• 제목/요약/키워드: Salt bridge

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Elucidation of Serpin's Conformational Switch Mechanism By Rapid Kinetic Study

  • Kang, Un-Beom;Lee, Cheolju;Baek, Je-Hyun;Seunghyun Ryu;Kim, Joon;Yu, Myeong-Hee
    • 한국생물물리학회:학술대회논문집
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    • 한국생물물리학회 2003년도 정기총회 및 학술발표회
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    • pp.62-62
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    • 2003
  • The native form of serpin (serine protease inhibitor) is kinetically trapped in metastable state. Metastability in these proteins is critical to their biological function. Serpins inhibit target proteases by forming a stable covalent complex in which the cleaved reactive site loop of the serpin is inserted into $\beta$-sheet A of the serpin with concomitant translocation of the protease to the opposite of the initial binding site. Despite recent determination of the crystal structures of a Michaelis protease-serpin complex as well as a stable covalent complex, details on the kinetic mechanism remain unsolved. In this study we constructed several $\alpha$$_1$-antitrypsin variants and examined their kinetic mechanism of loop translocation and formation of protease-serpin complex by stopped-flow experiments of fluorescence resonance energy transfer as well as quenched-flow experiment. We report here the relationship of serpin's conformational switch mechanism with Inhibitory activity. There is little direct correlation between loop insertion rate and inhibitory activity. Rather, disrupting a salt bridge between R196 and E354 accelerates loop translocation even though it impairs the inhibitory activity. Moreover, the serpin's reactive site loop is translocated, at least partially, prior to loop cleavage.

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다중텅그스텐산 아민염의 분자량 측정 (Cryoscopy of Amine-Polytungstates)

  • 변종홍;연손수
    • 대한화학회지
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    • 제18권2호
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    • pp.126-131
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    • 1974
  • 비수용성 긴고리 지방족 아민인$(n-C_8H_{17})_3N$$(n-C_8H_{17})_3NCH_3Cl$을 사용하여 산도가 틀린 텅그스텐산수용액(pH=2, 4, 6)으로 부터 용매추출법에 의하여 유기용매에 녹는 다중텅그스텐산아민염을 제조하는데 성공하였다. 제조된 텅그스텐산 아민염의 분자량을 벤젠용매에서 더미스트를 이용한 감도 1/$4000^{\circ}C$의 훼트스톤 브리지를 사용하여 측정할 수 있었다. 분자량 측정결과와 화학분석 및 적외선 스펙트럼으로 부터 pH=2, 4에서 생긴 아민염은 메타텅그스텐산염, pH=6에서 생긴 아민염은 파라텅그스텐산염이 아니고 미지의 새로운 다중텅고스텐산염임을 알 수 있었다.

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Three Non-Aspartate Amino Acid Mutations in the ComA Response Regulator Receiver Motif Severely Decrease Surfactin Production, Competence Development, and Spore Formation in Bacillus subtilis

  • Wang, Xiaoyu;Luo, Chuping;Liu, Youzhou;Nie, Yafeng;Liu, Yongfeng;Zhang, Rongsheng;Chen, Zhiyi
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제20권2호
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    • pp.301-310
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    • 2010
  • Bacillus subtilis strains produce a broad spectrum of bioactive peptides. The lipopeptide surfactin belongs to one well-known class, which includes amphiphilic membrane-active biosurfactants and peptide antibiotics. Both the srfA promoter and the ComP-ComA signal transduction system are an important part of the factor that results in the production of surfactin. Bs-M49, obtained by means of low-energy ion implantation in wild-type Bs-916, produced significantly lower levels of surfactin, and had no obvious effects against R. solani. Occasionally, we found strain Bs-M49 decreased spore formation and the development of competence. Blast comparison of the sequences from Bs-916 and M49 indicate that there is no difference in the srfA operon promoter PsrfA, but there are differences in the coding sequence of the comA gene. These differences result in three missense mutations within the M49 ComA protein. RT-PCR analyses results showed that the expression levels of selected genes involved in competence and sporulation in both the wild-type Bs-916 and mutant M49 strains were significantly different. When we integrated the comA ORF into the chromosome of M49 at the amyE locus, M49 restored hemolytic activity and antifungal activity. Then, HPLC analyses results also showed the comA-complemented strain had a similar ability to produce surf actin with wild-type strain Bs-916. These data suggested that the mutation of three key amino acids in ComA greatly affected the biological activity of Bacillus subtilis. ComA protein 3D structure prediction and motif search prediction indicated that ComA has two obvious motifs common to response regulator proteins, which are the N-terminal response regulator receiver motif and the C-terminal helix-turn-helix motif. The three residues in the ComA N-terminal portion may be involved in phosphorylation activation mechanism. These structural prediction results implicate that three mutated residues in the ComA protein may play an important role in the formation of a salt-bridge to the phosphoryl group keeping active conformation to subsequent regulation of the expression of downstream genes.

산업부산물을 활용한 친환경제설제의 특성평가 (Evaluation of the Properties of an Environment-Friendly De-icing Agent Based on Industrial By-Products)

  • 허형석;이병재
    • 한국구조물진단유지관리공학회 논문집
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    • 제21권6호
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    • pp.132-139
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    • 2017
  • 한랭지역의 동절기 교통안전을 위하여 제설제 살포가 다량으로 이루어지고 있는데, 그 살포량도 매년 증가하고 있는 실정이다. 일반적으로 사용되는 제설제는 염화칼슘($CaCl_2$), 염화나트륨(NaCl)과 같은 염화물계가 주성분으로, 국내에서는 대부분 염화칼슘을 주로 사용하고 있고, 미국이나 일본의 경우는 소금인 염화나트륨으로 모두 염소이온을 포함하고 있다. 염화칼슘 제설제가 포함하고 있는 염화물 때문에 제설제 살포시 염화물은 도로 구조물로 침투하여 염해에 의한 철근부식을 유발하여 실제 포장이나 손상된 교량 구조물 내에서의 구조적 성능저하를 야기하고, 동절기 동해와 함께 복합적으로 작용하여 표면 스케일링을 발생시키며, 특히 살포제에 의한 수질 오염과 같은 심각한 부작용을 초래하고 있다. 또한 콘크리트 도로포장 표면이 염화칼슘 제설제 사용 후 나타나는 열화현상으로 인하여 기존의 염화칼슘 제설제의 경우 시각적으로 교통 외관상 문제를 가속화시키고 있다. 따라서, 본 연구에서는 산업부산물인 폐유기산과 칼슘계부산물을 반응시켜 친환경 액상 제설제를 제조하고 그 특성을 분석하여 도로시설물에 적용가능성을 검토하였다.

개질유황 폴리머를 사용한 콘크리트의 내구성 평가 (Durability of concrete using sulfur-modified polymer)

  • 홍창우
    • 한국결정성장학회지
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    • 제25권5호
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    • pp.205-211
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    • 2015
  • 황의 대부분은 천연가스와 원유를 탈황시켜 얻게 되며, 국내 정유 플랜트에서는 120만톤 이상 발생하고 있으며, 50 % 정도만이 비료 및 황산등을 만드는 원료로 소모되고 있다. 이에 산업부산물로 얻어지는 황을 콘크리트에 적용하기 위해 개질유황이 제조되고 있어, 이를 활용한 콘크리트의 강도 및 내구성을 평가하였다. OPC에 비해 개질유황 폴리머를 사용할 경우 압축 및 휨강도는 동일 배합수 온도에서는 유사하였으며, 배합수 온도가 증가함에 따라 강도는 다소 증가하였다. 또한 동결융해에 따른 저항성은 개질유황 폴리머의 영향보다는 공기연행제의 사용으로 제어가 됨을 확인하였다. 그리고 5 % 황산 침지에 따른 압축강도 저하율은 개질유황 폴리머를 사용한 콘크리트가 OPC보다 4배 이상 우수하였다. 그리고 제빙염에 대한 표면박리 저항성도 개질유황을 사용한 경우는 표면박리가 발생되지 않은 1등급, OPC의 경우는 골재가 노출되어 4등급으로 평가되었다. 따라서 개질유황 폴리머를 콘크리트에 개질제로 사용할 경우 내구특성이 우수하여 교면포장 등에 효율적으로 사용될 수 있을 것으로 판단된다.

시계열 분석 딥러닝 알고리즘을 적용한 낙동강 하굿둑 염분 예측 (Prediction of Salinity of Nakdong River Estuary Using Deep Learning Algorithm (LSTM) for Time Series Analysis)

  • 우정운;김연중;윤종성
    • 한국해안·해양공학회논문집
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    • 제34권4호
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    • pp.128-134
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    • 2022
  • 낙동강 하굿둑은 올해 2022년 해수 유입기간을 매월 대조기마다로 확대, 하굿둑 상류 15 km 이내로 기수역 조성을 목표로 운영되고 있다. 목표 기수역 조성구간 및 염수피해 방지를 위한 신속한 의사결정을 위해 본 연구에서는 딥러닝 알고리즘 Long Short-Term Memory(LSTM)을 적용하여 낙동대교(하굿둑 상류 약 5 km)지점의 염분 예측을 수행하였다. 창녕·함안보 방류량 등 낙동강 하구역의 시·공간적 특성을 반영하기 위한 입력데이터를 구축하였으며, Sequence length에 따른 정도 변화를 통해 낙동강 하구역의 수리학적 특성을 고려한 최적모델을 구축하였다. 예측 정확도는 결정계수(R-squred)와 RMSE(root mean square error) 이용하여 통계분석을 실시하였으며. Sequence length가 12일 때 R-squred 0.997, RMSE 0.122로 가장 정도가 높았으며, 선행 예측시간은 12시간 간격까지 R -squred 0.93 이상으로 높은 정도를 보였다.