Gangliosides are ubiquitous membrane components in mammalian cells and are suggested to play important roles in various functions such as cell-cell interaction, adhesion, cell differentiation, growth control and signaling. Among all ganglio-series gangliosides, GM3 has the simplest carbohydrate structure, and has been shown as a major gangliosides, in male reproductive system. To study GM3 distribution in the seminiferous tubule and epididymis, frozen sections were stained with specific monoclonal antibody (MAb) against ganglioside GM3. In the seminiferous tubule of testis, pachytene spermatocytes and spermmatids expressed ganglioside GM3, but not in spermatogonia and sertoli cells. Spermatogonia and sertoli cells near the basement membrane were negatively reacted to anti-GM3. In the epididymis, GM3 was expressed only in some interstitial cells. Taken togethers, these results suggest that the expression of ganglioside GM3 in rat seminiferous tubule and epididymis is spatio-temporally regu lated during spermatogenesis.
The combination of testicular sperm extraction (TESE) with ICSI can achieve normal fertilization and pregnancy rate and is effective method in obstructive and non-obstructive azoospermic patients. But, when pregnancy was not occurred, repeated testicular biopsies are not evitable. Therefore, in this study, we observed the survival rate of testicular spemratozoa and spermatozoa extracted from the seminiferous tubules after cryopreserved-thawed used for next IVF cycle with ICSI. In a total of 23 cases, obstructive azoospermia was 17 cases and non-obstructive azoospermia was 6 cases. In obstructive azoospermia, after thawing, motile spermatozua was observed in 13 cases (76.5%). The fertilization rate with 2PN was 67.6% and 5 pregnancies (29.4%) were achieved. In non-obstructive azoospermia, motile spermatozoa was observed in 2 case (33.3%) after thawing. The fertilization rates with 2PN was 53.7% and 3 pregnancies (50.0%) were achieved. A comparison of the results of motile spermatozoa after thawed testicular spermatozoa and spermatozoa extracted from the thawed seminiferous tubule section were 3 cases (60.0%) and 12 cases (66.6%), respectively. The fertilization and pregnancy rates of thawed testicular spermatozoa and spermatozoa extracted from the thawed seminiferous tubule section were 69.4% and 20.0%, 62.5% and 38.8%, respectively. Conclusively, thawed testicular spermatozoa and spermatozoa extracted from the thawed seminiferous tubule section can achieve normal fertilization and pregnancy and cryopreservation of testicular spermatozoa and seminiferous tubule may avoid repetition of testicular biopsies in azoospermic patients in whom the only source of spermatozoa is the testis.
The cyclic changes of the epithelium of seminiferous tubule in the Korean greater horseshoe bat (Rhinolophus ferrumequinum korai) were investigated by means of the light and electron microscopic observations and the following results were obtained. 1) The spermatogenic function of the horseshoe bats captured in September was moderate but considerable amount of the ultrastructural findings were obtained in both the spermatocytogenic and the spermiogenic phases. 2) The spermatogenic function of the horseshoe bats captured in December was depressed representing a resting status. 3) The light and electron microscopic findings suggest that the epithelium of seminiferous tubule varies cyclically, which is closely related to their peculiar way of reproductive habit during hibernation.
Cyclic AMP-response element binding protein zhangfei (CREBZF), a member of ATF/CREB (activating transcription factor/ cAMP response element binding protein) family, regulates numerous cellular functions and development of cells by interacting transcription factors. This study discovered the expression pattern of CREBZF in seminiferous tubule of testes during the postnatal development of mice. In testis, CREBZF mRNA expression was the highest among other organs. Immunofluorescence analyses showed that the CREBZF was specifically expressed on spermatocyte but not in spermatogonia and Sertoli cells in seminiferous epithelium of mouse testis. Semi-quantitative polymerase chain reaction (PCR) analysis showed that CREBZF transcript level was significantly elevated during postnatal development of mouse testis. Confocal imaging analysis indicated that the protein expression of CREBZF in seminiferous tubule remained low until postnatal day (PD) 14, and was dramatically increased in PD 21. Interestingly, only one type of the spermatocyte expressed CREBZF specifically among SCP3-positive spermatocytes. Taken together, these results suggest that CREBZF may be novel putative marker of the spermatocyte and regulate meiosis during postnatal development of mice.
Objectives: We have previous reported that thawed testicular sperm and sperm extracted from seminiferous tubule could achieved optimal fertilization and pregnancy in azoospermic patients. However, thawed testicular sperm did not show motility in many cases. Therefore we studied viability of immotile sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubule using hypo-osmotic swelling (HOS) test and eosin-Y test. Materials and Methods: After sperm extraction using for ICSI, the remained sections of seminiferous tubules were frozen with a computerized freezer. For thawing and preparation of testicular sperm, the seminiferous tubules were thawed by removing from $LN_2$ and letting them at room temperature for 10 min followed by %37^{\circ}C$ water bath for 10 min. The prepared samples were washed for free of preservation medium and sperm preparation method described previous. Sperm was suspended in 0.1 ml hypoosmotic solution. After 30 minutes, the type of distally coiled sperm were assessed. Results: In 44 cases of cryopreservation of seminiferous tubules in obstructive azoospennic patients, the fertilization rates with 2PN were 71.4% and pregnancy rates were 34.1%. The presence of motile spermatozoa on subsequent post-thaw testicular sperm remarked 15.1% and were increased to 77.3% just before ICSI. After sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubule, 3 hrs later in in vitro culture, the cases of presence of motile sperm, reaction of hypo-osmotic swelling test and viable sperm were 63.6% (28/44), 93.2% (41/44), and 77.3% (34/44), respectively. Conclusions: Just after post-thawed testicular sperm did not showed motility. Although motility was gained after in vitro culture, many cases showed non-motile sperm until optimal insemination time. However, HOS test showed positive reaction in non-motile sperm. Therefore, HOS test is an alternative method for the selection of viable sperm for ICSI.
The testis is an extremely heterogeneous organ, containing numerous compartments types. Morphometric studies were performed of 3 avian species (pigeon, pheasant and chicken) to determine volume density absolute volume, numerical density, total number of serminiferous tubule components, and sperm production, especially those related to the Sertoli cell, and to make comparisons among the species. Volume density of seminiferous tubule components per testis was determined by point counting method. Testis volume and sperm production were measured by routine techniques. Numerical density (the number of cells per unit volume of testis) of seminiferous tubule components per testis was determined by morphometry (Floderus method). The volume density of seminiferous tubules per testis was 91.58, 92.18 and 94.21% in pigeon, pheasant, and chicken, respectively. The volume density of spermatogonium, spermatocyte, spermatid, spermatozoon, and Sertoli cell did not produce significant changes in the three species. The absolute volume of spermatogonium, spermatocyte, spermatid, and Sertoli cell showed significant changes in the three species (p<0.05). The average volume of Sertoli cell ranged from 758.34(pheasant) to 1,212.9 ㎛$^3$(chicken) and was not significantoy different in the three species(p>0.05). The number of Sertoli cells per testis showed significant differences in the three species : 34.52 $\times$10(sup)6, 186.82$\times$10(sup)6, 810.62$\times$10(sup)6 in pigeon, pheasant, and chicken, respectively(p<0.05). The sperm production was significantly different in the three species : 3,018$\times$10(sup)6, 993.9$\times$10(sup)6, and 8.9$\times$10(sup)6 in chicken, pheasant, and pigeon, respectively(p<0.05). These results suggest that number of Sertoli cells may be more important than Sertoli cell size in explaining the difference in sperm production among the three species.
This paper aims to probe that the effect of high dose of cyclophosphamide to the Sertoli cells of the mouse was examined by transmission electron microscope. In the normal group, Sertoli cells contact each other around the basal aspect of the seminiferous tubule, forming numerous row of tight junction, blood-testis barrier. Sertoli cells contain smooth endoplasmic reticulum, well developed Golgi comples, a number of round mitochondria and microfilament. The cytoplasmic necrosis are observed from the 1-time treated group. In the 2-times treated group, smooth endoplasmic reticulum are more developed than normal group, but cisternae are partially dilated. In the 3-times treated group, the smooth endoplasmic reticulum are not developed. In the 2-times treated group, the inner membrane of the mitochondria are partially disrupted, and cristae are all disrupted in the 3-times treated group. The microfilaments are not observed in the all treated groups. According to the results above, it seems that smooth endoplasmic reticulum, mitochondria, and microfilament are disrupted by toxic effects of the cyclosphamide to the Sertoli cells of the mouse.
본 연구는 성성숙한 번식기의 한국산 숫컷 꿩을 대상으로 번식연구의 기초자료를 얻기 위해 곡세정관의 정자형성세포를 분류하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 정조세포는 A형, In형 및 B형의 3 가지 정조세포로 분류되었다. 2. 제 Ⅰ정모세포는 전세사기, 세사기, 접합기, 태사기 및 이동기의 5가지 형 제 1 정모세포로 분류되었다. 3. 정자세포는 핵의 변화에 따라서 둥근 정자세포에서 장축성장한 정자세포로 성장하는 과정을 7 단계로 분류되었다.
한국산개구리 (Rana coreana)의 정소주기를 파악하기 위해 수컷 성체를 대상으로 gonadosomatic index (GSI)와 정소 내 생식세포의 변화를 연중 조사하였다. 정소의 세정관내 정자형성은 8월부터 시작되어져 9월의 정소에서 가장 활발하게 진행되었으며 이 시기에 GSI의 값이 가장 컸고 세정관의 단면적도 가장 넓게 나타났다. 2월의 정소에서는 정자배출 후 단계의 세정관들이 출현하였으며 이후 3월~7월까지 일정기간동안 정자형성이 정지되었고 GSI와 세정관의 단면적도 최저치를 나타내었다. 본 결과들로 보아 한국산개구리 수컷의 GSI는 7월에서 8월 사이에 유의하게 변화했고 정자형성과정이 불연속적으로 진행되는 정소주기를 나타내며 번식기는 2월로 확인되었다.
Objectives: This study was designed to investigate the effect of Bombycis corpus on reproductive dysfunction caused by aging. Methods: The experimental group was divided into three groups: a control group consisting of 8-week-old male ICR mice without any treatment, An aging-elicited group (AE group) consisting of 50-week-old ICR male mice without any treatment, and a Bombycis corpus treatment group (BC group) consisting of 50-week-old ICR male mice with treatment Bombycis corpus extract (0.78 g/kg/day) for 6 months. After 6 months, histochemistry and immunohistochemistry of the testis were performed to investigate the effects of Bombycis corpus on the reproductive dysfunction caused by aging. Results: In the first step, Bombycis corpus increased spermatogenesis and distribution of sertoli cells in the seminiferous tubule, increased BrdU positive reaction in the spermatogonium at the basal part of the seminiferous tubule, and decreased the apoptosis of Sertoli cells in the seminiferous tubule. In addition, Bombycis corpus increased AR positive in Sertoli cells and $17{\beta}-HSD$ positive in leydig cells. Finally, Bombycis corpus decreased 8-OHdG positivite reaction in the spermatids of the seminiferous lumen, caspase-3 positivity in leydig cells, and HDAC1 positivite reaction in sertoli cells. Conclusions: These results suggest that Bombycis corpus increases spermatogenesis, decreases apoptosis of leydig cells and Sertoli cells, increases the production and action of testosterone in the testis, and inhibits DNA damages and DNA transcripts decrease in the testis, Thereby improving reproductive dysfunction caused by aging.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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