A newly isolated active producer of raw-starch-digesting amyloytic enzymes, Rhizopus microsporus var. chinensis CICIM-CU F0088, was screened and identified by morphological characteristics and molecular phylogenetic analyses. This fungus was isolated from the soil of Chinese glue pudding mill, and produced high levels of amylolytic activity under solid-state fermentation with supplementation of starch and wheat bran. Results of thin-layer chromatography showed there are two kinds of amyloytic enzymes formed by this strain, including one $\alpha$-amylase and two glucoamylases. It was found in the electron microscope experiments that the two glucoamylases can digest raw corn starch and have an optimal temperature of $70^{\circ}C$. These results signified that amyloytic enzymes secreted by strain Rhizopus microsporus var. chinensis CICIM-CU F0088 were types of thermostable amyloytic enzymes and able to digest raw corn starch.
Sato, Vanessa Sayuri;Jorge, Joao Atilio;Oliveira, Wanderley Pereira;Souza, Claudia Regina Fernandes;Guimaraes, Luis Henrique Souza
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.2
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pp.177-187
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2014
Microbial phytases are enzymes with biotechnological interest for the feed industry. In this article, the effect of spray-drying conditions on the stability and activity of extracellular phytase produced by R. microsporus var. microsporus biofilm is described. The phytase was spray-dried in the presence of starch, corn meal (> $150{\mu}m$), soy bean meal (SB), corn meal (< $150{\mu}m$) (CM), and maltodextrin as drying adjuvants. The residual enzyme activity after drying ranged from 10.7% to 60.4%, with SB and CM standing out as stabilizing agents. Water concentration and residual enzyme activity were determined in obtained powders as a function of the drying condition. When exposed to different pH values, the SB and CM products were stable, with residual activity above 50% in the pH range from 4.5 to 8.5 for 60 min. The use of CM as drying adjuvant promoted the best retention of enzymatic activity compared with SB. Spray drying of the R. microsporus var. microsporus phytase using different drying adjuvants showed interesting results, being quite feasible with regards their biotechnological applications, especially for poultry diets.
After the previous paper, this chromosomal studies on the fungi were dealt with 17 species in genus of Rhizopus. The results are sumarized as the followings; The haploid chromosome number of 17 species were confirmed as of 6(Rh. oligosporus), 8(Rh. homothallicus, Rh. liquefaciens, Rh. shanghaiensis, Rh, acetorinus), 12(Rh. microsporus, Rh. pseudochinensis, Rh, rhizopodiformis, Rh, thermosus, and Rh. kazanensis), 14(Rh. stolonifer), and 16(Rh. suinus), respectively. Referring to the above fact and the previous paper, it is strongly presumed that the basic chromosome number of Rhizopus are 4.
To estimate genetic relationships within the genus Rhizopus, genetic variations in 20 strains were investigated by DGGE and PCR-RFLP of rDNA ITS region (ITSI, ITS2,5.8S). The size of the amplified products showed the interspecific polymorphisms, 650 bp,700 bp, and 900 bp. The DGGE approach allowed the separation of PCR amplicons of the same length according to their sequence variations. When the rDNA ITS region was digested with six restriction enzymes, 20 strains were classified into five RFLP haplotypes. The range of similarity between the 20 strains by PCR-RFLP was 42.3-100%. Based on the results of DGGE aud PCR-RFLP, the 20 strains were divided into four groups, R. oryzae, R. stolonifer, R. microsporus and R. homothallicus. Further study of R. homothallicus is required.
In this study, we analyzed the effect of storage conditions on the survival of fungi in red pepper powder. Red pepper powder was inoculated with a total of six fungal species, namely Aspergillus terreus, Aspergillus flavus, Rhizopus microsporus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, and Aspergillus ochraceus at a final cell count of 4-6 log CFU/g. After inoculating the sterilized red pepper powder with fungi, we dried the powder on a clean bench and packaged it in zipper bags. Following drying, the water activity was 0.502±0.001. Subsequently, the red pepper powder inoculated with fungi was stored at -20℃, 5℃, 15℃, and 25℃. All six species of fungi perished the quickest at 25℃ and survived for the longest (168 days) at -20℃. In summary, this study showed that fungi survive for an extended period in red pepper powder at -20℃ and 5℃ compared to 15℃ and 25℃. Therefore, to prevent fungal contamination, red pepper powder should have a water activity below 0.6 and be stored in a zipper bag at room temperature.
Two typical microbial communities from Chinese rice wine fermentation collected in Yichang city and Suzhou city in China were investigated. Both communities could ferment glutinous rice to rice wine in 2 days. The sugar and ethanol contents were 198.67 and 14.47 mg/g, respectively, for rice wine from Yichang city, and 292.50 and 12.31 mg/g, respectively, for rice wine from Suzhou city. Acetic acid and lactic acid were the most abundant organic acids. Abundant fungi and bacteria were detected in both communities by high-throughput sequencing. Saccharomycopsis fibuligera and Rhizopus oryzae were the dominant fungi in rice wine from Suzhou city, compared with R. oryzae, Wickerhamomyces anomalus, Saccharomyces cerevisiae, Mucor indicus, and Rhizopus microsporus in rice wine from Yichang city. Bacterial diversity was greater than fungal diversity in both communities. Citrobacter was the most abundant genus. Furthermore, Exiguobacterium, Aeromonas, Acinetobacter, Pseudomonas, Enterobacter, Bacillus, and Lactococcus were highly abundant in both communities.
Glyceollins, one of the inducible phytoalexins produced by plants, were induced in a number of varieties of Korean soybean through fungal infection. Of the tested soybean varieties, Tae-Kwang, though not the most productive, was found to be currently the most suitable for the induction of glyceollins. Amongst the fungal species, Rhizopus microsporus var. oligosporus was seen to be the most effective elicitor. Halved soybean seeds produced glyceollins upon fungal infection; however, chopped soybeans and homogenized soybeans did not produce significant quantities of glyceollins.
Choi, Jang Nam;Kim, So Soo;Baek, Seul Gi;Park, Jin Ju;Choi, Jung Hye;Jang, Ja Yeong;Kim, Jeom-Soon;Lee, Theresa
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.37
no.4
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pp.277-284
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2022
To investigate the occurrence of fungi in dried ginseng products, we collected 24 white and 26 red ginseng samples from the retail market. Fungi were detected in 50% and 46% of white and red ginseng samples, respectively. The average level of fungal contamination was 0.5 and 0.2 log10 CFU/g in white and red ginseng, respectively. In white ginseng, Penicillium polonicum, P. chrysogenum, and Rhizopus microsporus dominated with each having an occurrence of 18.2%. In red ginseng, Aspergillus spp. was dominant with an occurrence of 87.6%, with A. chevalieri having the highest occurrence (50%). PCR screening for mycotoxigenic potential showed that the 13 isolates of 4 species (P. polonicum, P. chrysogenum, P. melanoconidium, and A. chevalieri) tested were negative for the citrinin biosynthetic gene. These results show that the samples tested in this study had low risk of mycotoxin contamination. However, there is a possibility of dried ginseng products, such as white and red ginseng, being contaminated with fungi.
Park Hyun-Sook;Park Mee-Hyun;Kim Chi-Hwa;Woo Jeeun;Lee Jee-Yeon;Kim Sung-Uk;Choi Wonja
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2000.10a
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pp.39-45
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2000
It hab been proposed that CHS3-mediated chitin synthesis during the vegitative cell cycle is regulated by CHS4. To investigate direct protein-protein interaction between their coding products, we used yeast two hybrid system and found that a domain of Chs3p was responsible for interaction with Chs4p. This domain, termed MIRC3-4 (maximum interacting region of chs3p with chs4p), spans from 647 to 700 residues. It is well conserved among CHS3 homologs of various fungi such as Candida albicans, Emericella nidulans, Neurospora crassa, Magnaporthe grisea, Ustilago maydis, Glomus versiforme, Exophiala dermatitidis, Rhizopus microsporus. A series of mutaion in the MIRC3-4 resulted in no appearance of chitin ring at the early G 1 phase but did not affect chitin synthesis in the cell wall after cytokinesis. Absence of chitin ring could be caused either by delocalization of Chs3p to the septum or by improper interaction with Chs4p. To discriminate those two, not mutually exclusive, alternatives, mutants cells were immunostained with Chs3p-specific antibody. Some exhibited localization of chs3p to the septum, while others failed. These results indicate that simultaneous localization and activation Chs3p by Chs4p is required for chitin ring synthesis.
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