An efficient method for Agrobacterium-mediated transformation of forage crop alfalfa (Medicago sativa L.) was established using secondary somatic embryogenic calli. Agrobacterium tumefaciens strain EHAlOl and a binary vector pIG121-Hm which has selection markers for kanamycin and hygromycin have been shown to be an efticient materials for alfalfa transformation. The secondary somatic embryogenic calli originated from hypocotyl explants of alfalfa were efficient infection materials for Agrobacterium EHAlOl and normally germinated into plantlets. The introduced gene (GUS) was constitutively expressed in all tissues of transgenic alfalfa with different expression levels. These results indicate that the use of pIG121-Hm vector, Agrobacterium EHAlOl and improved culture system of callus facilitate the transformation of alfalfa. (Key words : Agrobacterium, Alfalfa, Gene transfer, Transformation)
Xiaolong Yuan;Yunqing Li;Ting Luo;Wei Bi;Jiaojun Yu;Yi Wang
Mycobiology
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제51권1호
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pp.36-48
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2023
Xanthoria elegans is a lichen symbiosis, that inhabits extreme environments and can absorb UV-B. We reported the de novo sequencing and assembly of X. elegans genome. The whole genome was approximately 44.63 Mb, with a GC content of 40.69%. Genome assembly generated 207 scaffolds with an N50 length of 563,100 bp, N90 length of 122,672 bp. The genome comprised 9,581 genes, some encoded enzymes involved in the secondary metabolism such as terpene, polyketides. To further understand the UV-B absorbing and adaptability to extreme environments mechanisms of X. elegans, we searched the secondary metabolites genes and gene-cluster from the genome using genome-mining and bioinformatics analysis. The results revealed that 7 NR-PKSs, 12 HR-PKSs and 2 hybrid PKS-PKSs from X. elegans were isolated, they belong to Type I PKS (T1PKS) according to the domain architecture; phylogenetic analysis and BGCs comparison linked the putative products to two NR-PKSs and three HR-PKSs, the putative products of two NR-PKSs were emodin xanthrone (most likely parietin) and mycophelonic acid, the putative products of three HR-PKSs were soppilines, (+)-asperlin and macrolactone brefeldin A, respectively. 5 PKSs from X. elegans build a correlation between the SMs carbon skeleton and PKS genes based on the domain architecture, phylogenetic and BGC comparison. Although the function of 16 PKSs remains unclear, the findings emphasize that the genes from X. elegans represent an unexploited source of novel polyketide and utilization of lichen gene resources.
알팔파의 하배축(hypocotyl)으로부터 캘러스 유도 및 식물체 재분화를 위하여 2.4-D 와 kinetin이 조합 처리된 MS 배지에 조직을 치상하였을 때 4주 후 캘러스가 유도되었으며, 2.4-D $4mg/{\ell}$와 kinetin $0.1mg/{\ell}$ 그리고 2.4-D $4mg/{\ell}$와 kinetin $0.5mg/{\ell}$ 조합에서 체세포배가 형성되었다. 성숙한 체세포배를 MS 기본배지로 계대배양하였을 때 정상적인 식물체로 재분화 하였다. 이차 체세포배 발생을 위하여 재분화된 기내식물의 자엽으로부 터 이차 캘러스를 유도하였다. 2.4-D의 농도에 따라 배발생 캘러스의 형성률에 차이를 보였으며, 2.4-D $4mg/{\ell}$의 MS 배지에서 배양하였을 때 배발생 캘러스의 유도가 가장 좋았다. 배발생 캘러스로부터 이차 체세포배의 발생률을 2.4-D $0.1mg/{\ell}$ 첨가한 MS 배지에서 가장 좋았으며, 캘러스당 배 발생률이 일차 캘러스 보다 평균 18배 증가하여, 이차 체세포배 배양에 의한 재분화 식물체의 대량증식이 가능하였다. 성숙한 이차 체세포배는 MS 기본배지에 계대배양 하였을 때 뿌리가 유도되었으며 정상적인 식물체로 발달하였다.
알파파의 재분화된 식물체로부터 다량의 이차체세포배를 유도하였으며, 이들 체세포배로부터 재분화되는 식물체의 획득빈도를 향상시키기 위하여, 캘러스에서 유래된 배의 형태 및 형태별 유식물 분화 양상에 관한 실험을 수행하였다. 2,4-D 농도에 따라 체세포배의 형성에 차이를 나타내었는데, 생장조절제가 첨가되지 않았거나, 2,4-D가 $0.1mg/{\ell}$ 첨가된 배지에서 형성된 배는 약 57% 이상이 2개의 자엽을 갖은 정상배였으며, 2,4-D 농도가 증가할수록 정상체세포배의 출현빈도는 감소하였고, 2,4-D $4mg/{\ell}$에서는 10%만이 정상배로 나타났다. 배의 형태에 따른 발아율 및 유식물 분화양상을 조사한 결과, 2개의 자엽을 갖는 정상배의 경우는 발아율이 85%로 가장 높았으며, 정상식물체로 발육되는 비율도 80%로 나타났다. 그러나 자엽이 1개 또는 3~4개인 배는 정상적으로 발육되는 식물체의 비율이 10% 이하로 매우 낮았으며, 자엽이 5개인 배와 나팔모양의 배는 정상적인 식물체로 발달하지 못하였다.
Kim, Dong-Hyun;Lee, Joon-Woo;Min, Chang-Woo;Rahman, Md. Atikur;Kim, Yong-Goo;Lee, Byung-Hyun
한국초지조사료학회지
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제42권3호
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pp.137-145
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2022
Aluminum (Al) is one of the major factors adversely affects crop growth and productivity in acidic soils. In this study, the effect of Al on plants in soil was investigated by comparing the protein expression profiles of alfalfa roots exposed to Al stress treatment. Two-week-old alfalfa seedlings were exposed to Al stress treatment at pH 4.0. Total protein was extracted from alfalfa root tissue and analyzed by two-dimensional gel electrophoresis combined with MALDI-TOF/TOF mass spectrometry. A total of 45 proteins differentially expressed in Al stress-treated alfalfa root tissues were identified, of which 28 were up-regulated and 17 were down-regulated. Of the differentially expressed proteins, 7 representative proteins were further confirmed for transcript accumulation by RT-PCR analysis. The identified proteins were involved in several functional categories including disease/defense (24%), energy (22%), protein destination (9%), metabolism (7%), transcription (5%), secondary metabolism (4%), and ambiguous classification (29%). The identification of key candidate genes induced by Al in alfalfa roots will be useful to elucidate the molecular mechanisms of Al stress tolerance in alfalfa plants.
Evaluating the temporal and spatial changes in the ecosystem service value (ESV) of the Sanjiangyuan Nature Reserve is important for understanding the impact of human activities on natural ecosystem and guiding ecosystem restoration and environmental pollution control. In this study, remotely sensed land-cover data and the equivalent factor method were used to analyze the spatiotemporal evolution characteristics of the ESV in Sanjiangyuan Nature Reserve from 1992 to 2015, and regression analysis was employed to determine the factors driving changes in the ESV. The results show that grassland was the main type of ecosystem in the study area, and the transformation of grassland into bare areas was the primary change in land cover. Additionally, the ESV in the study area first decreased and then increased, with an annual growth rate of 0.69%. The ESV mainly increased in the north of the Yellow River's source area, and mainly decreased in the northwest of the Yangtze River's source area. Finally, the gross output value of agriculture, urbanization rate and proportion of secondary industry were found to be the main factors driving the ESV in the study area.
This study was conducted to comprehend the spatial distribution characteristics, habitats and appearances of Hydropotes inermis by using the biotope mapping in Daebudo Island, Ansan-si. The result is base data to understand status and manage potential inhabitation of Hydropotes inermis in Daebudo Island through the Maximum Entropy model. The study used 105 traces from the primary investigation and 452 traces in the secondary investigation. The biotope types were distinquished Hydropotes inermis habitats largest from the order of natural forest (15.1%), natural coast (13.7%), marshy cultivated land (12.6%), and dry cultivated land (11.7%), and from the inhabitation trace results. Hydropotes inermis appearanced biotope types were the greatest in the order of cultivated land (49.73%) > forest (18.85%) > coast (7.00%) > grassland (6.28%). Since forests in Daebudo Island have low slope and altitude, it was concluded that Hydropotes inermis would live in most of the forests. A high number of Hydropotes inermis was found to appear in areas where the grassland is formed including cultivated lands (include unused paddies and fields) and marshy grasslands, which would result in direct damage of crops. According to the Maxent modeling analysis that used location information of Hydropotes inermis, the AUC value was 0.635 based on the ROC curve. In Daebudo Island, areas with over 0.635 potential inhabitation value are distributed all over the place, and it was concluded that each population would have a different scope of influence and home range. Hydropotes inermis living in Daebudo Island have high habitat suitability mainly around the cultivated lands near the roads, but due to the bare lands and roads, it is expected that their habitats would be fragmented and damaged, which would have a direct and indirect effect in maintaining the Hydropotes inermis population. Also, considering habitat disturbance, diverse methods for reducing damage including capturing some individuals within the limit that does not disperse Hydropotes inermis population in Daebudo Island must be carried out.
Jiao, Ting;Lei, Zhaomin;Wu, Jianping;Li, Fei;Casper, David P.;Wang, Jianfu;Jiao, Jianxin
Animal Bioscience
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제34권11호
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pp.1776-1783
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2021
Objective: This project aimed to evaluate the effects of both different additives and filling methods on nutritive quality, fermentation profile, and in situ digestibility of whole plant corn silage. Methods: Whole plant corn forage harvested at 26.72% dry matter (DM) was chopped and treated with two filling methods, i) fill silos at one time (F1), ii) fill silos at three times (F3), packing samples into one/three silo capacity at the first day, another one/three capacity at the second day, then one/three at the third day, three replicates. For each replicate, samples were treated with three additives, i) control (CTRL, no additive), ii) Sila-Max (MAX, Ralco Nutrition Inc., Marshall, MN, USA), and iii) Sila-Mix (MIX, Ralco Nutrition Inc., USA). With three replicates of each secondary treatment, there were nine silos, 54 silos in total. Each silo had a packing density of 137.61 kg of DM/m3. All silos were weighed and stored in lab at ambient temperature. Results: After 60 d of ensiling, all items showed good silage fermentation under MAX filled one time or three times (p<0.01). Higher silage quality for all additives was obtained at filling one time than that filled three times (p<0.01). The highest DM and lowest DM loss rate (DMLR) occurred to MAX treatment at two filling methods (p<0.01); Digestibility of acid detergent fiber, neutral detergent fiber (NDF), and curde protein had the same results as silage quality (p<0.01). Yield of digestible DM and digestible NDF also showed higher value under MAX especially for filling one time (p<0.05). Conclusion: All corn silages showed good fermentation attributes (pH<4.0). The forage filled one time had higher silage quality than that filled three times (p<0.01). MAX with homofermentative lactic acid bacteria enhanced the lactic acid fermentation, silage quality and nutrient digestibility, and so improved the digestible nutrient yield.
전통 장례 문화의 봉분 무덤은 적절한 관리에서 지속되는 잔디(Zoysia japonica) 뗏장을 바탕으로 하는 독특한 서식처이다. 본 연구는 지리적으로 최남단 분포의 애기자운이 출현하는 잔디 우점 이차초원식생에 대한 군락분류학적 기재이다. 현지 식생조사와 식생조사표 모둠화를 통한 단위식생의 추출은 Z.-M.학파의 식물사회 분류법을 따랐다. 유형화된 단위식생은 생태식물상 형질 분석과 선행 기재 단위식생과의 종조성적 비교가 성취되었다. 잔디-애기자운군집(신칭)이 처음으로 기재되었고, 김의털아군집, 전형아군집, 토끼풀아군집의 하위단위를 포함한다. 이들 아군집은 접근성과 관리양식에 대응한 종조성의 차이에서 구분되었다. 본 군집은 <지역생물기후구-대구형> 속에서 강한 대륙성 환경조건을 갖춘 미세 서식처에서만 분포하는 지역(regional) 식생형이면서 국지(local) 식생형으로 규정되었다. 잔디-애기자운군집은 대륙형 이차초원식생 가운데 한국인의 봉분 문화에 잇닿은 '뗏장초원식생'이고, 해양형의 잔디군단(억새군강, 양지사초군목)과 전혀 다른 식생형인 것으로 밝혀졌다. 잔디 우점의 이차초원식생일지라도 초지의 식물종다양성과 잔디-애기자운군집의 현지내 보존을 위하여 봉분을 포함한 뗏장에 대한 서식처로서의 이해와 적절한 생태적 관리가 요구되었다.
Objective: We aimed to observe hair follicle (HF) development in the dorsal skin and elucidate the expression patterns of genes and proteins related to skin and HF development in Rex rabbits from birth to 8 weeks of age. Methods: Whole-skin samples were obtained from the backs of Rex rabbits at 0, 2, 4, 6, and 8 weeks of age, the morphological development of primary and secondary HFs was observed, and the gene transcript levels of insulin-like growth factor-I (IGF-I), epidermal growth factor (EGF), bone morphogenetic protein 2 (BMP2), transforming growth factor ${\beta}-1$, 2, and 3 ($TGF{\beta}-1$, $TGF{\beta}-2$, and $TGF{\beta}-3$) were examined using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). Additionally, Wnt family member 10b (Wnt10b) and ${\beta}$-Catenin gene and protein expression were examined by quantitative real-time PCR and western blot, respectively. Results: The results showed significant changes in the differentiation of primary and secondary HFs in Rex rabbits during their first 8 weeks of life. The IGF-I, EGF, $TGF{\beta}-2$, and $TGF{\beta}-3$ transcript levels in the rabbits were significantly lower at 2 weeks of age than at birth and gradually increased thereafter, while the BMP2 and $TGF{\beta}-1$ transcript levels at 2 weeks of age were significantly higher than those at birth and gradually decreased thereafter. ${\beta}$-Catenin gene expression was also significantly affected by age, while the Wnt10b transcript level was not. However, the Wnt10b and ${\beta}$-catenin protein expression levels were the lowest at 2 and 4 weeks of age. Conclusion: Our data showed that a series of changes in HFs in dorsal skin occurred during the first 8 weeks. Many genes, such as IGF-I, EGF, BMP2, $TGF{\beta}-1$, $TGF{\beta}-2$, $TGF{\beta}-3$, and ${\beta}$-Catenin, participated in this process, and the related proteins Wnt10b and ${\beta}$-Catenin in skin were also affected by age.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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