Background: Some studies confirm the reduction of the number of Streptococcus mutans in saliva and dental plaque by Lactobacillus, however, these effects are not always confirmed in in vitro and clinical studies, and only the risk of dental caries has been reported. Our in vitro study aimed to reveal microbial and biochemical changes in the single cultures of S. mutans, Lactobacillus casei and Aggregatibactor actinomycetemcomitans and co-cultures of S. mutans and L. casei or A. actinomycetemcomitans according to sucrose concentration. We also aimed to confirm the anti-oral bacterial and anti-biofilm activities of L. casei and A. actinomycetemcomitans against S. mutans according to sucrose concentration. Methods: S. mutans (KCCM 40105), L. casei (KCCM 12452), and A. actinomycetemcomitans (KCTC 2581) diluted to 5×106 CFU/ml were single cultured, and L. casei or A. actinomycetemcomitans applied at concentrations of 10%, 20%, 30% and 40% to S. mutans were co-cultured with selective medium containing 0%, 1% and 5% sucrose at 36.5℃ for 24 hours. Measurements of bacterial growth value and acid production, disk diffusion and biofilm formation assays were performed. Results: In the medium containing sucrose, the bacterial growth and biofilm formation by S. mutans, L. casei, and A. actinomycetemcomitans were increased. In contrast, 30% and 40% of L. casei in the medium containing 0% sucrose showed both anti-oral bacterial and anti-biofilm activities. This implies that L. casei can be used as probiotic therapy to reduce S. mutans in a 0% sucrose environment. Conclusion: The concentration of sucrose in the oral environment is important for the control of pathogenic bacteria that cause dental caries and periodontitis. To apply probiotic therapy using L. casei for S. mutans reduction, the concentration of sucrose must be considered.
Streptococcus mutans, one of a major causal agents of dental caries, is component of the dental plaque and produces various organic acids such as lactic acid as the end-product of glycolysis. In this study, we isolated S. mutans from Korean children with caries and also investigated the expression of protein under acid stress. S. mutans was identified at the species level using a 16S ribosomal DNA sequencing comparison method. The primer specificity was tested on eleven S. mutans strains isolated from Korean children with caries. The data showed that eleven strains are S. mutans. At treatment of concentration of 20 mM lactic acid in the mid-log phage, K-7 exhibited the highest maximum culture OD compared with those of other groups. As a consequence, we examined the expression of protein under 20 mM lactic acid stress using S. mutans K-7. The results of 2D gel electrophoresis by image analysis showed that thirteen proteins are up-regulated under the stress. Further study is being focused on amino acid analysis by mass spectrometry in order to analyze those spots.
Park, Sang-Jin;Lee, Jean-Yong;Chung, Choong-Mo;Ha, Youn-Mun;Choi, Ho-Young
Restorative Dentistry and Endodontics
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제6권1호
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pp.93-103
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1980
Streptococcus mutans were isolated from dental plaques of carious lesions of 4 patients on mitis-salivarius agar medium. Three patients known to harbor S. mutans in their dental plaques. Identification of the isolated S. mutans was established by colonial morphology on mitis-salivarius agar medium, the fermentation of mannitol and sorbitol, and confirmed by agglutinating reaction with home made anti-S. mutans NCTC 10449 (serotype c) antiserum. Of the isolated S. mutans, one strain (P2-1) showed strong agglutinating reaction with antiserum, another strain (P1-2) showed weak agglutinating reaction. P2-1 strongly adhered to the wall of the test tube containing 5% sucrose broth, while p1-2 weakly colonized on the wall of the test tube. Biotyping of the isolated S. mutans based on the fermentation of mannitol, sorbitol, raffinose and melibiose, and the production of ammonia from L-arginine, and the inhibition of acid production by bacitracin. Biochemical characteristics of P2-1 strain correlated with the recognized biotype c, pl-2 strain resembled biotype d of S. mutans.
Objective: Transmission of S. mutans, a major dental caries pathogen, occurs mainly during the first 2.5 years of age. Children appear to acquire S. mutans mostly from their mothers, but few studies have investigated preventive effect of xylitol to S. mutans transmission from mother to child. The aim of this study was to perform a follow-up evaluation the preventive effect of xylitol chewing gum of the S. mutans of children's oral cavities, which included the characteristics of vertical transmission from mother to child. Methods: The mothers voluntarily participating in a women's oral health prevention program were divided into two groups (a control and a xylitol group). The subjects were 20 mother-child pairs, who were monitored for 30 months. Xylitol chewing gum group had consumed 2 gum pellets, 3 times a day for 24 months, and then they were followed until 30 months. At baseline, 24 and 30 months whole stimulated saliva samples were collected from the mothers. Children were also recruited from 6 months to 30 months after birth and were collected their dental plaque samples. After isolation and identification, the analysis of the colony count, transmission electron microscopy and real-time RT-PCR were performed to analyze the characteristics of S. mutans. Results: The S. mutans counts decreased steadily in the xylitol group at 24 months, but increased at 30 months. The similar results were showed at their children. While the glucan synthesis was decreased at xylitol group both mother and child. The expression of gtfB, gtfD and ftf were significantly reduced in the xylitol group both mother and child (p<0.05). Conclusions: These findings indicate that chewing xylitol gum over a long period may decrease the expression of the genes associated virulence and reduced the glucan synthesis of S. mutans, which can result the preventing the mother-to-child transmission of S. mutans.
This study was to study the antibacterial effect of Lignum sappan extract on S. mutans growth. The antibacterial activities of Lignum sappan's crude extract was measured 17.3 mm at 20 mg/ml concentration. The growth of S. mutans in control medium was the highest at 8hr, while the media of Lignum sappan extract added-medium (2 mg/ml) showed maximum growth at 16hr. The pH values of the control media was 5.08 at 8hr, but the media supplemented with Lignum sappan extract was 6.69 at 8hr. The amounts of total carbohydrate of the control media was 0.81 mg/ml at 8hr, but the media supplemented with Lignum sappan extract was 2.06 mg/ml at 8hr. In the protein change of culture medium, the control culture broth and the cultures supplemented with Lignum sappan extract was 8.39 mg/ml and 12.3 mg/ml at 8hr, respectively. The S. mutans polysaccharide contents of the control media and the media supplemented with Lignum sappan extract was 300 mg/100ml and 60 mg/100ml at 8hr, respectively.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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제38권2호
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pp.155-160
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2011
Probiotics has currently attracted for means of preventive treatment measurement instead of using non-specific and broad spectrum antimicrobials. In previous studies, two main probiotics species, Lactobacillus and Bifidobateria, showed the reduction of DMFS and S. mutans counts. However, the timing of introducing probiotic species to oral cavity is not clear. The aim of this study is to evaluate the changes of binding ability of S. mutans in various concentrations and inoculation time of L. rhamnosus GG. Adding the following concentration of L. rhamnosus GG, $1{\times}10^6$ CFU, $1{\times}10^7$ CFU and $1{\times}10^8$ CFU, to S. mutans medium demonstrates significant reduction of S. mutans counts. Additionally, more reduction was observed when L. rhamnosus were inoculated prior to S. mutans or simultaneously inoculated compared to when S. mutans were inoculated prior to L. rhamnosus after 3 hours of incubation. Based on this research, the timing of introducing probiotics should be considered when probiotics are utilized as a preventive treatment measurement.
Dental caries is one of the most common oral diseases in the world. Glucosyltransferase (Gtase) of Streptococcus mutans (S. mutans) plays an important role in the develo pment of dental caries. For the purpose to develop anti- caries, we examined the effect of metabolites isolated from Streptomyces sp. M-20 on Gtase and the growth of S. mutans. Streptomyces sp. M-20 isolated from Mongolian soil showed 95~96% sequence homology with that of Streptomyces lin- colnensis. The metabolites of Streptomyces sp. M-20 were partially purified by extraction with ethyl acetate, silica gel column chromatography and preparative TLC. Partially purified metabolite, red colored component (MR-20) in ethyl acetate fraction showed potent antibacterial activitiy against S. mutans and inhibitory activity against Gtase purified from S. mutans, while another isolated yellow component (MY-20) showed no activity against S. mutans. The inhibitory activity of MR-20 against Gtase was confirmed by activity staining on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The concentration of MR-20 for 50% inhibition $(IC_{50})$ against Gtase activity was $60{\mu}g/ml$. These results suggest that MR-20 can be developed for antibacterial agent and anticaries.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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제33권3호
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pp.401-410
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2006
Dental caries results from localized demineralization of tooth enamel by acids of bacterial origin produced from the fermentation of dietary sugars. A group of related oral bacteria, collectively known as mutans streptococci, are implicated as the primary etiological agents of human caries. Within this group, Streptococcus mutans has been known as a causative agent for dental caries. As well as acid production yielding the demineralization of tooth enamel, adherence and colonization of S. mutans to the teeth are also important for their virulence Cell-surface fibrillar proteins, which mediate adherence to the salivary pellicle are virulence components of mutans streptococci, and primary candidates for a human caries vaccine. Here we report that the AgI/II gene from S. mutans GS-5 were cloned by PCR amplification of the bacterial chromosomal DNA and the integrity of cloned genes were confirmed by nucleotide sequencing. Sequence analyses showed the sequence alignment of 280 nucleotides between the cloned AgI/II and the reported sequence of S. mutans GS-5 showed the perfect match The cloned genes which signal nucleotide was truncated, were transferred into bacterial expression vector and the recombinant proteins were purified as His-tag fusion proteins In order to generate polyclonal antibodies against the recombinant proteins, AgI/II mr, some $100{\mu}g$ of the proteins was injected into mice three times. It can be used for an effective vaccine production to prevent dental caries caused by pathogenic S. mutans.
The effect of topical application on the number of S. mutans was tested in a group of 44 orthodontic patients (mean age, 12Y 3M). They were divided into 5 groups according to the method using NaF and $SnF_2$. The number of S. mutans CFU were counted in stimulated saliva of each subject at baseline, and after one, two, three, and eight weeks. The following results were obtained. 1. In NaF rinsing group, and NaF topical application and NaF rinsing group, the number of S. mutans per ml saliva was not significantly changed. 2. In $SnF_2$ topical application group, and $SnF_2$ topical and NaF rinsing group, the number of S. mutans per ml saliva was significantly reduced. 3. After 8 weeks, there were no significant reduction of the number of S. mutans in comparison with baseline.
Objectives: Although the coating of surface sealants to dental composite resin may potentially reduce bacterial adhesion, there seems to be little information regarding this issue. This preliminary in vitro study investigated the adhesion of Streptococcus mutans (S. mutans) on the dental composite resins coated with three commercial surface sealants. Materials and Methods: Composite resin (Filtek Z250) discs (8 mm in diameter, 1 mm in thickness) were fabricated in a mold covered with a Mylar strip (control). In group PoGo, the surfaces were polished with PoGo. In groups PS, OG, and FP, the surfaces polished with PoGo were coated with the corresponding surface sealants (PermaSeal, PS; OptiGuard, OG; Fortify Plus, FP). The surfaces of the materials and S. mutans cells were characterized by various methods. S. mutans adhesion to the surfaces was quantitatively evaluated using flow cytometry (n = 9). Results: Group OG achieved the lowest water contact angle among all groups tested (p < 0.001). The cell surface of S. mutans tested showed hydrophobic characteristics. Group PoGo exhibited the greatest bacterial adhesion among all groups tested (p < 0.001). The sealant-coated groups showed statistically similar (groups PS and FP, p > 0.05) or significantly lower (group OG, p < 0.001) bacterial adhesion when compared with the control group. Conclusions: The application of the surface sealants significantly reduced S. mutans adhesion to the composite resin polished with the PoGo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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