ClpP is a stress-inducible protein and proteolytic subunit of the ATP-dependent Clp protease in prokaryotes and eukaryotes. Although its physiological roles in bacterial virulence were widely studied in various organsims, including Streptococcus pneumoniae, until now the immunological effect has not been investigated. Here, we have examined the cross reactivity of S. pneumoniae ClpP antibody with other organisms's cell lysate proteins. Although the protein sequence of S. pneumoniae ClpP was highly conserved among various organisms including human, the antibody rasised by S. pneumoniae ClpP was not cross-reacted with other organism's cell lysates, which were Saccharomyces cerevisiae , human lung A549 cell, Bacillus subtilis, Pseuomonas aeruginosa, E. coli, and Salmonella typhi. It was only reacted with S. pneumoniae and Lato-bacillus thermophilus. Thus we examined the immunoprotective effect of ClpP by immunizing mice with the purified ClpP. The mean survival time of mouse was significantly increased with the ClpP immunization. These results suggest that S. pneumoniae ClpP could be used as a vaccine candidate for prevention of S. pneumoniae infection.
Kim, Sung-Hyo;Sung, Hyun-Ju;Shin, Yong-Seo;Kim, Dong-Han;Lee, Kap-Sang
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.26
no.5
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pp.644-648
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1994
Lactic acid bacteria(LAB) and its metabolites were tested for their inhibitory effect on the growth of Staphylococcus aureus in vitro. When S. aureus and LAB were incubated simultaneously in MRS broth, the growth of S. aureus began to be suppressed after 12 hour of incubation, completely inactivated within 24 hour of incubation by L. lactis and 48 hour by L. casei, L. acidophilus, and Sc. thermophilus. The pH values of media incubated by S. aureus and LAB were about 4.5 at 12 hour of incubation and 3.5 at 48 hour. The metabolites of the four LAB all exerted antibacterial activity on the growth of S. aureus in TS broth, but is got lost the antibacterial activity by heating ($100^{\circ}C,\;20\;min$). On treating metabolites with catalase, only L. lactis were lost its antibacterial activity. Organic acids (acetate, lactate) showed more active inhibition than inorganic acid (HCl) at pH 3.5, 4.5 but there is no significant differance at pH 5.5, 6.5.
Seven different strains of lactic bacteria and 13 combinations of these microorganisms were tested for their acid forming capacity on a vegetable milk made from lupinseed protein concentrate(LPC). L acidophilus, L casei, S. lactis, L. mesenteroides, mixed culture of L. acidophilus and S. thermophilus, and mixed culture of S. lactis and L. mesenteroides were selected and further tested for their growth pattern and acid forming property on lupinseed milk both untreated and partly hydrolized one with carbohydrate decomposing enzymes. The enzyme hydrolized lupinseed milk had 1.5 folds of total free sugar, 8.2 folds of fructose, 3 folds glucose, 2.3 folds maltose, compared to the untreated lupinseed milk. For the untreated lupinseed milk, L. mesenteroides was appeared to be most suitable microorganism having the maximum cell concentration of 1.0 $\times$ 10$^{9}$$m\ell$ and the final pH 4.40 with the acidity 0.46%. For the enzyme treated lupinseed milk, mixed culture of L. acidophilus and S. thermophilus showed the best performance having 1.9$\times$10$^{9}$$m\ell$ maximum cell number and the final pH and acidity were 3.69 and 1.13%, respectively. Lactic acid fermentation altered the physical property of lupinseed milk; by fermentation the viscosity generally increased with untreated lupinseed milk, but decreased with enzyme hydrolized one. The viscosity change and sedimentation rate of fermented milk varied with the type of lactic bacteria. The results of sensory evaluation indicated that S. lactis, L. casei, mixed culture of S. lactis and L. mesenteroides, and mixed culture of L. acidophilus and S. thermophilus, grown on enzyme hydrolized lupinseed milk, could produce acceptable lactic beverage.
Changes in erotic acid (OA) contents of raw milk and during cultivation and storage at refrigerated temperature were determined. OA contents of raw and 10% reconstituted milk held at $121^{\circ}C$ for up to 15 min decreased by 17.6 and 22.4%, and those fermented at 40 and $37^{\circ}C$ for 72 hr with Lactobacillus helveticus 166 and Lactobacillus casei 955 decreased 37.8-43.2 and 41.8-76%, whereas when fermented at $40^{\circ}C$ for 72 hr with Streptococcus thermophilus ST-37, did not decrease significantly compared with fermentation by other lactobacilli. OA content did not change during storage at refrigeration temperature. OA reduction by Lactobacillus sp. was dramatically increased at the initiation of stationary phase during fermentation. OA reduction varied among different lactobacilli. These results show decrease in cultivation time, rapid cooling of yogurt, and proper selection of Lactobacillus sp. prevent OA content reduction.
Kim, Sun-Young;Souane, Moussa;Kim, Gie-Eun;Lee, Cherl-Ho
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.23
no.6
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pp.689-694
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1991
Jangsu, a Korean ancient non-alcoholic beverage made by lactic acid fermentation of cooked rice, was prepared and the microbial characteristics were investigated. The periodic removal of fermented product and the addition of newly made cooked rice and cold water as new substrate enhanced the growth of lactic acid forming bacteria but supressed the growth of proteolytic bacteria. The important microorganisms in jangsu were Lactobacillus, Lactococcus, Pediococccus and Leuconostoc species. Lactococcus thermophilus, Lactobacillus coryniformis and Leuconostoc mesenteroides were identified. The isolated strains were cultivated and used as starter culture of jangsu. Some useful strains were selected which were able to produce acceptable flavor and sufficient amount of acid lowering the pH to near 4.0.
Recombinant heterologous proteins can be produced as insoluble aggregates partially or perfectly inactive in Escherichia coli. One of the strateges to improve the solubility of recombinant proteins is fusion with a partner that is excellent in producing soluble fusion proteins. To improve the production of soluble $\beta$-galactosidase, the gene of Thermus thermophilus KNOUC112 $\beta$-galactosidase (KNOUC112 $\beta$-gal) was fused with thioredoxin gene, and optimization of its expression in E. coli TOP10 was performed. KNOUC112 $\beta$-gal in pET-5b was isolated out, fused with thioredoxin gene in pThioHis C, and transformed to E. coli TOP10. The $\beta$-galactosidase fused with thioredoxin was produced in E. coli TOP10 as dimer and trimer. The productivity of fusion $\beta$ -galactosidase expressed via pThioHis C at 37$^{\circ}C$ was about 5 times higher than that of unfused $\beta$-galactosidase expressed via pET-5b at 37$^{\circ}C$. Inclusion body of $\beta$-galactosidase was formed highly, regardless of the induction by IPTG when KNOUC112 $\beta$ -gal was expressed via pET-5b at 37$^{\circ}C$. Fusion $\beta$ -galactosidase expressed at 37$^{\circ}C$ via pThioHis C without the induction by IPTG was soluble, but the induction by IPTG promoted the formation of inclusion body. Lowering the incubation temperature for the expression of fusion gene under 25$^{\circ}C$ prevented the formation of inclusion body, optimally at 25$^{\circ}C$. 0.07 mM of IPTG was sufficient for the soluble expression of fusion gene at 25$^{\circ}C$. The soluble production of Thermus thermophilus KNOUC112 $\beta$-galactosidase could be increased about 10 times by fusion with thioredoxin, and optimization of incubation temperature and IPTG concentration for induction.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.24
no.2
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pp.254-260
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1995
Yogurt base were prepared from milk added with skim milk powder or Aloe vera powder and femented with lactic acid bacteria(the single or mixed strain of Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus). The yogurt product were evaluated for acid production(pH, titratable acidity), number of viable cell, viscosity, sensory property and quality-keeping property. The composition of organic acid were also analyzed by HPLC. Addition of Aloe vera remarkably accelerated acid production, and titratable acidity of Aloe vera yogurts(1.293∼1.407%) after 24 hours incubation was higher than that of yogurts added with only skim milk powder(9.98∼1.110%). Yogurt fermented with the mixed strain of L. bulgaricus and Sc. thermophilus was more acidic than that of single strains. The propagation of lactic acid bacteria was stimulated by Aloe vera and the number of viable cell after 24 hours incubation were above 9.87log CFU/ml. Viscosity of Aloe vera yogurt(3,860∼4,300CPS) was higher than that of yogurt with only skim milk powder(2,402∼2,604CPS). The overall sensory score of Aloe vera yogurt femented by mixed strain was the best of tested yogurt. When yogurt with Aloe vera was kept at 5℃ for 15 day, it's quality-keeping property was relatively good. The major organic acid of Aloe vera yogurt was lactic acid and lactic acid content of yogurt increased by addition of Aloe vera powder. The citric acid content decreased wtih fermentation and malonic acid, pyroglutaric acid and α-ketoglutaric acid were analyzed out a little.
Jung, Seung-Won;Lee, Kwang-Geun;Kim, Cheol Woo;Lee, Su Han
Food Engineering Progress
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v.14
no.3
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pp.208-216
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2010
Lab scale experiments were conducted in order to assess the applicability of $CaCO_{3}$-alginate beads as neutralizer for the high cell density cultivation and prepare the direct vat inoculation cultures of isolated sourdough lactic acid bacteria. With increasing the amount of bead and decreasing the diameter of bead in acidic solution, the neutralizing effect of $CaCO_{3}$-alginate bead became higher. In batch process with $CaCO_{3}$-alginate beads, Lactobacillus amylovorus DU-21 isolated from sourdough showed the highest viable cell counts and optical density in MRS broth. The values of viable cell counts and optical density were 9.996 log CFU/mL and 3.97, respectively. Experiments on the conditions which increase viability during lyophilization were carried out and the following results were obtained; 15% glycerol revealed the high cryoprotective effect on the concentrated cultures during lyophilization among the two cryoprotective agents. Consequently, $CaCO_{3}$-alginate beads and 15% glycerol were found to be useful not only to cultivate Lactobacillus amylovorus DU-21 but also to preserve strain.
In order to clarify the effect of the fish meat hydrolysate on the growth of lactic acid bacteria(Str. lactis, Str. thermophibus, L. bulgaricus, L. acidophilus, and L. helveticus), the optimum conditions for hydrolyzing the fish meat were examined, and changes of the acid production, viable cell count of lactic acid bacteria and the charge of pH of the culture medium by addition of the fish meat hydrolysate were tested. The results were as follows: 1. When the hydrolysis of back muscle of mackerel was proceeded at $50^{\circ}C$ and at pH 8, for 48 hours adding 6% pancreatin of the protein content in the substrate, the best result was obtained. 2. The composition of the fish meat hydrolysate were 53.6% moisture, 32.4% protein, 1.0% fat, 10.7% carbohydrate, and 3.2% ash. 3. Above 0.1% of the fish meat hydrolysate in the culture medium, the acidity of the culture medium by Sir. lactis and Str. thermophilus were increased remarkably. The acidity of the culture medium by L. acidophilus and L. helveticus were increased in above 0.2% fish meat hydrolysate in the culture medium. but L. bulgaricus was not effected by the fish meat hydrolysate. 4. The pH of the culture medium during incubating Str. laclis and Sir. thermophilus failed obviously by adding the fish meat hydrolysate. But in the cases of L. bulgaricus, L. acidophilus, and L. helveticus, the pH were not changed clearly. 5. The viable cell count in all bacterial strains tested here were elevated by increasing the concentration of the fish meat hydrolysate.
This experiment was carried out to investigate the effect of green tea powder on the growth and acid production of lactic culture in reconstituted skim milk. The supplementation level of green tea powder to reconstituted skim milk was $0.5\%,\;1.0\%,\;1.5\%,\;2.0\%\;and\;2.5\%$. Reconstituted skim milk containing green tea powder was fermented by single or mixed culture of Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei. Supplementation of green tea powder did not significantly stimulate growth and acid production of Streptococcus thermophilus and Lactobacillus casei. But the growth and acid production of Lactobacillus acidophilus were slightly enhanced by the addition of green tea powder. When green tea powder was added to reconstituted skim milk at the level of $0.5\%\;or\;1.0\%$, all mixed cultures oi lactic acid bacteria showed high number of viable cell count and the acid production than 3 kinds of single cultures. Therefore, it was suggested to manufacture the yoghurt with the addition of $0.5\~1.0\%$ green tea powder and the inoculation of mixed cultures of lactic acid bacteria for on the stimulation of growth of the lactic culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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