This study investigated structure and function of the reproductive system in Aplysia kurodai by means of anatomical, histological, and histochemical observation. Reproductive system of this species is consisted of ovotestis, small hermaphroditic duct, ampulla, accessory genital mass and large hermaphroditic duct. The ovotestis is composed of a large number of follicles, and both oocytes and spermatocytes matured in the same follicle. The small hermaphroditic duct is a single tube and contains a swelling, the ampulla, which functions as a storage organ for endogenous sperm and an oviduct. The accessory genital mass is connected to both the small and large hermaphroditic duct, and consisted of three glands: albumen, membrane (winding) and mucus gland. The albumen gland is consisted of granular cells producing basophilic and neutral mucopolysaccharides. The membrane and mucus gland are consisted of granular cells producing acidophilc and sulfated mucopolysaccharides. The large hermaphroditic duct is a single tubular gonoduct linking the accessory genital mass to the common genital aperture but is consisted of two parallel compartments. Internally, these two compartments are incompletely divided by internal septum or fold, which are called as the red hemiduct and white hemiduct, respectively. The red hemiduct functions as an oviduct and the white hemiduct functions as a copulatory duct. The reproductive system of A. kurodai is externally comprised a single tube, i.e., monaulic type. However, internal structure of duct is incompletely divided into oviduct and copulatory duct, i.e., the oodiaulic type.
본 연구에서는 에스트로겐 수용체 알파 효능제인 propyl pyrazole triol (PPT)을 수컷 생쥐에 투여하였을 때 부속 생식샘의 조직학적 변화가 유발되는지를 조사하였다. 광학현미경으로 조사하기 위해 수컷 생식기관을 고정, 탈수, 포매, 절편 과정을 거쳐 프레파라트를 완성하였다. PPT에 의해 복부쪽 전립샘, 정낭, 포피샘의 각 무게는 실험기간에 따라 감소되었다. 투여군의 경우, 복부쪽 전립샘의 샘 조직 내강은 위축되었다. 전립샘 상피조직의 형태가 단층 원주상피에서 중층 입방 상피 혹은 편평상피로 변화되었다. 투여군 전립샘과 정낭의 상피조직 아래에 있는 결합조직은 증가되었다. 특히, 투여군 정낭의 내강이 대조군에 비해 위축되었다. 포피샘의 투여군 8주에서 상피세포 높이가 감소되었다. 수컷 내에서 에스트로겐 수용체 효능제의 이런 영향을 파악함으로서 생식기관 내 에스트로겐의 생리학적 기능을 이해하는데에 도움을 줄 것으로 사료된다.
Male accessory glands and ejaculatory duct of Drosophila melanogaster are reproductive organs which synthesize secretory seminal proteins. Several products of these organs involved in egg laying, receptivity, and sperm stability or storage were isolated from their lumens. Despite their secretory process play an important role, exocytosis pathway in these organs is not well known. In the present study, we characterized secretory protein profiles and determined their secretory mechanisms. Eight accessory gland secretory proteins and two ejaculatory duct secretory proteins were detected in their lumens. All these proteins were constitutively synthesized in these organs and secreted to their lumens. Secretion of newly synthesized proteins initiated at about 1 h after synthesis, and reached the peak at 4 h after synthesis. It seems that secretion of the proteins may occur via constitutive exocytosis pathway.
매미나방(Lymantria dispar)에서 추출된 카이로몬을 이용하여 난기생천적인 짚시알깡충좀벌(Ooencyrtus kuvanae)에 대한 유인성을 olfactormeter로 측정하였다. 매미나방알의 인편과 털에서 추출한 카이로몬은 79.9%의 유인성을 나타내어 알에서 추출한 카이로몬의 67.6%보다 높은 유인력을 나타내었다. 짚시알깡충좀벌의 탐색시간은 인편과 털의 추출물에서 115.5초 인편과 털을 제거하지 않은 알에서 113.2초로 유사하였다. 정상적으로 산란된 기주알에 대해서는 91.0%가 유인되어서 난소에서 적출한 미성숙알의 15%보다 크게 높았으며 탐침까지의 시간은 84.2초로 난수에서 적출한 알의 114.0초보다 짧았다. 생식부속샘에서 분비되는 접착물질은 88%로서 가장 높은 반응을 보였고, 탐색시간은 89.2초, 최초탐침시간은 26.8초를 나타냈다. 6종류의 유기용매를 사용하여 추출한 카이로몬을 대상으로 짚시알깡충좀벌의 유인도를 조사한 결과 n-hexane의 추출물에서 가장활발한 반응을 나타냈으며 자연난에서 우화한 것이 인공난에서 우화한것보다 3배이상 높은 반응을 보였다.
에스트로겐 수용체 알파에 높은 친화성을 갖고 있는 수용체 촉진제인 propyl pyrazole triol (PPT)을 성체 수컷 생쥐에 이틀 간격으로 8일, 16일, 24일 동안 피하주사방법으로 투여하였다. 현미경으로 부속 생식샘인 전립샘과 정낭, 그리고 간의 조직학적 변화를 관찰하였다. 대조군에 비해, PPT 투여군의 체중과 생식샘의 무게는 감소하였지만 간의 무게는 오히려 증가하였다. PPT 투여군에서 전립샘과 정낭의 내강 면적이 축소되었다. PPT 투여군 전립샘의 상피세포 높이는 대조군에 비해 증가하였다. 정낭의 경우, 상피세포의 핵 위쪽 세포질에 있는 분비 소포가 대조군에서는 나타났지만, PPT 군에서는 잘 관찰되지 않았다. 대조군에 비해 PPT 투여군 간의 굴모양혈관 직경이 투여횟수에 누적적으로 147.0%, 198.7%, 223.3% 의 비율로 증가되었다. 이런 결과는 PPT 투여로 인해 생식기관과 간의 조직 구조가 영향을 받으며, 그 조직학적 변화는 투여회수에 따라 더 심하게 나타났다. 결론적으로 이틀에 한번씩 투여한 PPT에 의해서 생식력 변화와 관련 있는 생식기관의 상피세포 높이 변화가 일어났고, 내강의 크기가 위축되었다. 간의 굴모양혈관 직경이 급격하게 확대되었으며, 이 결과는 간의 무게 증가로 이어졌다.
On the basis of the semen analysis in 66 subjects, they were divided into six different groups: Group I consisted of 16 normal subjects with sperm counts of over 40 ${\times}10^6$/ml and motility of over 40 percent, Group II, 7 subjects with normal sperm counts, but motility of under 40 percent, Group III, 15 oligospermic patients with under 40 ${\times}10^6$/ml, Group IV 14 azoospermic patients, Group V, 10 patients with vasectomy and Group VI, 4 abnormal patients with 2 cases of hypoplastic testis, 1 case of Klinefelter's syndrome and 1 case of testis tumor. After seperation of semen into sperm and seminal plasma by centrifugation, the protein contents and the activities of hyaluronidase, ${\beta}$-N acetylglucosaminidase, ${\beta}$-glucuronidase, arylsulfatase, acrosin and azocoll proteinase in seminal plasma were measured. Vasectomy group has 30 percent less of total protein than normal group. For the comparison of enzyme activities of seminal plasma, it could be assumed that the enzymes in seminal plasma were not contaminated with the enzymes of spermatozoa by testing the enzymes of the seminal plasma from the vasectomy and azoospermic groups. It had been reported that hyaluronidase was only released from spermatozoa, however, the result obtained in this investigation showed that azoospermic and vasectomy group had high specific activities of hyaluronidase. The results indicated that hyaluronidase was not only from the testis but also from the male accessory sexual glands. Oligospermic group (Group III) showed the lowest total activity of hyaluronidase among them. The specific activities of ${\beta}$ -N-acetylglucosaminidase was high in oligospermic group (Group III) and low in vasectomy group (Group V). These results were contradictory with the pattern of hyaluronidase activities. This indicated that the spermatozoa which were stayed in epididymis would increase the activity of this enzyme. The specific activity of ${\beta}$ - glucuronidase was low in oligospermic and vasectomy groups. Group VI including testis tumor had remarkably high arylsulfatase activity. Arylsulfatase, a typical lysosomal enzyme, has been known to be released unusually large amounts from certain tumor cells. Arylsulfatase was also released with high activities from azoospermic and vascetomy group. This result indicated that this enzyme was also released from the sources other than testis. Acrosin, a proteolytic enzyme locating in the sperm acrosome, was not found throughout all the samples of seminal plasma. The activities of azocoll proteinase, a non-specific neutral proteinase was nearly identical in all the groups. This enzyme must have been released from the sources other than testis.
Recently, there is a worldwide concern that a great number of man-made chemicals have a hormone-like action both in humans and in animals. DECD is developing screening programs using validated test systems to determine whether certain substances may have an effect in humans. In the present study. the establishment oj repeated-dose toxicity test method was tried. Flutamide. an anti-androgenic agent. was administered by gavage to Sprague-Dawley rats for 28 days at dose levels of 0. 0.5. 3 and 18 mg/kg body weight (10-15 rats/sex/group) to examine the effects on general findings. especially reproductive and endocrine parameters. Clinical signs. body weights, food consumption, and sexual cycle were checked and measured. For the gross and microscopic examinations. 10 rats/sex/group were sacrificed at the end of dosing period and the remaining animals of control and high dose groups (5 each) were sacrificed after 14 days recovery. Examinations for hematology and clinical chemistry were carried out at necropsy. There were no treatment-related changes in clinical signs. body weights, food consumption. gross necropsy. hematology and clinical chemistry at all doses of both sexes. The period and regularity of sexual cycle were not adversely affected at all doses by the test agent. At 18 mg/kg. both decreased weights of prostate, seminal vesicle and epididymis in males and increased weights of spleen and thymus in females were observed. In addition, decreased number of spermatids and sperms. increased serum testosterone concentration and increased incidence (100%) of interstitial cell hyperplasia were seen in males. At 18 mg/kg of the recovery group. decreased prostate weight. reduced sperm count and increased incidence (20%) of interstitial cell hyperplasia in males and increased thymus weight in females were observed. At 3 mg/kg. reduced sperm count was found. There were no adverse effects on parameters examined at 0.5 mg/kg of both sexes. The results suggested that the potential target organs of flutamide may be accessory sexual glands including testes for males and spleen and thymus for females. Taken together. this test method was found to be a useful screening test system for endocrine disrupting chemicals.
Kim, Hee-Su;Kim, Yong-Bin;Choi, Donchan;Cheon, Yong-Pil;Lee, Sung-Ho
한국발생생물학회지:발생과생식
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제21권4호
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pp.441-448
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2017
Bisphenol-A(BPA) is a member of alkylphenol family, and shows adverse effects including reduced fertility, reproductive tract abnormalities, metabolic disorder, cancer induction, neurotoxicity and immunotoxicity. In the present study, we conducted Hershberger assay to evaluate whether the two candidates to replace BPA have androgenic or antiandrogenic activity. The assay was carried out using immature castrated Sprague-Dawley male rats. After 7 days of the surgery, testosterone propionate (TP, 0.4 mg/kg/day) and test materials (low dose, 40 mg/kg/day; high dose, 400 mg/kg/day) were administered for 10 consecutive days by subcutaneous (s.c.) injection and oral gavage, respectively. Test materials were BPA, isosorbide (ISO) and cyclohexanedimethanol (CHDM). The rats were necropsied, and then the weights of five androgen-dependent tissues [ventral prostate, seminal vesicle, levator ani-bulbocavernosus (LABC) muscle, paired Cowper's glands, and glans penis] and three androgen-insensitive tissues (kidney, spleen and liver) were measured. All test materials including BPA did not exhibit any androgenic activity in the assay. On the contrary, antiandrogen-like activities were found in all test groups, and the order of the intensity was CHDM > BPA > ISO in the five androgen-sensitive tissues. There was no statistical difference between low dose treatment and high dose treatment of BPA group as well as ISO group. In CHDM group, high dose treatment exhibited most severe weight reduction in all measured tissues. There was no statistical difference in androgen-insensitive tissue measurements, except BPA groups. Since the effects of ISO treatment on the accessory sex organs were much less or not present at all when compared to those of BPA, ISO could be a strong candidate to replace BPA. CHDM treatment brought most severe weight reduction in all of androgen-sensitive tissues, so this material should be excluded for further screening of BPA substitute selection.
플라스틱 가소제인 di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP)는 매우 잘 알려진 내분비계 장애물질(endocrine disrupting chemicals; EDCs) 중 하나로, 수컷 설취류와 인간의 생식과 발생 과정에 있어 강력한 항안드로겐성 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 사춘기 이전에 수컷 흰쥐를 DEHP에 노출시킴으로써 부속 성기관의 성숙 과정 동안 나타나는 변화를 조사한 것이다. 결과로, DEHP 투여에 의한 체중, 혈중 T 수준, 저정낭과 전립선을 제외한 조직의 무게는 대조군과 비교하여 유의적인 변화가 없었다. 저정낭의 경우, 고농도(200 mg/kg)의 DEHP를 처리한 투여군의 무게가 대조군에 비해 유의하게 감소하였으며(p<0.05), 전립선의 경우, 저농도(20 mg/kg)와 고농도의 DEHP를 처리한 모든 투여군에서 대조군에 비해 유의한 무게의 감소를 나타내었다(p<0.05). 조직학적 연구 결과, DEHP 투여군의 저정낭은 대조군에 비해 점막층의 면적이 감소하였다. 또한, 전립선의 경우 대조군에서는 분비상피세포들이 입방형인데 비해 DEHP 투여군에서는 위중층상피세포 형태가 관찰되었다. 정량적 RT-PCR 연구에서, 저정낭에서의 ER-$\alpha$ 발현은 고농도 DEHP 투여에 의해 유의한 발현증가가 나타났으며(p<0.05), ER-$\beta$의 경우 저농도 DEHP 투여에 의해 유의한 발현 감소가 나타났다(p<0.05). 전립선에서의 ER-$\beta$ 수준은 저농도 DEHP 투여에 의해 유의하게 감소하나(p<0.05), 고농도 DEHP 투여에 의해서는 유의한 발현증가가 나타났다(p<0.01). 그러나 AR 발현의 경우, 저정낭과 전립선 모두에서 DEHP에 의해 유의한 차이가 나타나지않았다. 결론적으로, 본 연구는 (i) DEHP의 유해한 작용이 사춘기 이전 시기의 성적인 성숙을 교란할 수 있으며, (ii) 저정낭과 전립선이 사춘기 이전 시기 DEHP 노출에 대한 민감한 표적이 될 수 있고, (iii) DEHP의 유해한 작용이 ER과 연관된 기작을 통해 매개될 수 있음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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