절간고구마원료주정폐액을 이용하여 단세포단백질을 생산함과 동시에 폐액의 BOD를 제거할 목적으로 우수효모를 선발하고, 선발된 효모의 배양조건을 검토한 후 3$\ell$ -jar fermenter에 의한 통기 배양을 한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 폐액을 여과한 여액의 조성은 BOD$_{5}$ 15700ppm, COD 36800ppm, 환원당 3300ppm, 총질소 710ppm, 고형물51800ppm, 조회분390ppm이었다. 우수효모로 선발된 Torulopsis candida FRI YA-15를 $25^{\circ}C$에서 48시간 진탕배양하였을 때, 배양폐액에 대한 균체수율은 3.38g/$\ell$, BOD$_{5}$ 및 COD제거율은 각각 38.9%, 31.8%이었다. T. candida의 최적생육초기 pH는 4.0이었으며, 최적배양온도는 35$^{\circ}C$였다. 설정된 초기PH 및 온도하에서 3$\ell$-jar fermenter를 사용하여 통기량 2vvm, 교반속도 100rpm으로 배양하였을 때, 배양 28시간후에 최대로 생육하였으며, 그 때 배양액에 대한 균체수율은 3.2g/$\ell$였다. 건조균체의 조단백질함량은 47.98%였다.
This study was purposed to investigate the efficiency of protein utilization of rapeseed meal (RSM) and formaldehyde-treated RSM (TRSM) by sheep, and their influence on performance of growing heifers. Experiment 1 was conducted according to a double $3{\times}3$ Latin square design involving sex yearling Hu Sheep and three experimental diets. All diets contained 600 g ammoniated rice straw and 200 g concentrate mixture. Three dietary treatments were: (1) 100 g RSM + 40 g soybean meal (URUS), (2) 100 g TRSM + 40 g soybean meal (TRUS) and (3) 100 g TRSM + 40 g treated soybean meal (TRTS). Apparent nitrogen digestibility was significantly higher for diet TRUS than that for URUS or TRTS (p<0.05), but with no significant difference between URUS and TRTS (p>0.05). Proportion of nitrogen retention (NR) to the digestible nitrogen intake for diet TRUS and TRTS was 25.57 (p<0.05) and 23.44% (p<0.05) higher than that for URUS respectively. As a result, proportion of NR to nitrogen intake for diet TRUS and TRTS was 34.74 (p<0.05) and 23.78% (p<0.05) higher than that for URUS respectively. Experiment 2 was conducted with 59 Holstein heifers. They were 12-20 months of age at the start of the trial. The experiment was a $2{\times}2$ factorial trial in which the heifers were given the ammoniated rice straw ad libitum and 1.5 kg hay, and supplemented with either RSM or TRSM at a daily allowance of 1.2 or 1.8 kg per day. The live weight gains for heifers receiving 1.2 and 1.8 kg/d of RSM or TRSM were 0.491 and 0.556 or 0.564 and 0.665 kg/d, respectively. The results suggest that formaldehyde treatment can effectively improve the efficiency of protein utilization of rapessed meal and cattle's performance.
피혁 제조시 발생되는 크롬을 함유한 피혁 고형폐기물인 shaving scraps의 단백질 자원화 가능성을 검토하기 위하여 알카리제로 MgO를 농도별로 처리하여 가수분해시켜 회수한 hydrolyzed protein의 특성은 다음과 같다. MgO 처리에 의한 shaving scrap의 알카리 가수분해방법에서 크롬이 불용화 되는 pH 8.0 이상을 유지하기 위해서는 MgO를 5% 이상 처리해야 하는 것으로 나타났으며, MgO 처리에 따른 alkaline condition하에서 shaving scrap의 용해도는 약 60% 수준으로서 낮았다. MgO 처리에 의해 shaving scraps으로 부터 회수한 hydrolyzed protein의 평균 분자량은 약 80~100 KD이었고, collagen protein을 구성하고 있는 glycine, alanine 및 proline이 대부분을 차지하고 있었으며, 산성 아미노산인 aspartic acid와 glutamic acid도 상당량 함유되어 있는 것으로 나타났다. 무기성분중 Mg, Ca 및 Na는 액체비료의 무기양분으로서는 다소 많은 양이 함유되어 있었으며, Cr은 약 30~40ppm으로서 원시료 (40,000~42,000ppm)에 비해 크게 감소되었다.
We investigated the safety, immunogenicity and protectivity of mix-crude outer membrane protein (cOMP) vaccine against salmonellosis in animals. The mix-cOMP vaccine was extracted from Salmonella enterica serovar Typhimurium (ST) and Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) and Salmonella enterica serovar Braenderup (SB) isolated from pigs. The mix-cOMP vaccine gave significantly higher antibody response than ST-bacterin and ST-cOMP vaccine in guinea pigs. The survival rates of mix-cOMP vaccinated groups showed significantly higher (100%) than those (0-20%) of unvaccinated control group, challenged with 3 species of Salmonella (ST, SE and SB) in mice. Vaccinated groups in pigs showed reduction of clinical signs, increase of average weight gains, decrease of bacterial recovery rates, compared with unvaccinated groups. Especially, the survival rates (100%) of vaccinated groups in chickens showed higher than that (0%) of unvaccinated group. Based on these results, we suggest that the mix-cOMP Salmonella vaccine developed in this study will be effective for the protection against Salmonellosis caused by the various serotypes Salmonella species in animals.
Thioredoxin (Trx) is a redox protein possessing conserved sequence Cys-Gly-Pro-Cys in ail organisms. Trx acts as an electron donor of many proteins including thioredoxin peroxidase (TPx). Yeast Trx 2 has two redox active cysteine residues at positions 31 and 34. To investigate the redox activity of each cysteine, we generated mutants C31S, C34S, and C31S/C34S using site directed mutagenesis and examined the redox activity of Trx variants as an electron donor for yeast TPx enzymes. None of the three Cysmutated Trx proteins was active as a redox protein in the 5', 5'-dithiobis-(2-dinitrobenzoic acid) reduction under the condition of the presence of NADPH and thioredoxin reductase, and in the thioredoxin dependent peroxidase activity of yeast TPx II. C34S enhanced the glutamine synthetase protection activity of yeast TPx I, even though 100 times more protein was needed to exhibit the same activity to WT. The formation of a mixed disulfide intermediate between Trx and TPx II subunits was analyzed by SDS-PAGE. The mixed dieter form of TPx II was found only for C34S. These results suggest that Cys-31 more effectively acts as an electron donor for TPx enzymes.
A chimeric gene encoding enhanced green fluorescent protein (EGFP) and a S-layer protein from Lactobacillus brevis KCTC3102, and/or two copies of the Fe-binding Z-domain, a synthetic analog of the B-domain of protein A, was constructed and expressed in Escherichia coli BL21(DE3). The S-layer fusion proteins produced in a 500-1 fermentor were likely to be stable in the range of pH 5 to 8 and $0^{\circ}C$ to $40^{\circ}C$. Their adhesive property enabled an easy and rapid immobilization of enzymes or antibodies on solid materials such as plastics, glass, sol-gel films, and intestinal epithelial cells. Owing to their affinity towards intestinal cells and immunoglobulin G, the S-layer fusion proteins enabled the adhesion of antibodies to human epithelial cells. In addition, feeding a mixture of the S-layer fusion proteins and antibodies against neonatal calf diarrhea (coronavirus, rotavirus, Escherichia coli, and Salmonella typhimurium) to Hanwoo calves resulted in 100% prevention of neonatal calf diarrhea syndrome (p<0.01), whereas feeding antibodies only resulted in 56% prevention.
Gingival fibroblasts(GF) and periodontal ligament fibroblasts(PDLF) are the major cellular components of periodontal soft connective tissues, but the precise molecular biological differences between these cells are not yet known. In the present study, we investigated the expression of S100A4, S100A2 calcium-binding protein and osteoblast-specific factor 2(OSF-2, Periostin) mRNA in GF and PDLF in vitro through the process of reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) and Northern blot analysis in each. Human GF and PDLF were isolated from the gingival connective tissue and the middle third of freshly extracted healthy third molars. They were cultured in Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM) containing 10% fetal bovine serum and cells in the third passage were used in the experiments. After extracting total RNA from cultured cells, RT-PCR and Northern analysis were performed using S100A4-, S100A2- and Periostin-specific oligonucleotide primers and subcloned cDNA probes in each. In PT-PCR and Northern analysis, the expression of S100A4 and Periostin mRNA in GF was slightly detectable. Interestingly, the expression of S100A4 and periostin mRNA in PDLF was much higher than that in GF. On the other hand, S100A2 mPNA was highly expressed in both GF and PDLF. Since there was a marked difference of S100A4 and Periostin expression between GF and PDLF in vitro, these data suggest that S100A4 and periostin could be used as a useful marker for distinguishing cultured gingival fibroblasts and periodontal ligament cells.
본 연구는 HRL의 3T3-L1 지방전구세포의 분화과정 중에 HRL이 지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay를 이용하여 세포 독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRL은 SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRL은 AMPKα의 활성화를 통한 지방 합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
정상 한국 어린이의 폐포자충(hewowstiscwinii)에 대한 항체보유 양상을 파악하기 위하여 횐쥐 폐포자충의 조항원을 전기영동(SDS-PAGE)하고 면역이적(Western blot)을 시행하여 각 항원 분획에 반응하는 정상 한국 어린이 혈청에서의 IgG 항체 반응을 관찰하였다 전기영동으로 분리한 수용성 항원의 단백질 분획은 20-200 kDa 범위에서 20개 정도가 관찰되었다. 이들 분획 중에서 신생아의 혈청 15개와 정상 어린이 혈청 130개 합계 145개를 면역이적법으로 검사한 결과 40-55와 116 kDa 분획과 반응하였으나 미국 양성 표준혈청이 반응한 100 kDa 분획과는 반응하지 않았다 이 중에서 40-55와 116 kDa 하나 또는 두 분획에 대한 항체 양성률은 총 40.0%이었 고. 성별 구분이 가능한 남자 50명과 여자 48명에서 각각 56%와 33.3%의 양성률을 얻었다. 이 결과로 우리 나라에서 정상 어린이가 흰쥐 폐포자충 조항원 중 40-55와 116 kDa 분획과 반응하는 항체를 혈청 내에 가지고 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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