능한 공생세균 군집구조를 16S rDNA-RFLP 방법에 의해 분석하였다. 공생세균의 배양은 해면추출물 3%를 포함하는 MA 배지를 사용하였다. 증폭된 16S rDNA의 RFLP (restriction fragment length polymorphism) 분석을 위한 제한효소로 HaeIII와 MspI을 이용하였으며, 그 결과 24개의 RFLP type을 구별할 수 있었다. 각 패턴별로 1~5개의 분리균주를 선별하여 부분 염기서열 분석 결과, 알려진 세균 종과 98.4% 이상의 유사도를 나타내었으며 2종의 Spirastrella 해면으로부터 분리된 세균들은 모두 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria 4개의 강(class)에 포함되었다. Alphaproteobacteria는 S. abata에서 39.3%, S. panis에서 47.6%가 관찰되어 두 해면에서 우점하는 세균 군집이었다. Gammaproteobacteria의 경우 S. abata에서 38.5%로 관찰된 반면 S. panis에서 1.6%의 아주 적은 비율로 관찰되었다. 또한 Bacillus (phylum Firmicutes) 종은 S. abata에서 9.7%를 나타낸 반면, S. panis에서는 44.3%의 분포를 나타내었다. Planococcus maritimus (8.1%, phylum Firmicutes)와 Psychrobacter nivimaris (28.9%, phylum Gammaproteobacteria)는 S. abata에서만 관찰되어 이들은 S. abata에 특이적인 세균 종임을 알 수 있었다. 같은 장소에 서식하는 계통적으로 근연한 두 종의 해면에서 공생세균의 군집 구조는 차이가 큰 것으로 나타났다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제31권1호
• /
• pp.18-24
• /
• 2003

벼과식물과 관련된 질소고정균을 분리하기 위하여 한반도 남부지방의 19지역에서 쌀, 밀, 귀리, 보리, 호밀, 옥수수 등을 채집하여 이들의 뿌리로부터 free living bacteria와 endophyte를 분류하였다. Colony의 형태, 크기, 색깔 등과 16S rDNA 염기서열을 근거로 63종으로 분류하였다. nifH 유전자 염기서열 결정과 nitrogenase 활성 측정을 통하여 분리균주 모두 질소고정 능력이 있음을 확인하였다. 그리고 식물에서 분리한 내생균의 특징 중 하나인 cellulase활성이 대부분의 분리 균주에서 확인되었다.

• Journal of Microbiology
• /
• 제37권4호
• /
• pp.193-199
• /
• 1999

Fifty-eight strains showing different colony morphological characteristics on various media were isolated from marine coral (Plexauridae sp.) and ambient seawater near Mun-Sum, Cheju-Island in 1998. Bacterial diversity was studies by phylogenetic analysis of the partial 16S rRNA gene sequences. All isolates representing the bacterial domain included affiliates of the high G+C (59%) and los G+C (3%) subdivision of Gram positive bacteria, and the alpha (33%) and gamma (5%) subdivision of the Proteobacteria. The 16S rDNA sequence similarity of the isolates was in the 88.3 to 100% range (average, 95.6%) to reported sequence data. In the comparison of the isolates from marine coarl and ambient seawater, more diverse groups belonging to ${\alpha}$-Proteobacteria were preferentially obtained from seawater.

• 대한의생명과학회지
• /
• 제6권1호
• /
• pp.65-72
• /
• 2000

반추수에서 발생하는 Johne병의 조기 진단 방법을 제시하고 이 질병의 원인체와 미생물학적 특징 이 유사한 M. bovis, M. avium 등의 mycobacteria 감염증을 감별 진단하는 방법 을 개발하기 위하여 Mycobacterium 균속의 표준균주를 사용하여 중합효소 연쇄반응을 확립하였다. Johne병으로 의심되는 소의 혈액과 유즙을 채취하여 분리한 단핵구 및 거식세포로부터 genomic DNA를 추출하였다. 각 시료로부터 추출한 DNA를 template로 이용하여 Mycobacterium spp.에 특이적인 16S rDNA primer set를 이용한 PCR을 수행하여 시료내의 mycobacterial DNA 보유 여부를 확인하였다. 한편 mycobacteria 양성으로 확인된 시료는 M. avium complex 균종에 특이한 16S rDNA 염기서열을 기초로 하여 제작한 primer set와 M. paratuberculosis의 IS900 sequence에 특이한 primer set를 이용하여 duplex PCR을 수행하여 Johne병 원인체의 보균 여부를 조사하였으며, 이 결과를 oligonucleotide probe를 사용한 Southern blot hybridization을 통하여 다시 확인하였다. 이와 같은 duplex PCR기법을 실제 축산 현장에서 수집한 유즙과 말초혈액으로부터 분리한 단핵구 및 거식세포 시료에 적용한 결과 본 연구에서 확립한 duplex PCR기법 유용성을 확인할 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제32권1호
• /
• pp.16-21
• /
• 2004

Chitosanase분비 세균을 찾아내기 위해 남해안의 서로 다른 다섯 치역의 해안 갯벌과 게를 채취하였다. 시료를 키토산선별 배지에 도말하여 얻은 균주 중에 투명환을 형성하는 6종의 균주를 선택하여 분리하였다. 그들은 FE-SEM을 이용한 형태 관찰과 165 rDNA sequence analysis를 통해 Bacillus cereus KNUC51, B. cereus KNUC52, B. cereus KNUC53, B. cereus KNUC54, B. cereus KNUC55, Paenibacillus favisporus KNUC56 등으로 균주명이 정해졌다. Chitosnase 활성을 측정한 결과 기존에 알려진 B. subtilis 168과 유사한 활성을 나타내었다. 효소 활성을 높이기 위해 강력한 돌연변이 유발 물질인 MNNG를 사용하여 돌연변이주를 만든 결과 원균주와 비교해 효소활성이 높은 3개 균주를 선별할 수 있었다. B. cereus 5균주의 chitosnase를 지정하며 생산하는 csn유전자를 분리 정제하여 DNA염기서열을 결정하고 아미노산 서열을 예상하였다. 예상된 아미노산의 잔기는 453 잔기였고 B. cereus ATCC14579의 것과 93% 이상의 상동성을 나타내었다. 분리 균주의 배양 상등액을 키토산 중합체와 반응시킨 후 반응물로 박층크로 마토그래피를 실시한 결과 5분 이하로 반응을 시켰을 때 효능이 좋은 3-10개 사이의 잔기를 가진 키토산 올리고당을 만들 수 있다는 것을 볼 수 있었다.

• 미생물학회지
• /
• 제33권2호
• /
• pp.149-156
• /
• 1997

Pentachlorophenol(PCP)가 첨가된 혐기성 무기배지에 혐기성 소화조슬럿지와 쓰레기 매립장의 침출수를 각각 접종한 후, 활성을 보이기 전과 후의 각 시료 내에 존재하는 총유전물질로부터 16S rRNA 유전자를 PCR 증폭하여 이들에 대한 restriction fragment length polymorphism(RFLP) 비교분석과 계통수분석을 실시하였다. 3차에 걸친 RFLP 분석 결과 Ala와 Bld로 명명된 두 가지의 FRLP 유형이 두 가지의 활성시료 모두에서 높은 빈도로 발견되었다. 이들 유형에 속하는 모든 클론들의 5'쪽에 해당되는 180개씩의 염기서열분석을 실시하여 계통수 분석을 실시한 결과, 각각의 유형에 속하는 클론들간에는 높은 상동성을 가지는 것으로 확인되었다. 특히 Bld 유형에서는 78%에 해당되는 클론들이 동일한 염기서열을 가지는 것으로 확인되었다. 이들 Ala와 Bld 유형에 속하는 클론들은 PCP에 대한 분해활성의 결과로서 증식된 유사종의 미생물 군집에서 비롯된 것으로 추정된다. 이 두 가지 유형에 속하는 클론들 중 하나씩의 16S rDNA 전체으 염기서열을 분석한 결과 Ala의 클론은 Clostridium ultunae (Genbank No. Z69293)의 염기서열과 89%의 상동성을 보였으며, Bld의 클론은 Thermobacteroides proteolyticus (Genbank No. X69335)의 것과 97%의 상동성을 가지는 것으로 나타났다.

• The Plant Pathology Journal
• /
• 제36권5호
• /
• pp.459-467
• /
• 2020

Areca palm yellow leaf (AYL) disease caused by the 16SrI group phytoplasma is a serious threat to the development of the Areca palm industry in China. The 16S rRNA gene sequence was utilized to establish a rapid and efficient detection system efficient for the 16SrI-B subgroup AYL phytoplasma in China by loop-mediated isothermal amplification (LAMP). The results showed that two sets of LAMP detection primers, 16SrDNA-2 and 16SrDNA-3, were efficient for 16SrI-B subgroup AYL phytoplasma in China, with positive results appearing under reaction conditions of 64℃ for 40 min. The lowest detection limit for the two LAMP detection assays was the same at 200 ag/μl, namely approximately 53 copies/μl of the target fragments. Phytoplasma was detected in all AYL disease samples from Baoting, Tunchang, and Wanning counties in Hainan province using the two sets of LAMP primers 16SrDNA-2 and 16SrDNA-3, whereas no phytoplasma was detected in the negative control. The LAMP method established in this study with comparatively high sensitivity and stability, provides reliable results that could be visually detected, making it suitable for application and research in rapid diagnosis of AYL disease, detection of seedlings with the pathogen and breeding of disease-resistant Areca palm varieties.

• 미생물학회지
• /
• 제35권3호
• /
• pp.218-225
• /
• 1999

Aspergillus nidulans 의 DNA 로부터 Saccharomyces cerevisiae에서 스스로 복제가능하고, 형질전환율도 삽입벡터에 비해 10\sup 4\ 배정도 높여주는 절편을 분리한 바 있다. A. nidulans에서 ANRI 의 일부를 포함한 pILJ16-4.5는 삽입벡터인 pILJ16보다 170배 정도 높은 형질전환 효율을 보였으며, S.cerevisiae와 마찬가지로 plasmid 상태로 회수가능했다. A.nidulans 페소내에서 2-3 copy 정도로 염색체와는 별개로 존재하는 것으로 나타났으며, 재형질전환능력도 있었다. ANRI은 미토콘드리아의 DNA에서 유래한 절편으로 밝고, ARS 공통절편과 유사한 절편도 11곳에 존재한다. $\Phi$X174와 SV40 DNA에서 gyrase 가 결합하는 부위의 공통편인 YRTGNYNNY도 6곳에 존재하며, ColE1에서 gyrase가 결합하는 b site와 일치하는 절편도 하나 포함하고 있으며, ABF1 결합 부위이 공통절편과 유사한 절푠$TCN_7ACG$ 도 하나 포함하고 있다. 이를 토대로 ANRI은 A.nidulans의 형질전환 후 회수가 가능한 replicating vector 개발에 이용할 수 있다.