Influenza A virus (IAV) is the most widespread pathogen causing human respiratory infections. Although polymerase chain reaction (PCR)-based methods are currently the most commonly used tools for IAV detection, PCR is not ideal for point-of-care testing. In this study, we aimed to develop a more rapid and sensitive method than PCR-based tools to detect IAV using loop-mediated isothermal amplification (LAMP) technology. We designed reverse-transcriptional (RT)-LAMP primers targeting the hemagglutinin gene. RNAs from reference H1N1 and H3N2 showed specific RT-LAMP signals with the designed primers. We optimized the reaction conditions and developed universal reaction conditions for both LAMP assays. Under these conditions, the detection limit was 50 copies for both RT-LAMP assays. There was no non-specific signal to 19 non-IAV respiratory viruses, such as influenza B virus, coronaviruses, and respiratory syncytial viruses. Regarding the reaction time, a positive signal was detected within 25 min after starting the reaction. In conclusion, our RT-LAMP assay has high sensitivity and specificity for the detection of the H1 and H3 subtypes, making it suitable for point-of-care IAV testing.
Park, Sue-Kyung;Kim, Jee-Hee;Lee, Joo-Yeon;Na, Byoung-Kuk;Kim, Woo-Joo;Cheong, Hae-Kwan
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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v.34
no.2
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pp.131-140
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2001
Objectives : During March-May, 2000, a measles outbreak occurred at Youngduk, Korea. This county is divided into two areas with different historical and socioeconomic background. The outbreak occurred in one of these areas. We conducted a comparative epidemiologic study on the two areas in order to evaluate the factors related to the epidemic. Materials and Methods : We selected two groups, grades 3 and 5 in a primary schools in each area. We investigated outbreak-related factors using parent-questionnaires, the vaccination history from the student's health record and the records concerning the recent measles-outbreak from the local health center. Serologic test on measles-IgG and -IgM antibody was done. Results : The infection rate was 31.5% for the epidemic area and 3.7% for non-the epidemic area according to clinical or serological criteria (p<0.001). No difference was seen in the measles vaccination rate, residence at the time of vaccination or past measles infection history between the two areas. In the epidemic area, the attack rate for the 4-6 year-old MMR booster group(20.5%) was higher than the non-booster group(32.4%), but was not found significantly. Vaccine efficacy was 29.6% in the epidemic area and 87.0% in the non-epidemic area (p<0.001). The IgG level and positive rate were significantly different between the two areas (median 10727 IU/ml, 98.9% in epidemic area; median 346 IU/ml, 85.9% in the non-epidemic area, p<0.001). However, the IgG level and positive rate between the measles-cases and non-cases were not significantly different. Conclusions : This outbreak took place in mostly vaccinated children. These results suggest that a reduction of herd immunity for immunity failure after vaccination may be one of the feasible factors related to the outbreak pattern in the two areas. The results of the IgG level and positive rate suggest that re-establishment of a normal value for IgG level and of a qualitative method for IgG are needed.
Human respiratory syncytial virus (HRSV) is a major cause of upper and lower respiratory tract illness in infants and young children worldwide. Despite its importance as a respiratory pathogen, there is currently no licensed vaccine for prophylaxis of HRSV infection. There are several hurdles complicating the development of a RSV vaccine: 1) incomplete immunity to natural RSV infection leading to frequent re-infection, 2) immature immune system and maternal antibodies of newborn infants who are the primary subject population, and 3) imbalanced Th2-biased immune responses to certain vaccine candidates leading to exacerbated pulmonary disease. After the failure of an initial trial featuring formalin-inactivated virus as a RSV vaccine, more careful and deliberate efforts have been made towards the development of safe and effective RSV vaccines without vaccine-enhanced disease. A wide array of RSV vaccine strategies is being developed, including live-attenuated viruses, protein subunit-based, and vector-based candidates. Though licensed vaccines remain to be developed, our great efforts will lead us to reach the goal of attaining safe and effective RSV vaccines in the near future.
Respiratory syncytial virus (RSV) typically causes lower respiratory tract infections in children, and most patients recover successfully. However, some infants and young children can have a severe course of disease with respiratory failure, and extrapulmonary manifestations can occur in severe RSV disease. We report one case of severe RSV bronchiolitis complicated with acute myocarditis, fulminant hepatic failure, and disseminated intravascular coagulation.
Park, In Ho;Lee, Su Ho;You, Sung Taek;Choi, Du Young
Pediatric Infection and Vaccine
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v.20
no.3
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pp.178-185
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2013
Objective: Cytopenia is a common hematologic complication of viral infections. However, information regarding hematologic effects of common respiratory virus infections is scarce. This study aimed to evaluate hematologic complications and the clinical course of patients infected with common respiratory viruses. Methods: We retrospectively analyzed 496 patients with respiratory tract infections admitted to the Department of Pediatrics, Wonkwang University Hospital from November 2011 to March 2012 using multiplex real-time polymerase chain reaction to detect the presence of respiratory viruses and hematologic abnormalities. Results: Respiratory viruses were identified in 379 patients. Respiratory syncytial virus (RSV) was most frequently detected (55.7%), followed by influenza A (Flu-A, 23.0%). Further, cytopenia was observed in 35.5% of RSV-infected patients, 25.0% of Flu-A-infected patients, and 34% of patients infected by other viruses. Each virus caused a decrease in 3 blood cell component values, which corresponded with cytopenia frequency. Of the 379 infected patients, 83 had anemia ($9.71{\pm}1.09g/dL$); 46 had neutropenia ($803.70{\pm}263.09cells/mm^3$); and 23 had transient thrombocytopenia ($142,434.78{\pm}86,835.18cells/mm^3$). However, no patient required treatment. A comparison of clinical characteristics between RSV- and Flu-A-positive patients with anemia revealed that RSV-infected patients had significantly longer duration of hospitalization. RSV was detected more commonly in young neutropenic patients, who had a shorter duration of fever. Conclusions: Our findings suggest that infections, particularly RSV and Flu-A, result in varying degrees of cytopenia, which usually improves without treatment and does not affect the clinical course of the infection.
Yang, Mi Hwa;Park, Chan Sook;Yoon, So Young;Kim, Jae Youn;Ahn, Don Hee
Pediatric Infection and Vaccine
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v.9
no.2
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pp.201-207
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2002
Purpose : We analyzed clinical features and causal viruses of acute lower respiratory tract infections(LRTIs) in order to improve the management of these infections. Methods : From end of April to early May 2001, amongst 30 children at a local institute for children's adoption and welfare, 13 were admitted to the hospital with the diagnostic impression of acute LRTIs. Nasopharyngeal aspirates were sent in Seoul National University Hospital for viral culture of respiratory syncytial virus(RSV), adenovirus, parainfluenza virus. Results : One or more viral agents were identified in 4 cases(30.7%) : were RSV(15.4%), adenovirus(7.7%), and a mix of these two viruses(7.7%). Initial symptoms were fever(69%), cough(100%), tachypnea(54%), chest retraction(69%), rale(85%) and wheezing(15%). Leukocytosis was noted in 23%, CRP increased more than 10 mg/L in 46%. Chest X-ray abnormalities were 69%. Conclusion : Although viruses were identified in 30.7%, further studies should be made for prevention and treatment of acute viral LRTIs.
The prevalence of potentially xenozoonotic viruses in the reproductive tract of female pigs in Korea was investigated by polymerase chain reaction (PCR). These viruses include porcine endogenous retrovirus (PERV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), swine hepatitis E virus (SHEV), porcine lymphotropic herpesvirus (PLHV), and porcine circovirus type 2 (PCV-2). Histopathological examination and PCR analysis were conducted using the ovaries of 70 slaughtered pigs that were collected from 14 farms in Jeju. Histopathologically, infiltrations of mononuclear inflammatory cells around the thick-walled coiled vessels in the ovarian medulla were observed in 15 cases. Based on the PCR method, PERV, PLHV, PRRSV, SHEV, and PCV-2 were detected in 69 (98.6%), 35 (50%), 5 (7.1%), 4 (5.7%), and 1 sample (1.4%), respectively. These results suggest that PERV and PLHV are the major xenozoonotic viruses in the porcine ovary. This study should aid in the development of a monitoring protocol for potential xenozoonotic agents and in the production of germ-free pigs for xenotransplantation.
Background: Bacterial pneumonia occurring after respiratory viral infection is common. However, the predominant bacterial species causing pneumonia secondary to respiratory viral infections other than influenza remain unknown. The purpose of this study was to know whether the pathogens causing post-viral bacterial pneumonia vary according to the type of respiratory virus. Methods: Study subjects were 5,298 patients, who underwent multiplex real-time polymerase chain reaction for simultaneous detection of respiratory viruses, among who visited the emergency department or outpatient clinic with respiratory symptoms at Ulsan University Hospital between April 2013 and March 2016. The patients' medical records were retrospectively reviewed. Results: A total of 251 clinically significant bacteria were identified in 233 patients with post-viral bacterial pneumonia. Mycoplasma pneumoniae was the most frequent bacterium in patients aged <16 years, regardless of the preceding virus type (p=0.630). In patients aged ${\geq}16years$, the isolated bacteria varied according to the preceding virus type. The major results were as follows (p<0.001): pneumonia in patients with influenza virus (type A/B), rhinovirus, and human metapneumovirus infections was caused by similar bacteria, and the findings indicated that Staphylococcus aureus pneumonia was very common in these patients. In contrast, coronavirus, parainfluenza virus, and respiratory syncytial virus infections were associated with pneumonia caused by gram-negative bacteria. Conclusion: The pathogens causing post-viral bacterial pneumonia vary according to the type of preceding respiratory virus. This information could help in selecting empirical antibiotics in patients with post-viral pneumonia.
Purpose : Acute respiratory tract infections are the most common illnesses in children. The great majority of these infections involving lower respiratory tracts infections(LRTI) are caused by respiratory viruses such as respiratory syncytial virus(RSV), parainfluenza virus (PIV), influenza virus(INF), adenovirus(ADV), etc. Our purpose of this study was to examine the seasonal occurrence, clinical and laboratory features of each viral infections. Methods : Nasopharyngeal aspirates(NPA) were collected from 913 hospitalized children on the first day of admission. They were all admitted to Hangang Sacred Heart hospital and diagnosed as LRTIs. The study period was from September 1998 to August 2002. Specimens were inoculated onto HEp-2 cell, LLC-MK2 cell and MDCK cell. Viruses were detected by immunofluorescent method performed at day 10 postinoculation. Respiratory viruses were detected in 251(27%) cases. Medical records of 208 cases diagnosed as acute LRTIs were all taken reviewed and analyzed. Results : The identified pathogens were RSV 122 cases(58%), PIV 30 cases(14%), INFA 20 cases(10%), INFB 21 cases(11%) and ADV 15 cases(7%) during the study period. Outbreaks of RSV infections occurred every year but mostly on December, 1998 and November, 1999. LRTIs by PIV and ADV occurred during all seasons of the year. INFA was isolated moslty on March, 1999 and January, 2000. INFB infections occurred largely on April, 2002. The clinical diagnoses were bronchiolitis 88 cases(43%), pneumonia 87 cases(42%), croup 19 cases(9%) and tracheobronchitis 14 cases(6%). Common symptoms and signs were cough, rhinorrhea, sputum and fever. WBC counts in peripheral blood showed normal findings in 123 cases(59%). Each viral infections also showed some differences in auscultatory findings and chest X-ray findings. Conclusion : We learned that viruses are one of the major and important etiologic agents of acute LRTIs of children in Korea. However, we still need to find out more about its characteristic clinical features and continue studying on their seasonal occurrence to focus on their management and also prevention.
Ahn, Jong Gyun;Choi, Seong Yeol;Kim, Dong Soo;Kim, Ki Hwan
Pediatric Infection and Vaccine
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v.19
no.2
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pp.71-78
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2012
Purpose: Human bocavirus (hBoV), a recently discovered virus, has been detected in children with respiratory tract infections worldwide. The aim of this study was to analyze the frequency and molecular phylogeny of hBoV in the respiratory samples of children with acute respiratory tract infections in 2010. Methods: Nasopharyngeal samples were collected from 953 children with lower respiratory tract infections at Severance children's hospital in Korea from January 2010 to December 2010. We applied the multiplex PCR technique for the identification of 12 respiratory viruses from the samples. Among the total specimens, hBoV positive samples were subjected to phylogenetic analysis by sequencing a fragment of the VP1/VP2 gene junction. Results: hBoV was detected in 141 (14.8%) among 953 patients. The 61.7% of hBoV-positive samples were found to co-exist with other respiratory viruses. The results of phylogenetic analysis showed that all 141 hBoV-positive isolates were identified as hBoV 1, revealing a high similarity among the isolates (>98%). Conclusion: hBoV 1 with minimal sequence variations circulated in children with acute respiratory infections during 2010. More research is needed to determine the clinical severity and outcomes of the minimal sequence variations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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