season of 2000. The disease infection usually started from flower, peduncle and young fruits, then moved to flower stalk, stem and leaves. At first, the lesions started with water-soaked, rapidly softened, and then the area gradually expanded. In severely affected film house, the rate of infected fruits reached to 28.6%. Numerous sporangiospores were formed on the diseased fruits, flower stalk, stem and leaves. Most of the sporangiospores were appeare to be rapidly dispersed in the air. The mycelia grew on the surface of host and formed stolons. Colonies on potato dextrose agar were cottony at first brownish black at maturity. Sporangia were 125.3${\times}$294.2 ${\mu}$m. globose or sub-globose with somewhat flattened base. White at first the black, many spored, and are never overhanging. Sporangiophores were 2.7-6.8${\times}$12.9-33.9 ${\mu}$m, smooth-walled, non-septate, light brown, simple, long, arising in groups of 3-5 from stolons opposite rhizoids. Sporangiophores were 8.6-21.1${\times}$6.41-1.7 ${\mu}$m, irregular, round, oval, elongate, angular and brownish-black streaked. Columella were 63.8${\times}$140.4 ${\mu}$m. brownish gray, umberella-shaped when dehisced. The causal organism was identified as Rhizopus stolonifer Lind on the basis of the morphological characteristics of the fungus. Rhizopus soft rot on squash (Cucurbita moschata) caused by the fungi has not been previously reported in Korea.
본 연구는 한국의 누룩에서 분리한 Rhizopus sp. ZB9로서 탁주 및 약주 양조에 필요한 쌀 입국을 제조할 때에 배양 온도, 배양 시간, 증미 수분 함량, 입국 두께, 교반 작업 등의 배양 조건이 입국의 프로테아제 생성에 미치는 영향을 알기위한 것이다. Rhizopus sp. ZB9를 접종하여 배양 조건을 달리하여서 쌀 입국을 제조하고, 각 입국의 프로테아제 활성도를 측정하였다. 프로테아제 생성에 적절한 온도 범위는 $28~32^{\circ}C$ 이었다. 프로테아제와 입국의 색을 고려한다면 $28^{\circ}C$에서 60시간 배양하는 것이 가장 좋았다. 증미의 수분 함량을 25%에서 35%로 높임에 따라 프로테아제 생성이 비례적으로 증가 하였다. 입국의 두께가 두꺼워지더라도 프로테아제 생성에 나쁜 영향을 나타내지 않았으며, 배양 중의 교반 작업은 프로테아제 생성에 효과적이었다.
A soft rot of fruits caused by Rhizopus stolonifer occurred on cherry tomato in Jinju City Agricultural Products Wholesale Market, Korea. The disease infection usually started from wounding after cracking of fruits. At first, the lesions started with water soaked and were rapidly softened and diseased lesion gradually expanded. The mycelia grew vigorously on the surface of fruits and formed stolons. Colonies on potato dextrose agar at $25^{\circ}C$ were white cottony at first, becoming heavily speckled by the presence of sporangia and the browinish black, and spreading rapidly by means of stolons fired at various points to the substrate by rhizoids. Sporangia were $82.7{\times}196.7{\mu}m$ in size and globose or sub-globose with somewhat flattened base. The color of sporangia was white at first and then turned black with many spores, and never overhanging. Sporangiophores were $2.6{\sim}5.8{\times}12.3{\sim}24.2{\mu}m$ in width, smooth-walled, non-septate, tight brown, simple, long, arising in groups of $3{\sim}5$ from stolons opposite rhizoids. Sporangiospores were $8.2{\sim}18.8{\mu}m$ long, irregular, round, oval, elongate, angular, and browinish-black streaked. Columella was $64.1{\times}136.3{\mu}m$. brownish gray, and umberella-shaped when dehisced. The causal organism was identified to be R. stolonifer. This is the first report of Rhizopus soft rot on cherry tomato caused by R. stolonifer in Korea.
Rhizopus oryzae CJ-2114의 polygalacturonase 생성을 위한 최적조건은 수분이 60% 함유된 밀기울 배지에 1% albumin, 0.2% (NH$_4$)$_2$C$_2$O$_4$, 1% sorbitol을 첨가하여 96시간 배양시 최대활성을 나타내었으며, Sep-hadex G-75 및 G-150을 사용한 gel filtration과 DEAE-cellulose에 의한 이온교환 크로마토그라피를 통하여 이 효소를 11.13배 정제할 수 있었고, 수율은 40.3% 였다. 정제효소는 polyacrylamide gel 전기 영동에 의하여 단일밴드로 확인되었으며 분자량은 SDS-polyacryl-amide 전기영동에 의하여 47,000정도로 측정되었다. 효소의 결정구조는 표면이 거친 기둥모양을 형성하고 있었으며 아미노산 조상은 17종류로써 glutamic acid 함량이 198.74mg/g enzyme로 가장 많았다.
한국전통누룩의 규격화 및 품질향상을 위한 일환으로 액화효소 및 당화효소, 산, 향기성분 등의 생성능이 우수한 누룩 곰팡이 10균주를 선별한 후, 약간의 효소학적 특성과 각 균주의 동정을 실시하였다. 액화력의 경우 Aspergillus sp. 및 Rhizopus sp.균주는 배양시간에 상관없이 양호하였으나, Penicillium sp.균주는 생밀기울 배지에서 30일간 배양시 액화력이 급격히 감소하였다. 또한 당화력의 경우 Rhizopus sp.을 제외한 대부분의 균주가 배양시간이 경과할수록 효소활성이 감소하는 경향을 보였으나, Aspergillus sp. 17-2, 17-6균주 및 Rhizopus sp. 18-1 균주는 배양시간이 경과할수록 높은 효소활성을 보였다. 이들 균주가 생산하는 액화효소의 반응 안정온도 범위는 20~6$0^{\circ}C$정도였으며, 반응 안정pH 범위는 3~11정도로 비교적 광범위하였으나 Penicillium sp.의 두 균주와 Rhizopus sp.균주는 산성 영역에서 낮은 활성을 나타내었다. 또한, 당화효소의 반응 최적온도는 Penicillium sp. 7-1균주가 45$^{\circ}C$, Rhizopus sp. 18-1균주가 4$0^{\circ}C$, 그 외 8균주는 5$0^{\circ}C$였으며, 반응 최적pH는 모두 5로 나타났다. Glucoamylase의 활성을 지표로 한 각 선별균주의 생전분 분해력은 전체적으로 낮은 결과를 보였다. 한편, 선별균주 가운데 효소, 향기성분, 산 생성능이 양호한 5균주 (3-6, 12-1, 17-6, 7-7, 18-1)의 동정결과, Aspergillus sp. 3-6 및 Aspergillus sp. 17-6 균주는 Aspergillus oryzae NR3-6 및 Aspergiltus oryzae NR17-6으로, Aspergillus sp. 12-1균주는 Aspergillus penicilloides NR12-1로, Penicillium sp. 7-7 균주는 Penicillium expanum NR7-7로, Rhizopus sp. 18-1균주는 Rhizopus oryzae NR18-1로 동정되었다. 종간과속간의 혼합배양을 실시하여 간이누룩의 효소 생성능을 측정한 결과, 단일배양의 경우보다 혼합배양이 우수하였다. 이와 같은 결과들을 바탕으로 다양한 혼합균주를 사용함으로써 고품질의 전통주류 생산이 가능하다고 사료된다.
가스크로마토그라프와 질량분석기 (GC-MS)를 이용하여 감마리놀렌산(GLA) 생산 균주를 선발하였다. KACC에 보존 중인 Phytophthora 속, Pythium 속 및 Mucor 속 및 Rhizopus 속 등 4속에 속하는 44개 균주를 GC-FID를 통하여 GLA를 분석하였다. 4속 39종의 곰팡이 균주에서 GLA를 확인하였으며, M. hiemalis f. sp. hiemalis KACC 40264 균주에서는 GLA의 조성비가 전체 지방산의 24.8%로서 가장 높은 비율을 나타냈다. 속간에 전체적인 GLA 함량은 Mucor 속(14.2%)과 Rhizopus 속(14.3%)의 Zygomycota가 상대적으로 높은 함량을, 그리고 Phytophthora 속(3.3%)과 Pythium 속(3.0%)의 Oomycota는 낮은 함량을 나타냄으로서 뚜렷한 양분현상을 나타냈다. 지방산총량에서도 Mucor 속(15.4 mg/100 ml)과 Rhizopus 속(7.1 mg/100 ml)가 Phytophthora 속(2.6 mg/100 ml)와 Pythium 속(4.5 mg/100 ml)보다 높게 나타나서 전체적으로 지방산을 생산하는 유용한 균류자원으로 평가되었다. Mucor 속 내에서도 계통별로 큰 차이를 나타냈는데 18.2%의 GLA를 생성함으로 지방산총량이 50.8 mg/100 ml까지 이른 Mucor blumbeus KACC 40935가 실제적으로 가장 활력이 좋은 균주로 평가되었다.
2008년 4월 진주시 농산물도매시장에 유통 판매중인 딸기에서 이상증상이 발생하였다. 병징은 과실표면에 상처 부위가 수침상으로 물러지면서 빠르게 부패되었다. 균총은 처음 흰색에서 연한 갈색으로 되고 검은색의 포자낭을 많이 형성하였으며 균사생육 적온은 $30^{\circ}C$이었다. 포자낭은 검은색으로 구형 또는 반구형이며 크기는 $82{\sim}195{\mu}m$이었다. 포자낭경은 처음 흰색에서 연한 회색을 나타내며 폭은 $12{\sim}24{\mu}m$이었다. 주축은 반구형이며 크기는 $68{\sim}92{\mu}m$ 이었다. 포자낭포자는 담갈색으로 단포이며 구형 또는 타원형이고 불규칙한 것도 있으며 크기는 $9{\sim}20\;{\times}\;7{\sim}8{\mu}m$이었다. PDA배지에 배양할 경우 포복균사를 형성하는데 접촉부위에 뿌리모양의 가근을 형성하였다. 이상과 같이 딸기 과실에 발생한 병징과 병원균의 균학적 특징 및 병원성을 검정한 결과, 본 병해를 Rhizopus stolonifer에 의한 딸기 무름병으로 보고한다.
식품가공이나 유기산 생산공업 등에 널리 사용되는 Rhizopus oryzae를 대상으로 하여 균체생산을 목적으로 각종 유기산, alcohol, aromatic 화합물과 당류 등의 탄소원들을 조사한 바 Na-acetate가 1% 이하의 농도에서는 glucose와 마찬가지의 좋은 탄소원으로서는 ammonium태나 질산태질소 그리고 유기질소 화합물 모두 대체로 같은 정도로 잘 이용될 수 있음을 알았으며 무기질소태질소 중에서 (NH$_4$)$_2$SO$_4$가 그중 가장 좋은 질소원으로 사용되었다. 이 Rhizopus oryzae는 또 yeast extract와 같은 미량영양원소를 요구하지 않았으므로 최종적으로 다음과 같은 조성의 배지로 배양하였다. Na-acetate 1 %, (NH$_4$)$_2$SO$_4$ 0.2%, $K_2$HPO$_4$ 0.05%, MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.01%, NaCl 0.01% (PH 5.5)의 배지상에서 생육한 균사체를 Strepzyme 115-5를 사용하여 견고한 세포벽을 제거하는 실험에서 pH 6.5와 온도 5$0^{\circ}C$에서 최적조건을 나타내었다. 이 때 세포벽 제거에 따른 protoplast의 생성은 효소 처리 10분후부터 나타나기 시작하여 처리 4시간 후에는 거의 모든 균사체가 작용받았음을 알았다.
쌀 전분을 이용하여 무증자 당화 발효법으로 쌀 탁주를 제조하였으며 증자 당화 발효법에 의한 종래적인 방법과 비교하였다. Rhizopus속 균주를 증자하지 않은 생쌀에 접종하여 통상적인 방법에 따라 koji를 제조하여 사용하였으며 원료미를 분쇄해여 증자하지 않은 상태로 발효하였다. 무증자 당화 발효의 경우 종래적 방법에 의한 발효의 경우보다는 최종 alcohol 함량이 pH 1.8 높았고 유기산 생성이 급격히 이루어져 별도의 pH 조정이 필요없었다. 효모의 숫자는 차이가 없었고 세균은 무증자의 경우 2단 사입 후 24시간 까지는 증자의 경우보다 많다가 발효가 종료될 시점에서는 비슷하였다. 발효가 끝난후 제성주로 하였을 때 무증자의 경우는 fusel oil 함량은 증자의 경우보다 적었고 아미노산 함량은 약 2배로 높았으며 원료미에서 유래된 생취(raw flavor)가 유지되었다.
A Nuluk, a Korean traditional koji for brewing, was made with wheat flour and Rhizopus japonicus T2 which had a good aroma and strong abilities in producing saccharogenic and proteolytic enzymes, and cultural conditions for the production of those two enzymes were tested. The productivity of saccharogenic enzyme was markedly improved when Nuluk was made with unsteamed wheat flour as compared with that with steamed one, but that of acid protease was reduced. The addition of water containing 0.5% hydrochloric acid was unfavorable for the production of saccharogenic enzyme and neutral protease. The optimum ratio of water added to wheat flour for the production of saccharogenic enzyme and proteolytic enzyme was 28% on the basis of wheat flour. The productivity of saccharogenic enzyme was enhanced "when the Nuluk was molded after 10~20 hours precultivation but that of proteolytic enzyme was reduced as compared with no molding. The optimum temperature for the production of saccharogenic enzyme was 28f and that of proteolyic enzyme was also 28$^{\circ}C$. The optimum cultural time for the production of saccharogenic enzyme was 36 ~72 hours at 3$0^{\circ}C$ and that of proteolytic enzyme was 36 hours.ours.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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