The nascent thyroglobulin (Tg) multimer molecule, which is generated during the initial fate of Tg in ER, undergoes the rapid reductive depolymerization. In an attempt to determine the depolymerization process, various types of Tg multimers, which were generated from deoxycholate-treated/reduced Tg, partially unfolded Tg or partially unfolded/reduced Tg, were subjected to various GSH (reduced glutathione) reducing systems using protein disulfide isomerase (PDI), glutathione reductase (GR), glutaredoxin or thioredoxin reductase. The Tg multimers generated from deoxycholate-treated/reduced Tg were depolymerized readily by the PDI/GSH system, which is consistent with the reductase activity of PDI. The PDI/GSH-induced depolymerization of the Tg multimers, which were generated from either partially unfolded Tg or partially unfolded/reduced Tg, required the simultaneous inclusion of glutathione reductase, which is capable of reducing glutathionylated mixed disulfide (PSSG). This suggests that PSSG was generated during the Tg multimerization stage or its depolymerization stage. In particular, the thioredoxin/thioredoxin reductase system or glutaredoxin system was also effective in depolymerizing the Tg multimers generated from the unfolded Tg. Overall, under the net GSH condition, the depolymerization of Tg multimers might be mediated by PDI, which is assisted by other reductive enzymes, and the mechanism for depolymerizing the Tg multimers differs according to the type of Tg multimer containing different degrees and types of disulfide linkages.
Sparganium stoloniferum Buch.-Ham. (Sparganiaceae) is a perennial herb which has been used as treatments for menstrual disorder, galactagogue and endometriosis in folk remedies. The Sparganii Rhizoma processed, heated with vinegar, used to different purpose compared with origin in medicine. In order to estimate the different effects between processed (PSR) and unprocessed (USR) Sparganii Rhizoma, extraction and systemic fractionation of the rhizomes were archived. Inhibitory effects of the extracts as well as the fractions of PSR and USR on rat lens aldose reductase and on rat platelet aggregation were investigated for the prevention or the treatment of chronic diabetic complications. Their antioxidant effects, measured using lipid peroxidation of liver tissue and radical scavenging activities on 1,1-diphenyl-picrylhydrazyl in vitro, were evaluated. The most of biological activities tested except rat platelet aggregation, fractions from PSR were shown to exhibit stronger activities than those from USR. It seems that caused by changing of the chemical components by heating process in conditioned with acetic acid. Compounds isolated were shown to significant inhibitory activity on rat lens aldose reductase. Inhibitory activity of compounds isolated on rat lens aldose reductase have been tested in vitro. $IC_{50}$/ (6.31 $\mu$M) of cerebroside I (V) was nearly equal to that (6.32 $\mu$M) of a reference compound, tetrametbylene glutaric acid (TMG).
대퇴골두무혈성괴사증은 다원적인 질병으로 특정 집단의 경우 더 많은 위험성을 내포하고 있다. 특히 스테로이드의 과용과 알코올 남용 등으로 인한 지질대사의 변화는 골괴사증의 주요 원인 중 하나이다. 본 연구는 골괴사 환자와 대조군 사이에서 HMG-CoA reductase 유전자의 다형성과 질환발생과의 연관성에 대해 알아보았다. 24명의 한국인을 대상으로 HMG-CoA reductase 유전자를 시퀀싱하여 5곳의 유전자 다형성을 확인하였다. 349명의 남성 환자와 300명의 남성 대조군을 대상으로 네 곳(-6933C>T, -6045T>G, +12673G>A, +18128C>T)의 유전자다형성의 빈도를 비교하였다. 그 결과 HMG-CoA reductase 유전자의 다형성과 질환발생 및 혈장 지질농도와는 어떠한 상관관계도 보이지 않았다.
Objective : In benign prostatic hyperplasia, dihydrotestosterone acts as a potent cellular androgen and promotes prostate growth. Inhibiting enzyme 5${\alpha}$-reductase, which is involved in the conversion of testosterone to the active form dihydrotestosterone, reduces excessive prostate growth. Recently Scutellaria baicalensis has been related reports about the effect of baicalein on anti-proliferation of the prostate gland. In this study, we investigated the effects of Scutellaria baicalensis on cytopathological alterations and expression of 5${\alpha}$-reductase in the rat model of benign prostatic hyperplasia induced by castration and testosterone treatment. Methods : Sprague-Dawley rat were treated with testosterone after castration for induction of experimental benign prostatic hyperplasia, which is similar to human benign prostatic hyperplasia in histopathological profiles. Scutellaria baicalensis as an experimental specimen, and finasteride as a positive control, were administered orally. The prostates were evaluated by histopathological changes, testosterone levels, and the expression of 5${\alpha}$-reductase genes. Results : While prostates of control rats revealed severe acinar gland atrophy and stromal proliferation, the rats treated with Scutellaria baicalensis showed a diminished range of tissue damage. In the reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) of 5${\alpha}$-reductase genes. Scutellaria baicalensis inhibited the expression of 5${\alpha}$-reductase genes. Conclusions : These findings suggest that Scutellaria baicalensis may protect glandular epithelial cells and also inhibit stromal proliferation in association with the suppression of 5${\alpha}$-reductase. From theses results, we suggest that Scutellaria baicalensis could be a useful remedy agent for treating benign prostatic hyperplasia.
NAD(P)H:quinone reductase (QR) is one of the protective phase II enzymes against toxicity that accomplishes the capacity of detoxification by modulating the effects of mutagens and carcinogens. The detoxification mechanism is that quinone reductase promotes the 2-electron reduction of quinones to hydroquinones which are less reactive. This study is to search new inducers of quinone reductase from natural products, which can be used as cancer chemopreventive agents. Plant extracts were evaluated by using quinone reductase generating system With Hepa 1c1c7 murine hepatoma cell lines for enzyme inducing properties and crystal violet staining method for the measurement of cytotoxicity provoked. We have tested approximately 106 kinds of natural products after partition into n-hexane, ethyl acetate and aqueous layers from 100% methanol extracts of natural products. The ethyl acetate fractions of Vitex rotundifolia $(fruits,\;2FC:\;12.7\;{\mu}g/ml)$, Cnidium officinale $(aerial\;parts,\;2FC:\;10.5\;{\mu}g/ml)$, Chrysanthemum sinese $(flowers,\;2FC:\;17.4{\mu}g/ml)$ and the hexane fractions of Angelica gigas $(roots,\;2FC:\;13.2\;{\mu}g/ml)$, Smilax china $(roots,\;2FC:\;l1.9\;{\mu}g/ml)$, Sophora flavescens $(roots,\;2FC:\;16.3\;{\mu}g/ml)$ revealed the significant induction of quinone reductase in a murine hepatic Hepa 1c1c7 cell culture system.
간세포내 두가지 microsome효소인 HMG-CoA reductase와 cholesterol-$7{\alpha}$-hydroxylase는 콜레스테롤 합성과 담즙산으로의 분해의 조절효소임은 이미 알려진 사실이다. 본 실험에서는 콜레스테롤의 대사산물인 4종류 담즙산들이 간세포내의 콜레스테롤 합성 및 HMG-CoA reductase활성에 미치는 효과를 조사하였다. 간세포의 배양에서 간세포로의 담즙산 흡수는 배지내 농도(1mM~10mM)와 배양시간(1/2~3hr)의 차이에 따라 비례적으로 증가하였다. 콜레스테롤 합성저해에 대한 담즙산의 효과는 배지내 담즙산의 농도 및 배양시간에 따라 크게 감소하였다. 분리시킨 microsome내 HMG-CoA reductase의 활성에 대한 담즙산의 저해효과는 insulin 투여에 의하여 효소활성을 촉진시킨 경우에서도 뚜렷하였으며 콜레스테롤 합성 역시 저하되었다. 분리시킨 간세포막 내 $Na^+$,$K^+$-ATPase의 활성은 1.8~2.5mM정도의 배지내 담즙산 농도까지 증가함을 보였으나 cholic acid 흡수는 상기 효소의 활성에 거의 영향을 주지 않는 것으로 나타났다. 이러한 이유는 아직 불분명하나 1차 대사산물인 cholic acid의 흡수는 단순확산에 의한 것으로 사료되며 이에 대한 더 많은 연구가 요구된다.
Quinone reductase(QR)를 포함한 2상효소계를 활성화시키는 성분들은 많은 동물실험에서 발암물질의 세포내 작용을 억제함으로서 항종양효과를 나타내는 것으로 보고되어 있다. 본 연구에서는 대표적인 농산부산물로서 미강, 밀기울, 탈지대두박, 두유박, 참깨박, 들깨박등 6종의 시료에 대한 암예방효과를 갖는 물질의 존재여부를 탐색하기 위하여, mouse hepatoma cell line(Hepalclc7 cells) 을 이용하여, quinone reductase활성유도 여부를 측정하였다. 참깨박과 들깨박의 80%메탄올 추출물은 0.5mg/ml 농도에서 강력한 QR 유도활성을 나타냈으며, 같은 농도에서 다른 시료들은 거의 QR 효소활성을 증가시키지 않았다. 한편 QR효소활성을 유도하는 성분을 찾아내기 위하여 일차적으로 TLC를 수행한 결과, 참깨박과 들깨박의 메탄올 추출물 가운데 사용한 전개용매(n-butanol : n-propanol : 2N ammonium hydroxide(10 : 60 : 30)에서 가장 빨리 이동하는 분획(Rf=0.70)이 유효성분을 함유하고 있음을 확인하였으며, 현재 활성성분의 동정이 진행중에 있다.
The enzyme steroid $5{\alpha}-reductase$ is responsible for the conversion of testosterone into the most potent androgen dihydrotestosterone (DHT). In man, this steroid acts on a variety of androgen-responsive target tissues to mediate such diverse endocrine processes as male sexual differentiation in the fetus and prostatic growth in men. Androgen levels in the prostate may influence carcinogenesis in this organ. The use of a $5{\alpha}-reductase$ inhibitor, finasteride, in the chemoprevention of prostate cancer is being evaluated in a clinical trial and have been used successfully for treatment of benign prostatic hyperplasia. Therefore, for the discovery of $5{\alpha}-reductase$ type 2 inhibitors, we have evaluated the inhibitory effects of solvent fractionated extracts of natural products on $5{\alpha}-reductase$ type 2 activity. We have tested approximately 80 kinds of natural products after partition into n-hexane, ethyl acetate and aqueous layers from 100% methanol extracts of plants. The ethyl acetate fractions of Perilla sikokiana $(seed,\;IC_{50}\;:\;6.2\;ug/ml)$, Sophora flavescens $(root,\;IC_{50}\;:\;8.9\;ug/ml)$, and Angelica tenuissima $(root,\;IC_{50}\;:\;11.7\;ug/ml)$ revealed inhibitory effects on $5{\alpha}-reductase$ 2 activity in LNCaP cells. The effective ethyl acetate fractions of Perilla sikokiana, Sophora flavescens, Hydnocarpus anthelmintica, and Angelica tenuissima were subfractionated by column chromatography and tested. The subfractions $F4\;(IC_{50}\;:\;1.1\;ug/ml),\;F5\;(IC_{50}\;:\;2.0\;ug/ml),\;and\;F6\;(IC_{50}\;:\;5.8\;ug/ml)$ of the ethyl acetate fraction of Perilla sikokiana and the subfraction $F8\;(IC_{50}\;:\;5.3\;ug/ml)$ of the ethyl acetate fraction of Sophora flavescens displayed greater inhibition of $5{\alpha}-reductase$ type 2 than did finasteride in LNCaP cells. These active fractions are under the process of further sequential fractionation to find the effective pure compounds against $5{\alpha}-reductase$ 2 activity.
심혈관계 질환은 질환별 사망률 순위에 있어서 세계에서는 1위이며, 우리나라에서는 2위인 질병이다. 심혈관계 질환 발생의 주 위험 요인인 콜레스테롤은 HMG-CoA reductase에 의해 간에서 신생합성이 조절된다. 현재 고콜레스테롤혈증 치료에 statin이 널리 사용되고 있지만 광범위한 부작용이 보고되고 있어서 이를 대체하거나 보조할 수 있는 천연물 유래의 기능성 물질 개발이 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 혈장 콜레스테롤 감소 활성을 가지는 물질을 발굴하고자 71종의 페놀 및 그와 관련된 화합물들을 대상으로 10ug/ml 농도에서 HMG-CoA reductase 저해 활성을 탐색하였다. 그 결과, 1,4-naphthoquinone의 HMG-CoA reductase 저해율이 99.4%로 가장 높았고, 다음으로 plumbagin 91.4%, pentagalloyl ${\beta}-D-glucose$ 46.6%, 2,4-dihydroxybenzoic acid 40.9%, shikonin 37.7%, 1,2-naphthoquinone 36.6%, trans-cinnamic acid 32.0%, acetonylgeraniin 30.2%, benzoic acid 28.5%, geraniin 28.3%, gentisic acid 22.3%의 순이었다. $IC_{50}$값을 계산한 결과, 1,4-naphthoquinone가 $2.1{\mu}g/ml$로 가장 낮았으며, plumbagin과 pentagalloyl ${\beta}-D-glucose$은 각각 $5.8{\mu}g/ml$과 $13.1{\mu}g/ml$으로 나타났다. 1,4-naphthoquinone과 plumbagin의 경우, $5{\mu}g/ml$에서도 각각 90.3%와 43.3%의 저해율을 나타내었다.
본 연구에서는 담배식물의 생장과 glutathione reductase와 catalase의 활성에 미치는 p-CA, BA 및 SA의 영향을 연구하였다. 담배식물의 생장에 미치는 p-CA, BA 및 SA의 영향을 알아보기 위하여, $10^{-5}$ mM p-CA, BA 및 SA가 각각 함유된 MS배지에서 배양한 후 20일부터 50일까지 10일 간격으로 담배의 생장을 비교하였다. 3가지 물질 모두에 의해 50일에서 생장이 가장 잘 되였다. Glutathione reductase의 활성에 미치는 효과를 측정한 결과, BA의 활성은 대조구보다 감소하였으며, p-CA 역시 활성이 감소하였고, SA의 활성은 증가하였다. 또한 모두 40일에서 가장 활성이 높았다. Catalase의 활성에 미치는 효과를 측정한 결과, SA의 활성은 증가하였으며, BA와 p-CA의 활성은 감소하였다. 또한 모든 실험구에서 40일에 활성이 가장 양호하였다. 결론적으로 p-CA와 BA는 담배식물의 생장을 촉진시켰으며, 50일에서 생장이 가장 양호하였으나 항산화 효소의 활성을 억제하였다. SA는 담배식물의 생장을 억제시켰으나 항산화 효소의 활성은 촉진시켰으며, 40일에서 가장 활성이 양호하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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