One hundred and sixty nine Escherichia (E.) coli strains isolated from fecal samples of aquatic birds in Geumho river basin and Dalseong park were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 14 antimicrobial agents. The distribution of tetracycline resistance determinants (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) were also examined by PCR in 76 tetracycline-resistant ($TC^r$) E. coli isolates. The high resistance was observed in tetracycline, cephalothin and ampicillin (45.0~36.7%). Resistance of E. coli isolates derived from Dalseong park to tetracycline, cephalothin, ampicillin and streptomycin (65.7~44.8%) were significantly higher than those isolated from Geumho river basin (31.4~14.7%). About seventy percent (70.4%) of the strains isolated were resistant to one or more drugs tested. Thirty (39.5%) of 76 $TC^r$ E. coli isolates which were resistant to one or more drugs transferred all or a part of their resistance patterns to the recipient strain of E.coli J53 by conjugation. All of $TC^r$ E. coli isolates contained at least one or more of 5 tet genes examined. The most common genes found in these isolates were tetA (60.6%) and followed by tetB (7.9%) and tetC (1.3%). However, tetD and tetE were not found in any of the isolates tested. Twenty one (27.6%) of $TC^r$ E. coli isolates had two determinants, tetA/tetB (20 strains), tetA/tetC (1 strain). And two strains (2.6%) contained three determinants (tetA/tetB/tetC).
Background: Klebsiella spp. is an important conditional pathogen in humans and animals. However, due to the indiscriminate use of antibiotics, the incidence of antimicrobial resistance has increased. Objectives: The purpose of this study was to investigate antimicrobial resistance in strains of Klebsiella strains and the phylogenetic relatedness of extended-spectrum cephalosporin (ESC)-resistance among Klebsiella strains isolated from clinically ill companion animals. Methods: A total of 336 clinical specimens were collected from animal hospitals. Identification of Klebsiella species, determination of minimum inhibitory concentrations, detection of ESC resistance genes, polymerase chain reaction-based replicon typing of plasmids by conjugation, and multilocus sequence typing were performed. Results: Forty-three Klebsiella strains were isolated and, subsequently, 28 were identified as K. pneumoniae, 11 as K. oxytoca, and 4 as K. aerogenes. Eleven strains were isolated from feces, followed by 10 from ear, 7 from the nasal cavity, 6 from urine, 5 from genitals, and 4 from skin. Klebsiella isolates showed more than 40% resistance to penicillin, cephalosporin, fluoroquinolone, and aminoglycoside. ESCresistance genes, CTX-M groups (CTX-M-3, CTX-M-15, and CTX-M-65), and AmpC (CMY-2 and DHA-1) were most common in the K. pneumoniae strains. Some K. pneumoniae carrying CTX-M or AmpC were transferred via IncFII plasmids. Two sequence types, ST709 and ST307, from K. pneumoniae were most common. Conclusions: In conclusion, this is the first report on the prevalence, ESCresistance genotypes, and sequence types of Klebsiella strains isolated from clinically ill companion animals. The combination of infectious diseases and antimicrobial resistance by Klebsiella in companion animals suggest that, in clinical veterinary, antibiotic selection should be made carefully and in conjunction with the disease diagnosis.
This study aimed at determining the genetic and virulence characteristics of the Listeria monocytogenes from smoked ducks. L. monocytogenes was isolated by plating, and the isolated colonies were identified by PCR. All the obtained seven L. monocytogenes isolates possessed the virulence genes (inlA, inlB, plcB, and hlyA) and a 385 bp actA amplicon. The L. monocytogenes isolates (SMFM2018 SD 1-1, SMFM 2018 SD 4-1, SMFM 2018 SD 4-2, SMFM 2018 SD 5-2, SMFM 2018 SD 5-3, SMFM 2018 SD 6-2, and SMFM 2018 SD 7-1) were inoculated in tryptic soy broth (TSB) containing 0.6% yeast extract at 60℃, followed by cell counting on tryptic soy agar (TSA) containing 0.6% yeast extract at 0, 2, 5, 8, and 10 min. We identified five heat resistant isolates compared to the standard strain (L. monocytogenes ATCC13932), among which three exhibited the serotype 1/2b and D-values of 5.41, 6.48, and 6.71, respectively at 60℃. The optical densities of the cultures were regulated to a 0.5 McFarland standard to assess resistance against nine antibiotics after an incubation at 30℃ for 24 h. All isolates were penicillin G resistant, possessing the virulence genes (inlA, inlB, plcB, and hlyA) and the 385-bp actA amplicon, moreover, three isolates showed clindamycin resistance. In conclusion, this study allowed us to characterize L. monocytogenes isolates from smoked ducks, exhibiting clindamycin and penicillin G resistance, along with the 385-bp actA amplicon, representing higher invasion efficiency than the 268-bp actA, and the higher heat resistance serotype 1/2b.
구기자나무의 효과적인 재분화조건을 바탕으로 염류내성유 전자인 Bet A와 Bet B유전자의 도입을 시도하였다. 구기자나무의 절편체를 재료로 kinetin 1 mg/L, IBA 0.05 mg/L가 첨가된 MS배지에 2일간 전배양한 후 Agrobacterium과 공조배양 및 선발배지에서의 배양으로 kanamycin에 내성을 갖는 잠정적인 형질전환체를 유도하였다. 형질전환체는 PCR 기법 및 Southern blot분석으로 Bet A와 Bet B 유전자 전이를 확인하였고, 도입된 유전자의 발현은 RT-PCR 방법을 사용하여 확인하였다.
The brown planthopper, N. lugens (Stal), has become a serious pest of rice in tropical Asia during the last decade. At high pest density, its feeding damage causes 'hopperburn' or complete wilting and drying of the rice plant. It also transmits grassy and ragged stunt virus diseases. The estimated losses caused by the pest in tropical Asia exceed $US\$300$ millions. While cultivation of resistant rice varieties has proved to be highly effective against the pest, their long-term stability is threatened because of the evolution of prolific biotypes which can destroy these varieties. At present, identification of biotypes is based principally on the differential reactions of host rice varieties to the pest and on host-mediated behavioral and physiological responses of the pest. Recent findings of morphological differences in adult rostrum, legs, and antennae, body parts that possess receptors for host plant location and discrimination, and cytological differences in N. lugens populations maintained as stock cultures strongly complement other biotype studies. So far, three N. lugens biotypes have been identified in the Philippines. Biotype I can survive on and damage varieties that do not carry and genes for resistance, while Biotype 2 survives on resistant varieties carrying Bph 1 gene and Biotype 3 on varieties carrying gene bph 2. However, none of these biotypes can survive on varieties with genes Bph 3 or bph 4. Several varieties which are resistant in the Philippines are susceptible in India and Sri Lanka as the South Asian biotypes of N. lugens are more virulent than Southeast Asian biotypes. To monitor the pest biotypes in different geographical regions and to identify new sources of resistance, an International Brown Planthopper Nursery has been established in many cooperating countries. The evolution of biotypes is an exceedingly complex process which is governed by the interactions of genetic and biological factors of the pest populations and the genetic makeup of the cultivated varieties. While the strategy for sequential release of varieties with major resistance genes has been fairly successful so far, the monegenic resistance of these varieties makes them vulnerable to the development of the pest biotypes. Therefore, present breeding endeavors envisage utilizing both major and minor resistance genes for effective control of the pest.
1999년부터 2004년 사이에 벼흰잎마름병의 원인균인 Xanthomonas oryzae pv. oryzae를 전국적으로 분리하여 Biolog와 지방산 분석법을 이용하여 동정하였다. 한국의 벼 판별품종을 기준으로 분류한 결과 1999년도와 2002에 각각 분리된 벼흰잎마름병균은 모두 K1 레이스에 속하였다. 2003년도에 분리된 벼흰잎마름병균의 경우는 50% 이상이 K3 레이스에 속하였으며 대부분 전라도 지역에서 분리된 균주였다. 분리 년도 별로 단인자 벼 저항성 품종에 대한 균들의 반응을 보았을 때 많은 K1 레이스로 분류된 균주들이 단인자 저항성 품종에 대해 달리 반응을 보였다. Southern bolt 결과, 동일한 레이스에서도 다양한 비병원성 유전자들을 가지고 있었다. 이러한 결과들은 하나의 레이스가 여러 개의 벼 저항성 유전자와 반응한다는 것을 제시한다. 전남과 전북에서 분리된 모든 K3 레이스들은 Xa3 단인자 저항성 품종을 침해하였는데 이러한 결과는 전남과 전북에 Xa3 저항성원을 지닌 벼 품종의 과다한 재배로 인하여 Xa3 침해 균주의 선별적 증식이 유도된 것으로 추측된다. 이러한 다양한 비병원성 유전자 패턴 및 단인자 저항성 유전자에 대한 반응을 고려하여 국내 분리된 벼흰잎마름병균들을 19개의 병원형으로 분류하였다. 새롭게 분류된 병원형들은 국내의 새로운 저항성 품종을 육종하는데 도움이 될 것이다.
본 연구는 어린이집 급식설비 손잡이의 식중독 세균 오염도를 측정하고, 분리 균주의 독소 유전자와 항생제 내성을 분석하여 급식설비 손잡이에 의한 집단식중독을 예방을 위한 과학적 기반을 마련하고자 하였다. 실험 대상은 전라남도 일부 지역 어린이집 101곳의 냉장고, 냉동고, 자외선 살균기 손잡이, 총 303개를 대상으로 하였다. 어린이집 냉장고, 냉동고 손잡이에서 B. cereus 4 균주(1.3%)가 검출되었고 어린이집 냉장고 손잡이에서 S. aureus 2균주(0.7%)가 검출되었다. B. cereus와 S. aureus의 독소유전자를 분석한 결과 B. cereus 4개 균주 모두에서 nheA, nheB, nheC, entFM, cytK가 검출되었으나, S. aureus의 2개 균주의 경우 모두 sea, seb, sec, sed, see, seg, seh, sei, sej 독소유전자가 불검출되었다. B. cereus에서 설사를 유발하는 장독소가 검출되어 B. cereus에 의한 식중독 발생가능성이 상존하는 것으로 판단되었다. B. cereus와 S. aureus의 항생제 감수성을 실험한 결과 B. cereus 4 균주에서 AM, FEP 등 β-lactam계 항생제에 내성을 나타내었고 S. aureus 균주 모두 AM, P 항생제에 내성을 나타내었다. S. aureus 균주는 OX 항생제에 각각 중간 내성 1 균주와 감수성 1 균주를 나타내었으나 MRSA는 검출되지 않았다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때 어린이집 급식설비 손잡이의 교차오염으로 인한 식중독 발생을 예방하기 위해 급식설비 손잡이에 대한 주기적인 살균 등 위생관리 방안을 강화해야할 것으로 판단되었다.
Kim, Ki-Sung;Oh, Jae-Young;Jeong, Yong-Wook;Cho, Jae-We;Park, Jong-Chun;Cho, Dong-Teak
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제12권1호
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pp.106-113
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2002
One-hundred and twenty-four trimethoprim-resistant Shigella sonnei isolates extracted in Korea during the last two decades were investigated for their epidemiological relationship and mechanisms of resistance to trimethoprim. The S. sonnei isolates were distributed into two groups by three different epidemiological tools: biotyping, antibiogram, and pulsed-field gel electrophoresis. One group contained the isolates from the 1980s and the other group included the isolates from the 1990s. The geometric mean MICs of trimethoprim in S. sonnei isolates from the 1980s and 1990s were found to be $672.9{\mu}g/ml\;and\;>2,048{\mu}g/ml$, respectively. Trimethoprim resistance was associated with dfrA5, dfrA12, and dfrA13 genes in the isolates from the 1980s, dfrA1, dfrA5, and dfrA12 in the isolates from 1991, and dfrA1 and dfrA12 in the isolates from 1992 to 1999. The dfrA1 gene was located downstream of the intI2 gene in Tn7, which was located on chromosome. Some dfrA12 genes were found as gene cassettes in the class 1 integron. The dfrA5 and dfrA13 genes were located on conjugative plasmids. These results suggested that a clonal change occurred in S. sonnei isolates in Korea during the last two decades and that dfr genes located on different transposable genetic elements had gradually changed.
Van, Kyujung;Lestari, Puji;Park, Yong-Jin;Gwag, Jae-Gyun;Kim, Moon-Young;Kim, Dong-Hyun;Heu, Sung-Gi;Lee, Suk-Ha
Journal of Crop Science and Biotechnology
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제10권3호
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pp.147-158
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2007
Xanthomonas axonopodis pv. glycines(Xag) is a pathogen that causes bacterial leaf pustule(BLP) disease in soybeans grown in Korea and the southern United States. Typical and early symptoms of the disease are small, yellow to brown lesions with raised pustules that develop into large necrotic lesions leading to a substantial loss in yield due to premature defoliation. After Xag infects PI 96188, only pustules without chlorotic haloes were observed, indicating the different response to Xag. To identify differentially expressed genes prior to and 24 hr after Xag inoculation to PI 96188 and BLP-resistant SS2-2, an oligonucleotide macroarray was constructed with 100 genes related to disease resistance and metabolism from soybean and Arabidopsis. After cDNAs from each genotype were applied on the oligonucleotide macroarrays with three replicates and dye swapping, 36 and 81 genes were expressed as significantly different between 0 hr and 24 hr in PI 96188 and SS2-2, respectively. Six UniGenes, such as the leucine-rich repeat protein precursor or 14-3-3-like protein, were selected because they down-regulated in PI 96188 and up-regulated in SS2-2 after Xag infection, simultaneously. Using tubulin and cDNA of Jangyeobkong(BLP-susceptible) as controls, the oligonucleotide macroarray data concurred with quantitative real-time RT-PCR(QRT RT-PCR) results in most cases, supporting the accuracy of the oligonucleotide macroarray experiments. Also, QRT RT-PCR data suggested six candidate genes that might be involved in a necrotic response to Xag in PI 96188.
Plants protect themselves from pathogen attacks via several mechanisms, including hypersensitive cell death. Recognition of pathogen attack by the plant resistance gene triggers expression of carboxylesterase genes associated with hypersensitive response. We identified six transcripts of carboxylesterase genes, Vitis flexuosa carboxylesterase 5585 (VfCXE5585), Vf-CXE12827, VfCXE13132, VfCXE17159, VfCXE18231, and VfCXE47674, which showed different expression patterns upon transcriptome analysis of V. flexuosa inoculated with Elsinoe ampelina. The lengths of genes ranged from 1,098 to 1,629 bp, and their encoded proteins consisted of 309 to 335 amino acids. The predicted amino acid sequences showed hydrolase like domains in all six transcripts and contained two conserved motifs, GXSXG of serine hydrolase characteristics and HGGGF related to the carboxylesterase family. The deduced amino acid sequence also contained a potential catalytic triad consisted of serine, aspartic acid and histidine. Of the six transcripts, Vf-CXE12827 showed upregulated expression against E. ampelina at all time points. Three genes (VfCXE5585, VfCXE12827, and VfCXE13132) showed upregulation, while others (VfCXE17159, VfCXE18231, and VfCXE47674) were down regulated in grapevines infected with Botrytis cinerea. All transcripts showed upregulated expression against Rhizobium vitis at early and later time points except VfCXE12827, and were downregulated for up to 48 hours post inoculation (hpi) after upregulation at 1 hpi in response to R. vitis infection. All tested genes showed high and differential expression in response to pathogens, indicating that they all may play a role in defense pathways during pathogen infection in grapevines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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