(R)-JG-381, a R form of alkylglycidic acid derivative, was examined for mutagenicity in the reverse mutation test on bacteria, chromosomal aberration test on cultured mammalian cells and micronucleus test in mice. In the reverse mutation test on bacteria using Salmonella typhimurium strain TA98, TA100, TA102, TA1535, TA1537 with or without a metabolic activation system (S9 mix), (R)-JG-381 did not affect the revertant colonies but significantly increased revertant colonies in one test strain, TA98, compared with the vehicle control. In the chromosomal aberration (CA) test using cultured Chinese Hamster Lung fibroblast(CHL) cells, the number of aberrant cells was clot increased in the presence or absence of 59 mix at concentration of the (R)-JG-381 0.025 $\mu$l/m1 to 0.1 $\mu$l/m1, compared with vehicle control. In the micronucleus (MN) test, micronucleated polychromatic erythrocytes in the (R)-JG-381-treated mice were not different from those of the vehicle-treated mice.
본 연구에서는 4종류의 상이한 생물 검정법(유전자 재조합 균주 RB1436 발광 활성, 4종 씨앗 발아, Bacillus lichemiformis의 ${\alpha}$-glucosidase 효소 활성, Salmonella typhimurium이용한 Ames test)을 이용하여 비소 화합물의 독성을 평가하였다. 검정법에 따라 상이한 민감도를 보였지만, 전체적으로 As(III)가 As(V)보다 높은 독성을 나타내었다. 씨앗 4종의 발아에 대한 민감도는 씨앗에 따라 상이하게 조사되었다. 상추(Lactucus)와 알타리무(Raphanus) 씨앗종이 대체적으로 높은 민감도를 보였으며 검정법에 적절한 씨앗종으로 조사되었다. 유전자 변이 검정법에서는 As(III)에 대해서는 1 mg/L 농도에서 TA 98 균주는 높은 복귀돌연변이 현상(MR = 5.1)이 조사되어, 높은 발암 가능성을 나타내었다. 비소화합물에 대해서 방법별 민감도는 일반적으로 효소 이외에는 높은 민감도를 나타내었다. 다양한 급성 독성 생물 검정법에 대한 통합 자료는 향후 오염원에 대한 독성 생물 평가에 유용하게 사용할 수 있을 것이다.
Objectives: This study aimed to evaluate the toxicity of CP pharmacopunture using bacterial reverse mutation test. Methods: To determine the mutagenic potential of CP pharmacopunture, histidine requiring Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and tryptophan requiring Escherichia coli (WP2uvrA, pKM101) strains were used. The negative (normal saline solution) and positive (Sodium azide, 2-Nitrofluorene, 2-Aminoanthracene, 9-Aminoacridine, and 4-Nitroquinoline N-oxide) control groups were used. To determine the dose levels of the main study, a dose range-finding study was conducted. Results: As a results of the dose range-finding study, the growth inhibition by CP pharmacopunture was not evident at any dose levels in the absence and presence of metabolic activation. As a results of the main study, the mean number of revertant colonies was less than twice when compared to the negative control values at all dose levels of the CP pharmacopuncture in the presence and absence of metabolic activation, showing no dose-related increase. In the positive control group, the number of revertant colonies was markedly increased by more than twice when compared to the negative control group. Conclusion: According to the results of this study, CP pharmacopunture did not show any signs of mutagenic potential.
Objectives : We investigated genetic toxicity of HMCO5 using the Micronucleus Test in bone marrow cells of mice and Bacterial Reverse Mutation Assay in plate incorporation method according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines. Methods : 1. Micronucleus test: The male rats were divided into 5 groups, respectively; G(1), treated with distilled water: G(2), treated with 1250mg/kg HMC05: G(3), treated with 2500mg/kg HMC05, G(4), treated with 5,000mg/kg HMC05; G(5), treated with Cyclophosphamide $H_2O$. Sterilized distilled water and HMC05 were administered for two consecutive days. Cyclophosphamide $H_2O$ was administered once on the day of 2nd administration. 2. Bacterial Reverse Mutation Aassay: Experimental groups were divided into two groups: with S-9mix(+S) or without S-9mix(-S). Each group treated with sterilized distilled water only, HMCO5(62, 185, 556, 1,667, $5,000{\mu}g$/plate) and, positive vehicles(Sodium azide, 2-Aminoanthracene, 4-Nitroquinoline N-oxide, ICR 191), respectively. Results : HMC05 did not show any changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes(MNPCE) among 200 polychromatic erythrocytes compare to negative control. However, there were significant (p<0.01) increase with CPA in MNPCE. In Bacterial Reverse Mutation Aassay, no significant increases in the number of revertant colonies compared to (삭제) negative control were detected in all concentrations of HMC05. Conclusions : These results indicate that HMC05 did not show any genotoxicity against in Micronucleus test and Bacterial Reverse Mutation Aassay.
SU-Eohyeol pharmacopuncture(SUEP) was developed by adding Cervi Pantotrichum Cornu to Jungsongouhyul pharmacopuncture. This genotoxicity evaluation was performed to evaluate the mutagenic potential of the test substance SUEP agent using histidine, which requires strains of Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535, TA1537), and tryptophan, which requires Escherichia coli (WP2uvrA) strain in the presence and absence of metabolic activation. According to the results of the dose range finding study conducted prior to the main study, the dose levels of the test substance in the main study were determined as 100, 50, 25, 12.5, 6.25%, and positive and negative controls were established. As a result of the main study, the mean number of revertant colonies compared to negative controls was less than 2-fold at all dose levels of SUEP in all strains with and without metabolic activation. In the positive control group, the mean number of revertant colonies for each strain was markedly increased by more than two times compared to the negative control group. Based on the result of this study, the test substance, SUEP did not show any indication of mutagenic potential under the conditions of this study.
Objectives: The objective of this study was to assess the genotoxicity of a no-pain pharmacopuncture (NPP) extract developed in 2022 using a bacterial reverse mutation assay, aiming to further substantiate the safety profile of NPP. Methods: The genotoxicity evaluation involved a bacterial reverse mutation assay to assess the mutagenic potential of NPP extracts with and without metabolic activation. Histidine-requiring Salmonella typhimurium strains (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and tryptophan-requiring Escherichia coli strains (WP2uvrA) were used in the assay. Results: The NPP extract did not induce a revertant colony count exceeding two times that of the negative control at any dose level in any of the tested strains, both with and without metabolic activation. Additionally, no growth inhibition or precipitation was observed in the presence of NPP. Conclusion: Based on the findings, it can be concluded that the NPP extract exhibited no mutagenic potential in the in vitro genotoxicity tests conducted.
리보스에 대한 화학주성이 결핍되고 리보스 결합 단백칠의 수송 결핍으로 전구체 만백칠이 셔1포젤내에 축적된 rbsB 103 선호 배열 돌연변이에 대해서는 이미 보고한 바 있다(Iida et ai., 1985). 본고에서는 이 변이주로부터 리보스 화학주생이 정상인 복 귀변이주를 분리하여 분석한 결과를 보고하는 바, 이 복귀변이주에서 분리한 mini cell에서 숙성 단백질이 합성되고 이 복귀변이가 리보스 결합 단백질의 구조유전자의 아미노말단을 코딩하는 부위에 일어났음을 보였다 DNA 염기서열 분석에 의해 원래 rbsB 103 선호애열 변이 이외에 또 하냐의 변이가 일어나서 원래 돌연변이형을 상쇄한 pseudorevertant임을 확인하였다. 나아가 삼투압 충격분석으로 복귀변이주에서 합성된 숙성 리보스 결합 단백질이 페라플러슴으로 수송되었음을 보였다. 야생형에서 합성된 전구체, 숙성 리보스 결합 단백질과 복귀변이주에서 합성된 29, 32 kd 단백질의 펩티드 패턴을 H. P. L. C . 로 조사하여 그 관련성을 확인하였으며, 전구체에 고유한 두 펩티드가 돌연변이주의 경우와 비교하여 복귀변이주에서 소수성이 더 큰 것을 확인하였다. 야생형과 복귀변이주에서 합성된 전구체 단백질의 생체내 신호배열 절단속도플 비교한 결과 복귀변이주에서 그 속도가 더 느림을 알 수 있었다. 그러나 야생형과 복귀변이주에서 숙성단백질을 순수 분리정제하여 아미노산말단 아미노산 배열을 분석한 결과 복귀변이주의 신호배열내에 야생형과 다른 두 아미노산의 존재에도 불구하고 절단부위에는 변화가 오지 않음을 보였다.
Salmonella typhimurium LT-2의 histididine auxotroph 중 base substitute mutant인 TA 1535와 TA100, 그리고 frame-shiftmutant인 TA 1538과 TA 98을 각각 사용하였고 microsomal enayme activation system을 병용하여 국내 사용농약 20종에 대한 돌연변이 유발성을 검하였다. 이중 다음 4종의 농약이 양성 및 의양성의 유발성을 나타냈다. (1) Captan은 강력한 돌연변이 유발성질로서 TA1535, TA100 및 TA98에 대해 직접적으로 10$\mu\textrm{g}$/plate의 농도에서 plate당 각각 205, 1012, 그리고 297의 돌연변이 균종의 출현을 나타냈으며 microsomal enzyme activation에 의해 그 유발능력이 약간 감소되는 경향을 보였다. (2) Micut는 TA100에 대해 직접적으로 10mg/plate의 농도에서 55 revertant 정도의 미비한 돌연변이 유발성을 나타냈다. (3) Dimethoate는 TA100에서 역시 직접성으로 처리가능 최고농도인 0.2λ/plate에서 55 revertant/plate 정도의 징약한 돌연변이 유발성을 바타냈다. (4) Triforing도 역시 TA 100에서 직접적으로 10mg/plate로 처리된 농도에서 78 revertant/plate정도의 약한 돌연변이 유발성을 나타했다.
The genotoxicity of water extract of Bojungikkeehapdaechilki-tang was tested by In Vitro Chromosome Aberration Test. Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test according to OECD Guidelines and KFDA Guidelines. The obtained results were as follows : 1. Chromosome Aberration Test: In Vitro Chromosome Aberration Test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was carried out using cultured Chinese hamster lung cells in the presence and absence of metabolic activation system(S-9 mix). No significant changes in the number of aberrant metaphases having structural and number of aberrations were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. 2. Bacterial Reveres Mutation Assay: Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts was evaluated for its potential to induce reverse mutation in the histidine auxotroph strains of Salmonella typhimurium such as TA100, TA1535, TA98 and TAl537 and the tryptophan auxotroph strain of Escherichia coli WP2 uvrA. No significant changes in the number of revertant colonies compared to its negative control were detected in Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups against all 5 strains. 3. Micronucleus test: Micronucleus test of Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts were performed using specific pathogen free 7-week old male ICR mouse. No significant changes in the number of micronucleated polychromatic erythrocytes among 2000 polychromatic erythrocytes compared to negative control were detected in all Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts treated groups. In summarized above-mentioned results, it is concluded that Bojungikkeehapdaechilki-tang extracts have not genotoxicity against In Vitro Chromosome Aberration Test, Bacterial Reverse Mutation Assay and Micronucleus test.
We isolated phenotypic suppressors of an absB (antibiotics synthesis suppression) strain. In the absB colonies, all four antibiotics including two pigmented antibiotics were blocked so that no pigmentation could be found. We assumed that in the colonies with the wuppressive(or reversive) mutation, both pigmentation would be restored so that the strains with suppressive mutation could be cisually detected. Harvested absB spores were treated with chemical mutagen along with electric shock, and were spread on specially fromulated minimal medium plates. The pigmented colonies were isolated from the unpigmented majorities. In one candidate strain, the restoration and significant overproduction of actinorhodin and undecylprodigiosin were recognized. In three other candidate strains, the overproduction of actinorhodin and restoraion of undecylprodigiosin were observed. The production of the two unpigmented antibiotics (CDA and methylenomycin) were visualized in the tested candidate strains. The strains with wuppressive mutations would be very useful in dlucidating the regulation network of antiviotics synthesis and overproduction of the antibiotics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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