• 제목/요약/키워드: Sacchromyces

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Schwanniomyces castellii CBS 2863으로부터 ${\alpha}$-Amylase 유전자 Cloning (Molecular Cloning of ${\alpha}$-Amylase Gene from Schwanniomyces CBS 2863)

  • 박종천;배석;전순배
    • 미생물학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.34-39
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    • 1994
  • Schwanniomyces castellii의 제놈 DNA로 제조된 유전자 은행으로부터 cloning된 ${\alpha}$-amylase 유전자가 Sacchromyces cerevisiae에서 발현되었다. Cloning된 삽입 DNA 절편의 크기는 약 5.0 kb이었고, Southern 및 immunoblot 분석 결과 cloning된 ${\alpha}$-amylase 유전자가 Sch. Castellii로부터 유래되었음이 확인되었다. S. cerevisiae SHY3 형질전환체에서 Sch. Castellii ${\alpha}$-amylase 유전자발현은 모균주에 비해 낮았으나, 단백질의 분자량 및 효소의 성질은 Sch. Castellii에서 분리한 ${\alpha}$-amylase의 그것과 차이가 없었다.

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Yeast Two-hybrid System을 이용한 cTPx II 결합단백질 탐색 및 분석 (Screening and Analysis for cTPx II-Interacting Protein Using Yeast Wo-hybrid System)

  • 김일한;오영미;차미경
    • 자연과학논문집
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    • 제15권1호
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    • pp.79-88
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    • 2005
  • 효모에는 여러 가지 종류의 thiol peroxid se 동위 효소들인 cytoplasmic TPx I, cTPx II, cTPx III, mitochodrial TPx (mTPx), 및 nuclear TPx (nTPx)가 존재하고 있다. 특히 cTPx II는 다른 효모TPx와 비교해 볼 때 매우 낮은 peroxidase 활성을 보이나, cTPx II를 제거한 cTPx II mutant균주는 심하게 성장이 저해되는 특징을 보인다. 본 연구에서는 효모에서의 cTPx II의 생리학적 기능을 밝히는 연구의 첫 과정으로 cTPx II와 상호 작용하는 단백질을 탐색하였다. Sacchromyces cerevisiae genomic DNA library에서 yeast two-hybrid system을 이용하여 cTPx II와 상호 결합하는 단백질을 탐색하여 그 단백질들의 기능을 연구하여, 궁극적으로 cTPx II의 생리기능을 밝히는데 이 연구의 목적을 두었다.

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Effect of Galactose Feeding Strategy on Heterologous Human Lipocortin-I Production in the Fed-Batch Culture of Saccharomyces cerevisiae Controlled by the GAL10 Promoter

  • Chung, Bong-Hyun;Kim, Byung-Moon;Rhee, Sang-Ki;Park, Young-Hoon;Nam, Soo-Wan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제5권4호
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    • pp.224-228
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    • 1995
  • Fed-batch fermentations were conducted to produce human lipocortin-I (LC1), a potential anti-inflammatory agent, from recombinant Sacchromyces cerevisiae carrying a galactose-inducible expression system. The cell growth, expression level of LC1, and the plasmid stability were investigated under various LC1 induction modes performed by three different galactose feeding strategies. Galactoe was fed to induce the expression of LCl from the beginning (initial induction) of culture or when the cell concentration reached 120 OD (mid-phase induction) or 300 OD (late induction). Among the three galactose-induction modes tested, the initial induction mode yielded the best result with respect to a final expression level of LC1. Fedbatch fermentation with initial induction mode produced LC1 at a conentration of 220 mg/l, which corresponded to 1.38- and 1.53-fold increases over those produced by mid-phase and late induction modes.

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아미노산(酸)의 종류(種類)에 따라 Sacchromyces cerevisiae가 생성(生成)하는 향기(香氣)의 변화(變化) (Aroma Produced by Scharomyces cerevisiae Using Various Amino Acids)

  • 신현경;안병학
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제28권3호
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    • pp.196-201
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    • 1985
  • Saccharomyces cerevisiae를 이용하여 합성배지중 질소원을 변화시키면서 생성된 향기성분을 조사한 결과 아미노산에 따라서 향기의 변화가 크게 나타났으며 특히 aspartic acid 배지는 전통적인 탁주향기, leucine배지는 휴젤유취 그리고 phenylalanine배지는 꽃향기등 흥미있는 향기를 발산하였다. 이들 배양액의 휘발성 화합물을 GC를 사용하여 분석한 결과 ethanol, iso-amyl alcohol, n-propanol이 주된 성분으로 밝혀졌으며 이외에 aspartic acid 배지에서는 phenethyl alcohol이 그리고 phenylalanine배지에서는 상당량의 phenethyl alcohol과 phenethyl acetate가 검출되었다.

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Trp, Thr Analogue 복합 저항성 Saccharomyces cerevisiae 균주 개발 (Isolation of Trp, Thr Overproducing Strain of Saccharomyces cerevisiae)

  • 염형준;이승현;김선혜;선남규;안길환;이봉덕;원미선;송경빈
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권6호
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    • pp.1017-1021
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    • 2004
  • Thr, Trp을 overproduce하는 효모 균주를 분리하기 위하여 Sacchromyces cerevisiae를 UV와 EMS로 mutagenesis한 후 screen하였다. Thr analogue인 hydroxynorvaline이 UV mutagenesis 후 Thr overproducing 하기 위해 사용되었다. 31 mutant 중 아미노산 분석 결과에 의해 TC 5-1이 선정되었고 다시 Trp overproducing 위해 EMS mutagenesis 하였다. 8개의 mutant가 flurotryptophan을 이용하여 Thr, Trp을 overproduce하는 mutant로 선정되었다. 아미노산결과에 의해 그 중 TC 6-1이 최종 효모 균주로 선정되었다.

핵전이를 이용한 Saccharomycopsis 속과 Saccharomyces 속간의 잡종형성 (Intergeneric Hybrid Constructed by Nuclear Transfer of Saccharomycopsis into Saccharomyces)

  • 양영기;임채영;강희경;문명님;이영하
    • 한국균학회지
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    • 제27권6호
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    • pp.399-405
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    • 1999
  • ${\alpha}-amylase$ 생산력이 우수한 야생형인 S. fiburigera의 핵을 순수분리하여 영양요구성 변이주인 S. cerevisiae(tyr-, ura-)의 원형질체에 전달하는 핵전이를 이용하여 종간잡종을 형성시킨 후 이들 형질전환체로부터 ${\alpha}-amylase$ 고생산 균주를 획득하였다. 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KC1, 효소처리 시간은 90분, 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환율은 0.25%로 비교적 낮은 편이었으며, 유전적 안정성, 세포크기의 체적, DNA함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. 형질전환 체의 ${\alpha}-amylase$ 활성은 모균주와 비교하여 약 $1.2{\sim}1.9$배 증가하였다.

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Effect of Trehalose on Stabilization of Cellular Components and Critical Targets Against Heat Shock in Saccharomyces cerevisiae KNU5377

  • PAIK SANG-KYOO;YUN HAE-SUN;IWAHASHI HITOSHI;OBUCHI KAORU;JIN INGNYOL
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제15권5호
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    • pp.965-970
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    • 2005
  • In our previous study [14], we found that heat-shock exposure did not stimulate the neutral trehalase activity in Sacchromyces cerevisiae KNU5377, but did in ATCC24858. Consequently, the trehalose content in KNU5377 became 2.6 times higher than that in ATCC24858. Because trehalose has been shown to stabilize the structure and function of some macromolecules, the present work was focused to elucidate the relationship between trehalose content of these strains and thermal stabilities of whole cells, through differential scanning calorimetry (DSC), and to predict critical targets calculated from the hyperthermic cell killing rates. These analyses showed that the prominent DSC transition of both strains gave identical $T_m$ (transition temperature) values in exponentially growing cells, and that the $T_m$ values of critical targets was about $3^{\circ}C$ higher in KNU5377 than in ATCC24858. Both heat-shocked KNU5377 and ATCC24858 cells displayed similar shifts in their DSC transition profiles. On the other hand, the $T_m$ value of the critical target of KNU5377 was decreased by $2.1^{\circ}C$, which was still higher than ATCC24858 showing no changes. In view of these results, the intrinsic thermotolerance of KNU5377 did not appear to result from the stability of entire cellular components, but rather possibly from that of particular macromolecules, including critical targets, even though it should be investigated in more details. Although the trehalose levels in heat-shocked cells are significantly different, as described in our previous study [14], the overall pattern of thermal stabilities and their predicted critical targets in two heat-shocked strains seemed to be identical. These data suggest that the trehalose levels examined before and after heat shock of exponentially growing cells are not closely correlated with the stabilities of whole cells and/or critical targets in both yeast strains.

Saccharomyces cerevisiae 를 이용한 반복 유가식 ethanol 발효에서 ethanol 생산량을 증가를 위한 운전 전략 (Operational Strategy for Increasing Ethanol Production in Repeated Fed-batch Ethanol Fermentation Using Saccharomyces cerevisiae)

  • 이상은;서현범;권민철;이현용;정경환
    • KSBB Journal
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    • 제25권2호
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    • pp.187-192
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    • 2010
  • S. cerevisiae ATCC 24858을 이용한 ethanol 생산에서, aeration 효과를 ethanol 수율, specific ethanol production rate, ethanol 생산성 측면에서 분석하여, 반복 유가식 공정전략을 설계하였다. Ethanol 수율과 ethanol 생산성은 공기를 0.33 vvm 넣었을 때, 공기를 넣지 않고 배양한 것에 비하여 더 큰 값을 보였고, 24시간 마다 배지를 교체한 배양이 36시간 마다 배지를 교체한 배양 보다 더 큰 값을 보였다. 총 ethanol 생산량 값이 가장 큰 경우는 0.33 vvm의 공기를 넣고, 배지를 24시간마다 완전히 갈아주었을 때이고, 이때 가장 많은 703.8 g의 ethanol이 생산되었다.

멸치젓 숙성중 불휘발성아민의 함량 변화 (Change of Nonvolatile Amines During Fermentation of Anchovy)

  • 정종순;이영근;박법규;류병호
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.37-44
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    • 1989
  • 멸치를 물로 씻은 후 식염 10%, 15%, 20% 및 식염과 염화칼리 1:1 홈합염 10%를 각기 첨가하여 1~12주간 숙성할 때 불휘발성 아민의 함량과 미생물의 변화와 시중에 유통중인 멸치젓의 불휘발성아민 함량을 조사하였다. 불휘발성아민은 식염농도가 높을수록 생성량이 적었고 숙성기간별 생성량은 histamine의 경우 숙성 초기부터 증가하여 6주째에 식염 10%, 멸치젓이 657.8ppm으로 최고치를 나타낸 후 감소하기 시작하여 숙성 12주째는 식염 20%, 멸치젓이 210.8ppm으로 가장 적었고 혼합염 10% 멸치젓이 310.8ppm으로 가장 많이 생성되었다. Cadaverine과 putrescine은 숙성 8주째까지 생성량이 증가한 후 점차적으로 줄어들었고 tyramine은 숙성 10주째까지 RPthrwmd가한 뒤 숙성 12주째 현저히 감소하였다. 시중 유통품과 식염 함량이 비슷한 20% 멸치젓의 12주째 실험결과를 비교하면 시중 유통품의 불휘발성 아민 함량이 전반적으로 높게 나타났다. 미생물의 변화는 숙성 초기에는 Achromobacter 속, Aeromonas 속 및 Pseudomonas속이, 숙성 중기에는 Pediococcus속 , Microc....us 속 및 Lactobacillus 속이 많았으며 숙성 후기에는 Sacchromyces 속이 증가하였고 전 숙성기간 동안 미생물은 109주가 분리되었다.

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애엽(艾葉) 발효 추출물의 면역활성에 관한 연구 (Studies on the Immuno Modulating Acitivity of Fermented Artemisiae Argyi Folium Extract)

  • 한효상;박완수;이영종
    • 대한본초학회지
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    • 제23권3호
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    • pp.103-112
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    • 2008
  • Objectives : This research aimed to study the cytotoxicity and immuno modulating activity of fermented Artemisia argyi Lev. et Vant.(Compositae). Methods : Effect of fermented Artemisiae Argyi Folium extracts, which were fermented by Sacchromyces cerevisiae STV89(AFS), on cell viability, generation of ROS within cells, generation of NO and the level of cytokines($TNF-{\alpha}$ and IL-6) was measured using mouse macrophage RAW 264.7 cell. Results : 1. Result of MTT assay conducted to verify the cytotoxicity of fermented Artemisiae argyi folium extract illustrated that, when fermented Artemisiae argyi folium extract was processed for each concentration, there was no excessive induction of cytoxicity in the RAW 264.7 cell. 2. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract increased the generation of H2O2 within RAW 264.7 cell as well as significantly increased inhibition of generation of H2O2 in macrophage induced by LPS. 3. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract inhibited generation of NO in RAW 264.7 cell, and significantly inhibited increase in generation of NO of macrophage induced by LPS. 4. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract, AFS has significantly reduced the increase in the generation of $TNF-{\alpha}$ above 10 ${\mu}g/mL$. 5. Fermented Artemisiae Argyi Folium extract, AFS has significantly reduced the increase in generation of IL-6 above 50 ${\mu}g/mL$. Conclusions : AFS fermented extract produced from Artemisiae Argyi Flium, have increased generation of ROS and reduced generation of NO in RAW 264.7 cell without excessively inducing cytotoxicity of RAW 264.7 cell. In addition, they displayed significant immuno modulating activities including inhibition of generation of $TNF-{\alpha}$ and IL-6 in macrophage, induced by LPS.

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