To investigate effects of starvation on physiological changes, stress response, and survival of cobitid loach (Misgurnus anguillicaudatus) exposed to sodium nitrite (NaNO2), a 4-week experiment was conducted. Fewer fish survived in the starved group than those in the fed group during the experiment. Starvation resulted in growth retardation, leading to differences in body length and body depth between fed and starved groups. The fed gorup continued to grow and remained in good condition. Blood chemical analysis (plasma cortisol and glucose) showed significant differences in stress response to nitrite exposure between fed and starved groups (p < 0.05). These results suggest that all parameters employed in this study to assess effects of starvation with NaNO2 stress are useful information for researching nutritional status in cobitid loach.
Plasmid pGKV21 contains a 229-nucleotide (nt) single-strand DNA initiation (ssi) signal. Using asymmetric PCR, we prepared a small single-stranded (ss) DNA fragment of the ssi signal and, using the 229-nt ssDNA fragment, determined the requirements of RNA polymerase for priming and DNA-protein interaction. The ssi fragment prepared was able to generate primer RNAs with almost the same efficiency as the $M13{\Delta}lac182/229$ phage DNA. However, the cssi (complementary strand of the ssi signal) fragment could not synthesize primer RNAs. This result suggests that the 229-nt ssi signal functions in a strand specific manner. Gel retardation and DNase I footprinting demonstrated that the synthesized ssi fragment could interact with both E. coli RNA polymerase and SSB protein to synthesize primer RNA. In Escherichia coli [pWVAp], an addition of rifampicin resulted in an accumulation of ssDNA, indicating that the host-encoded RNA polymerase is involved in the conversion of ssDNA to double-stranded plasmid DNA.
A cDNA that was rapidly induced upon abscisic acid, cold, drought, mechanical wounding and to a lesser extent, by high salinity treatment, was isolated from Arabidopsis seedlings. It was classified as DREB subfamily member based on multiple sequence alignment and phylogenetic characterization. Since it encoded a protein with a typical ERF/AP2 DNA-binding domain and was closely related to the TINY gene, we named it TINY2. Gel retardation assay revealed that TINY2 was able to form a specific complex with the previously characterized DRE element while showed only residual affinity to the GCC box. When fused to the GAL4 DNA-binding domain, either full-length or its C-terminus functioned effectively as a trans-activator in the yeast one-hybrid assay while its N-terminus was completely inactive. Our data indicate that TINY2 could be a new member of the AP2/EREBP transcription factor family involved in activation of down-stream genes in response to environmental stress.
Urodeles including newt and salamander have remarkable regenerative capacity during the postembryonic life span. Some of the unique features are the formation of the well-developed wound epidermis and the active dedifferentiation process in the early phase of regeneration. These are regarded as key events for the successful regeneration since no further regenerative activity is possible without them. In this study, we investigated the role of retinoic acid (RA) in salamander limb regeneration by blocking RA synthesis using disulfiram, an inhibitor of aldehyde dehydrogenase that oxidizes retinal to RA. Disulfiram treatment resulted in delaying the limb regeneration processes via inhibition of wound epidermis formation and dedifferentiation process. When RA was administered after disulfiram treatment, the inhibitory effect of disulfiram was rescued. In addition, disulfiram treatment after the dedifferentiation stage resulted in the mild retardation of limb regeneration, suggesting that RA might also be involved in the blastema outgrowth. Furthermore, salamander MMP-9 gene expression was also inhibited by disulfiram treatment. Collectively, our findings indicate that endogenous RA may play an important role(s) in the early phase of limb regeneration by regulating the expression of molecules responsible for the modification of intracellular and extracellular environment during salamander limb regeneration.
The most common genetic disorder Down syndrome (DS) displays various developmental defects including mental retardation, learning and memory deficit, the early onset of Alzheimer's disease (AD), congenital heart disease, and craniofacial abnormalities. Those characteristics result from the extra-genes located in the specific region called 'Down syndrome critical region (DSCR)' in human chromosome 21. In this review, we summarized the recent findings of the DYRK1A and RCAN1 genes, which are located on DSCR and thought to be closely associated with the typical features of DS patients, and their implication to the pathogenesis of neural defects in DS. DYRK1A phosphorylates several transcriptional factors, such as CREB and NFAT, endocytic complex proteins, and AD-linked gene products. Meanwhile, RCAN1 is an endogenous inhibitor of calcineurin A, and its unbalanced activity is thought to cause major neuronal and/or non-neuronal malfunction in DS and AD. Interestingly, they both contribute to the learning and memory deficit, altered synaptic plasticity, impaired cell cycle regulation, and AD-like neuropathology in DS. By understanding their biochemical, functional and physiological roles, we hope to get important molecular basis of DS pathology, which would consequently lead to the basis to develop the possible therapeutic tools for the neural defects in DS.
Rubbed films of a series of poly(p-phenylene 3,6-bis(4-(n-alkyloxy)phenyloxy)pyromellitimide)s (Cn-PMDA-PDA PIs), which are well-defined brush PIs composed of two aromatic-aliphatic bristles per repeat unit of a fully rodlike backbone, were investigated in detail using atomic force microscopy (AFM), optical retardation analysis and linearly polarized infrared (IR) spectroscopy in order to elucidate their surface morphology and molecular orientation. The liquid crystal (LC) alignment behavior and the anchoring energy of LC molecules on the rubbed films were also determined.
The understanding and appllication of fatigue crack propagation mechanism in variable amplitude loading is very important for life prediction of the air travel structures. Particularly, the retardation and arrest behavior of fatigue crack propagation by single tension overloading is essential to the understanding and appllication of fatigue crack propagation mechanism in variable amplitude loading. Numerous studies of the retardation behavior have been performed, however investigations of the arrest behavior have not been enough yet. As for the arrest behavior, Willenborg had reported that the overload shut-off ratio $[R_{so}=(K_{OL})/K_{max})_{crack arrest}]$ had been the material constant, but recently several investigators have reported that the overload shut-off ratio depends upon the stress ratio. In this study, authors have investigated the effect of stress ratio on the threshold overload shut-off ratio to generate arrest of fatigue crack growth in high tensile aluminum alloy 7075-T735 which have used in material for air travel structures, It has been $-0.4\leqqR\leqq0.4$ till
now, the region of stress ratio investigated. The threshold overload shut-off ratio has decreased as stress ratio has increased in overall region of -$-0.4\leqqR\leqq0.4$ and the linearity has been seen in this material. Moreover, the experimental equation between $R_{so}$ and R has been made; The relation has been $R_{so}=-R+2.6$.
This study was carried out to select most efficient bonding methods of geogrid at the interface of old concrete pavement before placing asphalt overlay layer for reflection cracking retardation. Three bonding methods, a RSC-4 emulsified asphalt, a compound and an unsaturated polyester resin (UPR) were compared in this study. Three types of asphalt mixture (AC 60-80, RLDPE 8%, PG 76-22) and a dense-graded aggregate were used for overlay asphalt pavement. A reinforcing material which consists of a woven fabric underneath a glass fiber grid was used. An expedite test method which is for simulating mixed mode (mode I and II) fracture test was performed using a wheel tracker in laboratory. Cracking development by load repetition was measured as fatigue life (number of load cycle) and expansion of specimen body were measured for each test specimen. The results showed that UPR was the best and RSC-4 the next. But considering field applicability, RSC-4 was considered as an appropriate choice for bonding reinforcing material.
The measurement of many biochemical changes that could be appeared as aging will be resulted in the very useful and basal marker to maintain healthy life and to predict the health condition and the retardation of the aging. We classified the geriatrics into the normal and same aged dementia on the based of clinical diagnostic as well as MMSE evaluation. And then we were collected blood samples from both groups and examined 13 biochemical assays to screen any valuable biochemical index for dementia. Among 13 assays, several assay data showed the statistically significant differences between two groups. The values of serum albumin, APase, and GOT were significantly decreased in demented group compared to control. On the other hand, the values of glucose and LDH were increased in dementia compared to control. Additionally, the value of Pi was increased but the values of calcium and GPT were decreased, without significant difference (p>0.05). The values of other assays such as bilirubin, BUN, cholesterol, creatinine and total protein did not show any statistically significant differences. Conclusively it may be suggested that dementia might be resulted in the variable biochemical changes which could be affected by many environmental factors as well as dementia itself.
We report here a first evaluation of chilling-responsive gene regulation in the sweetpotato. The growth of sweetpotato plants was severely retarded at $12^{\circ}C$; the lengths of the leaf, petiole, and root were markedly reduced and microscopic observation revealed that the elongation growth of the epidermal cells in each of these organs was significantly reduced. We examined the transcriptional regulation of three sweetpotato expansin genes (IbEXP1, IbEXP2 and IbEXPL1) in response to various chilling temperatures (12, 16, 22, and $28^{\circ}C$). In the leaf and petiole, the highest transcript levels were those of IbEXP1 at $28^{\circ}C$, whereas IbEXPL1 transcript levels were highest in the root. IbEXP1 mRNA levels in the $12^{\circ}C-treated$ petiole showed a fluctuating pattern (transient decrease-recovery-stable decrease) for 48 h. In the leaf and petiole, IbEXP1 and IbEXPL1 exhibited a similar response to chilling in that their mRNA levels decreased at $22^{\circ}C$, increased at $16^{\circ}C$, and decreased dramatically at $12^{\circ}C$. In contrast, mRNA levels of IbEXP2 in the leaf fell gradually as the temperature fell from 28 to $12^{\circ}C$, while they remained unaltered in the petiole. In the root, mRNA levels of IbEXPL1 and IbEXP1 reached maximum levels at $16^{\circ}C$, and decreased significantly at $12^{\circ}C$. These data demonstrated that expression of these three expansin genes was ultimately down-regulated at $12^{\circ}C$; however, transcriptional regulation of each expansin gene exhibited its own distinctive pattern in response to various chilling temperatures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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