The author observed the effects of retrograde infusion of water soluble contrast media (Tele- brix 30) on the rabbit submandibular glands and compared the effects of different degrees of filling. 26 rabbits were divided into 2 groups of 12 each as experimentals and I group of 2 as normal controls. One experimental group was filled with 0.2㎖ and the other with 0.4㎖. Right submandibular gland of each rabbit was infused with contrast media and left one with physiologic saline as a experimental control, at a constant rate of 0.12㎖/min. using an infusion pump via the main excretory duct. Immediately after the infusion of contrast media, oblique lateral radiographs of the glands were made with occlusal film in order to confirm the glandular filling. The rabbits were sacrificed after varying periods (1, 8, 24 hours and 3, 6, 10 days) and the tissues were prepared for light and electron microscopic examination. The results were as follows: 1. In glands filled with 0.2㎖ contrast media, the initial changes were a few vacuole formation in the acini and slight dilation of the intralobular duct. The moderately severe changes such as vacuole formation in the acini, the abnormal substructure within the secretory granule, dilation of acinar and intercalated duct lumen, scalloping of striated duct lumen and inflammatory cell infiltrate were observed at 3 days. The general appearance was successively recovered, so the tissue had a normal appearance at 10 days. 2. In glands filled with 0.4㎖ contrast media, the most prominent alterations such as severe acinar atrophy, decreased number of secretory granules, proliferation of connective tissue stroma and pronounced inflammatory cell infiltrates appeared at 6 days. Although the general appearance returned to be almost normal at 10 days, acinar cells showed some atrophy and decreased secretory granules. 3. In glands subjected to 0.4㎖ infusion, the alterations were more severe and the recovery was slower than those seen in the glands to 0.2㎖ infusion.
The mammary gland contains a subpopulation of epithelial cells with large proliferative potentials which are the likely targets for carcinogens. These clonogenic cells can proliferate and differentiate into functional glandular structures. Multicellular secretory alveolar units (AU) develop from these clonogens in grafts of monodispersed rat mammary epithelial cells (RMEC) in gland-free mammary fat pads in intact recipient F344 rats co-grafted with mammotropic hormone-secreting pituitary tumors (MtT F4). Multicellular nonsecretory ductal units (DU) develop in grafts of monodispersed RMEC in gland-free fat pads in adrenalectomized recipient WF rats co-grafted with MtT W10. However, this effect were reversed by hydrocortisone replacement therapy. RMEC were isolated from appropriate donor rats as monodispersed mixed cells or, alternatively, RNA+ cells were sorted by flow cytometry of mixed RMEC stained with FITC-RNA and PE-anti-Thy-1.1 monoclonal antibody. We grafted mixed or sorted PNA+ cells in gland-free mammary fat pads in recipient rats that were endocrinologically manipulated to induce AU or DU. Cells were also isolated from these AU or DU as mixed or sorted RNA+ cells and sub-transplanted in recipient rats treated appropriately to induce AU or DU, respectively. Cells obtained from AU in grafts gave rise to clonal AU and from DU in grafts to DU on sub-transplantation in appropriate recipients. When adrenalectomized recipient WF rats co-grafted with MtT W10 received daily subcutaneous injections of hydrocortisone for periods of 21 days following the PHA+ cell transplantation, AU, instead of DU, were developed. The histologies of these secondary AU and DU were not different from those of the primary AU and DU. Casein and laminin proteins were demonstrated by immunocytochemical staining of primary and secondary AU. Electron micrographs also demonstrated that AU were composed of secretory cells with milk protein in the cytoplasm. DU were composed of little or non-secretory ductal epithelial cells. These AU and DU also secreted large amounts of lipids. Clonogenic cells were more common in DU than in AU. Thus, AU and DU contain persistent subpopulations of clonogenic stem-like cells.
Lysozyme has been reported to be present in the secretory granules of the Paneth cell, and lysozyme immunoreactivity has been detected by immunogold method in Paneth cells of the intestine of human, mouse and rat. The present study was aimed at clarifying the intracellular distribution and changes of the lysozyme immunoreactivity in rabbit Paneth cell after common bile duct ligation of rabbit, using the electron microscope immunogold technique. Healthy adult rabbits weighing about 2kg body weight were divided into normal and bile duct ligated groups. Common bile duct ligation was performed aseptically under ether anesthesia. Experimental animals were sacrificed on the 1st, the 3rd, the 5th, the 7th and the 14th day after the operation. Mucosal specimens from the intestinal gland of ileum were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde, followed by 1% osmium tetroxide, embedded in araldite mixture, cut with LKB-V ultratome. Ultrathin sections were placed on parlodion coated nickel grids (200mesh). The section-bearing grids were floated upside down on the added substance in a moist chamber at room temperature except for the primary antibody step, which was at $4^{\circ}C$. Sections were etched with a saturated solution of sodium m-periodate for 60min. After etching, sections were pretreated with 0.02M tris buffered saline (TBS), pH 8.4, with 1% bovine serum albumin (BSA, Sigma) for 60min, then treated polyclonal rabbit anti-human lysozyme (Dakipatts) diluted 1 : 50 in TBS with 0.1% BSA for 20hr. Subsequently, grids were incubated 60min in biotinylated goat anti rabbit IgG (Amersham) diluted 1 : 100 in TBS with 0.1% BSA. After this, sections were incubated 60min on streptavidin gold G10 (Amersham) diluted 1 : 50 in TBS with 0.1% BSA. After each step, the grids were briefly rinsed with TBS with 0.1% BSA. After the strepavidin gold step, the sections were jet washed with distilled water. Counterstain of the sections performed by uranyl acetate and lead citrate, and observed with JEM 100 CX II electron microscope. Observed results were as follow; 1. Secretory granules of mouse Paneth cells have a lysozyme immunoreactivity and also eosinophil leucocyte of rabbit applied for the positive-control stain, are well labeld with gold particles. 2. Normal rabbit Paneth cells have a lysozyme immunoreactivity restricted on the secretory granules. 3. Amount lysosomes containing myelin figures in the Paneth cells were significantly increased from 5th day after the common bile duct ligation. 4. Immunoreactivity of Paneth cell secretory granules were more activated on the 3rd day after the common bile duct ligation as compared with those of the normal animal. But the lysozyme immunoreactivity were decreased from the 5th day after the common bile duct ligation. 5. Considering the above finding, lysozyme contained Paneth cell are affected following of common bile duct ligation, whereas lysosomes containing myelin-figure do not exhibit any immunoreactive relationship with those of secretory granules.
Objectives : In order to study the effect of oral administration of Jungcheonhwadamgangki-tang against the asthma. Method : Asthma was induced to Balb/c mouse with ovalbumin by using method of Hatfield et al. It was observed the changes numbers and morphology of the mast cells in the trachea, numbers of mucous secretory cell in the bronchus, morphology of the bronchus, ultramicroscopical appearance of surface of trachea and number of cilia and mucous secretory cells by scanning electron microscope. Result : 1. Degranulation and decreasing of the numbers of mast cells were significantly decreased in the Jungcheonhwadamgangki-tang extract group as compared with control group. 2. Hypertrophy of mucous membrane of bronchus In the lung, infiltration of inflammatory cells, increasing of mucous secretory cells in the bronchus were significantly decreased in the Jungcheonhwadamgangki-tang extract group as compared with control group. 3. Shedding, decreasing of cilia cells and increasing of mucous secretory cells in the surface of the trachea were significantly decreased in the Jungcheonhwadamgangki-tang extract group as compared with control group. Conclusion : It is considered that Jungcheonhwadamgangki-tang has somewhat favorable effects on the asthma because the asthma specific series of abnormalities in respiratory system were decreased after oral administration of Jungcheonhwadamgangki-tang in this study. In future, it is needed that the toxicological and dosage specific study of Jungcheonwhadamgangki-tang to use against bronchial asthma with safe.
Harderian glands are the unique organs in several mammals, which human and non-human primates do not have. We report the ultrastructural changes in the postnatal developmental periods of Harderian glands in Mongolian gerbil(Meriones unguiculatus). Male and female Mongolian gerbils were sacrificed on days 3, 10, 30 and 60 after birth and their Harderian glands were observed by transmission electron microscope. The obtained results were summarized as follows; 1. In 3-day-old Mongolian gerbils, Harderian gland was composed of one excretory duct and immature tubules which have two type cells, dark and light cells, identified electron-dense and electron-lucent respectively. 2. In 10-day-old Mongolian gerbils, small lipid vacuoles began to be found in the cytoplasm of the secretory cells of the Harderian gland. Mitochondria, Golgi apparatus, polysomes and slash were more abundant in the cytoplasm of dark cells than those of light cells. The arrangement of tubules in the gland was much more condensed than that of 3-day-old Mongolian gerbils. 3. In 30-day-old Mongolian gerbils, the secretory cells of the tubule were typically columnar in shape and there was one type cell in the tubule. Most of the columnar secretory cells contained various size vacuoles. 4. In 60-day-old Mongolian gerbils, the Harderian gland possessed the typical structural characteristics of adults. The mature glandular structures were more significant than those of 30-day-old animals.
특정 성분 방출에 중요한 기능을 수행하는 것으로 추정되는 좀목형(Vitex negundo) 엽육 표피조직의 분비모 유형에 대한 구조적 발달양상을 전자현미경적으로 연구하였다. 엽육 표피에 발달하는 두 유형의 분비모는 peltate형(peltate glandular type, PT)과 capitate형(capitate glandular type, CT)으로 크기 및 밀도, 분비강 형성 등의 구조적 특성이 생장단계에 따라 상이하게 나타났다. 어린잎 상피에는 이미 분화된 PT형 분비모가 밀생하여 생장 초기에서부터 뚜렷한 형태구조적 차이를 나타내었다. 이 시기의 하피는 비분비성 단순모에 피복되어 전혀 외부로 노출되지 않는다. 엽신의 발달로 표피조직이 신장되면 PT 및 CT 분비모들은 성숙한 상피 및 하피조직에서 비교적 낮은 밀도로 발달하는 특성을 보이며 분화하였다. PT형 분비모는 6~8개의 분비세포(ca. 35~40 ${\mu}m$)와 하나의 병세포(ca. 5 ${\mu}m$)로 구성되어 있으나, CT형 분비모는 4개의 분비세포(ca. 10~15 ${\mu}m$)와 1~2개의 병세포(ca. 10 ${\mu}m$)로 이루어져 있다. 분비세포 내에는 분비강이 형성되나 크기, 구조 및 형성과정은 유형에 따라 매우 다르게 진행되었다. 분화초기 PT형 분비세포 외부 세포벽으로부터 분리된 층이 빠르게 팽창하면서 분비강이 형성되고, 분비강 내에는 수많은 분비소낭들이 분비물질을 축적하며 저장되었다. 이들 구획은 팽창된 분비강을 가득 채우며 생성되는 물질을 축적한 후 누출형 분비를 통해 방향성분 및 물질을 외부로 방출하였다. 반면, CT형 분비세포 내에는 분비소낭 생성 없이 비교적 작은 분비강만 형성되었다. 이와 같이 좀목형의 특정성분 방출 기작에서는 PT형 분비모가 CT형 분비모에 비해 더 중요한 기능을 수행하는 것으로 추정되었다.
The present study is of ultra-fine structures of Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes, Microsporum canis and Epidermophyton floccosum by means of electron microscopy and reveals the following. 1. In contrast to the bacteria, the normal fungus contains nuclear membrane, mitochondria, endoplasmic reticulun, distinct cell wall and cell membrane and secretory granules as observed in the higher plants and animals. 2. Thickening of the cell wall, inapparent cell wall, inapparent cell membrane with the appearance of electron thin area(ETA) and increase of inclusions were observed in the L-1 treated groups. 3. Thickening of cell wall and increase of ETA were more apparent in the Epidermophyton floccosum than the other groups. 4. Increase of electron thin area was thought to be associated with autolysis.
Tumor therapy using cytokines has been developed for last two decades. Several recombinant cytokines and tumor cell vaccines produced by cytokine gene transfer have been in clinical trials, but several side effects hamper routine clinical applications. Many cytokines are originally expressed as membrane-bound form and then processed to secretory form exerting paracrine effects. Though functional differences of these two types of cytokines are elusive yet, the membrane-bound form of cytokine may exert its effects on restricted target cells as a juxtacrine, which are in physical contacts. With the efforts to improve antitumor activities of cytokines in cancer patients, developing new strategies to alleviate life-threatening side effects became an inevitable goal of tumor immunologists. Among these, tumor cell vaccines expressing cytokines as membrane-bound form on tumor cell surface have been developed by genetic engineering techniques with the hope of selective stimulation of the target cells that are in cell-to-cell contacts. In this review, recent progress of tumor cell vaccines expressing membrane-bound form of cytokines will be discussed.
Arabinoxylan, a complex polysaccharide in cereal cell walls, has recently received research attention as a biological response modifier. The immunomodulating effect of arabinoxylans from rice bran (AXrb) was studied using a combined process of extrusion and commercial hemicellulase treatment in order to elucidate the augmentation mechanism of cell-mediated immunity in vitro. The cytotoxicity of mouse spleen lymphocytes against YAC-1 tumor cells was significantly enhanced by treatment with AXrb at $10-100\;{\mu}g/mL$. In an attempt to investigate the mechanism by which AXrb enhance NK cytotoxicity, we examined the effect of AXrb on cytokine production by spleen lymphocytes. Culture supernatants of the cells incubated with AXrb were collected and analyzed for IL-2 and IFN-${\gamma}$ synthesis by ELISA. IL-2 and IFN-${\gamma}$ production were increased significantly. These results suggest that AXrb may induce Th1 immune responses. Macrophages play an important role in host defenses against tumors by killing them and producing secretory products, which protect against bacterial, viral infection and malignant cell growth. AXrb were examined for their ability to induce secretory and cellular responses in murine peritoneal macrophages. When macrophages were treated with various concentrations ($10-100\;{\mu}g/mL$) of AXrb, AXrb induced tumoricidal activity, as well as increasing phagocytosis and the production of NO, $H_2O_2$, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6. These results indicate that reactive oxygen species, reactive nitrogen species, and inflammatory cytokines are likely to be the major mediators of tumoricidal activity in AXrb-treated macrophages. Therefore, AXrb may be useful in cancer immunotherapy and it is anticipated that AXrb obtained using extrusion and subsequent enzyme treatment can be used as an ingredient in nutraceuticals and cereal-based functional food.
This experiment was performed to study the ultrastructural changes of the juxtaglomerular cell of mice following subcutaneous injection of heavy metallic agents. Male mice were divided into normal and experimental groups. The mice were subcutaneouly injected with $HgCl_2$ (2mg, 5mg or 10 mg/Kg/BW) or with $K_{2}Cr_{2}O_7$(5 mg, 10 mg or 20 mg/Kg/BW). Mice were sacrificed on 6 hours, 3 days and 14 days after the injection. Kidneys were fixed in the 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution, followed by refixation in the 1% osmium tetroxide solution. Dehydrated blocks were embedded in araldite mixture. The sections were cut on a LKB-V ultratome, and ultrathin sections stained with uranyl acetate and lead citrate were observed with JEM 100CX II electron microscope. The results were as follow: 1. Juxtaglomerular cell of the experimental groups showed some alterations, especially in the structures of protein synthesis including dilations and degradations of granular endoplasmic reticula, atrophy of Golgi complex, and numerous free ribosomes in the cytoplasm. 2. Juxtaglomerular cells treated groups showed a number of vacuoles, protogranules and some myelin figures in the cytoplasm, especially in the earlier groups. 3. Juxtaglomerular cells of treated groups, contained a large number of secretory granules showing variable electron densities and pleomorphism in later groups (2 weeks). From the above results, it was concluded that, the mercuric chloride or potassium bichromate induces acute renin release from juxtaglomerular cells of the mice, but many juxtaglomerular cells may secrete prematured secretory granules, or the synthetic system of the cell can not perform normal function.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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