To evaluate the effect of antioxidant on the cytotoxicity induced by oxidative stress of reactive oxygen species (ROS) in cultured human skin melanocytes, colorimeric assay of XTT and tyrosinase activity assay were adopted after human skin melanocytes were preincubated for 2 hours in the media containing various concentrations of superoxide dismutase (SOD) before the treatment of hydrogen peroxide. Light microscopic study was carried out in same cultures. The results of this study were as follows 1. Cell viability of human skin melanocytes was significantly decreased by 30 and $40{\mu}M$ of hydrogen peroxide($H_2O_2$), respectively. 2. XTT50 was determined at $30{\mu}M$ after human skin melanocytes were treated with $10{\sim}40{\mu}M$ of hydrogen peroxide for 6 hours. 3. The cell viability of cultured human skin melanocytes pretreated with SOD was increased than that of cultured human skin melanocytes treated with $H_2O_2$ dose-dependently. 4. In tyrosinase activity of human skin melanocytes, the cell treated with SOD showed brown stain compared with $H_2O_2$ treated cells, dark stain. 5. In light microscopy, cultured human skin melanocytes exposed to $H_2O_2$ showed morphological changes such as the decreased cell number and cytoplasmic processes, compared with control. 6. In light microscopy, cultured human skin melanocytes pretreated with SOD showed the increase of cell number and cytoplasmic processes compared with $H_2O_2-treated$ group. From these results, it is suggested that oxidative stress of ROS such as $H_2O_2$ has cytotoxicity by showing the decreased cell viability, the increased tyrosinase activity and mophological changes of the decreased cell number and cytoplasmic processes. While, antioxidant like SOD was effective in the prevention of oxidative stress-mediated cytotoxicity by the increased cell viability, decreased tyrosinase activity and the protection of degenerative morphological changes in cultured human skin melanocytes.
본 연구에서는 TiO$_2$ 하지층이 첨가된 hexagonal barium-ferrite(BaM) 박막을 RF/DC magnetron sputtering system을 이용하여 상온에서 증착한 후, 여러 온도에서 열처리하여 결정화하였다. BaM박막에 TiO$_2$ 하지층을 첨가하여 열처리한 경우 Si와 BaM의 (006), (106), (114), (217), (2011) peak들이 사라지고 (008)의 intensity가 낮아졌으며 SiO$_2$와 (116), (302)의 peak들이 성장하였음을 XRD pattern을 통하여 알 수 있었다. BaM 박막의 자기적 특성을 VSM을 통하여 알아본 결과, 보자력, 잔류자화, 각형비 등의 자기적인 특성들은 수직에 비해 수평이 더 좋게 나타났는데, 이러한 결과로 박막면에 평행한 방향으로의 자화용이축이 존재하고 있다는 것을 알 수 있었다. SEM을 통하여 증착압력 및 열처리 시간에 따른 결정화 정도와 자기적 특성을 알아본 결과 5 mTor 보다 10 mTrr에서 더 좋게 나타났으며, 열처리를 시작한 뒤 10분 이내에 750 $^{\circ}C$ 이상에서 대부분의 특성변화가 일어났음을 알 수 있었다.
본 연구에서는 여러 하지층이 첨가된 hexagonal barium-ferrite(BaM) 박막을 RF/DC magnetron sputtering system을 이용하여 상온에서 증착한 후, 850 $^{\circ}C$에서 10분간 열처리하여 결정화하였다. BaM 박막에 여러 하지층을 첨가하여 고온 열처리한 경우 수평방향의 (107), (114) peak과 수직방향의 (006), (008) peak이 같이 관찰되어 결정이 random한 방향으로 성장되었다는 것을 알 수 있었다. BaM 박막의 자기적 특성을 VSM을 통하여 알아본 결과, 보자력 , 잔류자화, 각형비 등의 자기적인 특성들은 수직에 비해 수평이 좀더 좋게 나타났는데, 이러한 결과로 박막면에 평행한 방향으로의 자화용이축이 존재하고 있다는 것을 알 수 있었다. SEM과 AFM을 통하여 표면의 모양을 살펴본 결과 grain size는 박막의 두께가 두꺼워지면서 증가하였으며, 300 $\AA$ 두께에서 판상모양과 긴 모양의 grain들이 관찰되었다. 이러한 grain 모양은 박막의 두께가 600$\AA$으로 증가할 때까지 계속되는 것을 관찰하였으나, 1500$\AA$의 두께에서는 단지 긴 모양의 grain들만이 관찰되었다.
마이크로 에멀젼 수용액에 분산된 반응성 유기화합물을 전기분해를 통하여 얻을 수 있는 수산화이온 및 수소이온을 이용하여 가수분해시키고, 분해속도를 비교하는 실험을 수행하였다. 반응물질로 사용된 p-nitrophenylacetate (PNPA)의 가수분해로부터 발생하는 p-nitrophenoxide 농도 변화에 따른 흡광도 변화를 이용하여 분해속도를 얻을 수 있었다. 자체 조립한 전기분해 장치를 이용하여 전압, 반응온도, 반응물질 양에 따른 분해속도 변화를 관찰하였다. 마이크로 에멀젼 사용으로 인하여 반응물질 용해도를 증가시킬 수 있으며, 전기분해법 사용으로 인하여 반응속도 조절이 용이하며, 유지비용이 저렴하고, 기존 화학물질 투여방법에 비해 소모되는 시약 보충 및 반응 후 부산물 처리 등의 과정이 수월하다. 유기물질 분해에 대한 메커니즘 및 수처리 분야 응용에 대하여 토의하였다.
Neurospora crass에서 L-ascorbic acid 합성 효소는 mitochondria에 위치하며 배지에 D- glucono-${\gamma}$-lactone과 L-gluno-${\gamma}$-lactone을 첨가하였을 때 각각의 기질에 대한 효소 활성도가 증가함을 볼 수 있었다. 이 효소의 순수 분리에는 ammonium sulfate 분획, DEAE-Sepharose CL-6B 에 의한 이온 교환 크로마토그래피, Sephacryk S-200에 의한 gel filtrarion 크로마토그래피, Reactive yellow 3-agarose dye column 크로마토그래피 등의 방법들이 이용되었다. 그 결과 2.1%의 수율에 specific activity가 239.6배 증가되었다. Sephacryl S-200 gel filtration을 통해 본 이 효소의 분자량은 약 150,000 dalton 이었다. 그리고 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis를 실시하였을 때는 분자량이 약 75,000 dalton이었으므로 이 효소는 동일한 단위체로 구성된 이합체로 생각되었다. 이 효소의 최적 반은 pH는 9.0으로 나타났으며 D-glucono-${\gamma}$-lactone을 기질로 하였을때의 $K_m$값은 0.073이었다.
본 연구는 probiotics를 이용해 흑마늘 발효물을 제조하고 그 품질특성 및 생리활성을 확인하기 위하여 흑마늘을 20% 첨가한 배지에 9종의 probiotics를 각각 접종하여 생육정도를 분석한 결과 L. rhamnosus, L. paracasei subsp. paracasei, L. casei, L.plantarum 균주가 흑마늘 혼합 배지에서 성장이 우수하였다. 선발된 4종의 균주 각각을 이용하여 흑마늘이 10, 20 및 30% 첨가된 흑마늘 발효물을 제조하여 제조 직후와 발효 12, 24, 48 및 72시간에 시료를 취하여 생균수, pH, 산도, S-allyl cysteine (SAC) 함량을 측정하였으며, 발효전과 발효 72시간 후 발효물을 동결 건조한 시료를 이용하여 RAW 264.7 세포에서 nitric oxide (NO)와 reactive nitrogen species (ROS) 생성억제능을 통해 생리활성을 확인하였다. L. Plantarum으로 발효하였을 때 흑마늘의 첨가량이 증가하여도 높은 생균수를 유지하였다. 발효시간이 경과할수록 pH는 낮아졌고, 산도는 증가하는 경향을 나타내었다. SAC의 함량은 흑마늘의 첨가 비율이 높을수록 더 높았으며, 발효 24~48시간에 증가하였다가 이후에는 감소하는 경향이었는데, 흑마늘을 30% 첨가하여 L. paracasei subsp. paracasei 균주로 72시간 발효하였을 때 238.2 mg/l로 가장 SAC 함량이 높았다. RAW 264.7 세포에 LPS로 염증을 유발하여 NO 생성 억제능을 확인한 결과 L. rhamnosus로 발효하였을 때 다른 균주 발효물에 비해 활성이 높았는데, 흑마늘을 10% 첨가하여 72시간 발효하였을 때 LPS 처리구에 비해 약 53%의 NO 생성 억제능을 보여 가장 활성이 우수하였다. 생체내 항산화활성 평가를 위하여 과산화수소로 유발된 ROS 생성 억제능을 확인한 결과 L. plantarum 균주로 발효한 발효물에서 유의적으로 활성이 높았다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 발효균주에 따라 흑마늘 발효물의 특성이 서로 상이하므로, 원하는 활성에 부합하는 균주를 사용하거나 혼합균주를 사용하여 발효물을 제조하는 것이 바람직할 것으로 판단된다.
본 연구에서는 예산군에 위치한 질산성 질소 오염 지하수 부지를 대상으로 오염지하수의 지중정화현장 적용성 평가를 수행하고자, 영가철/바이오 환경정화소재를 이용한 Injected PRB(Permeable Reactive Barrier)와 관측정을 현장 오염지하수부지에 적용하고 주요 정화지표에 대한 변화를 모니터링하였다. 질산성질소, 아질산성질소, 암모니아성질소, 철 이온, TOC, 탁도 등의 항목 등을 조사하고 미생물 분석을 실시하여 지중정화기술의 현장 적용성을 평가하였다. 연구대상 부지는 농경지역으로 북쪽 경계는 하천이 서쪽에서 동쪽으로 흐르며 하천 경계를 형성하고 남쪽은 불투수 경계로 이루어져 있다. 질산성질소는 전반적으로 지하수 흐름과 유사하게 하천으로 흐르는 것으로 분석되었다. 모델링 결과, 약 3년에서 5년정도 경과 후 안정 상태로 도달하는 것으로 판단되었다. 이는 추가적인 오염원 유입이 없는 현재 상태만 고려한 것으로 지속적 오염이 유입된다면 오염범위 및 안정화 기간이 증가할 수 있다. 모니터링 결과, PRB설치 전, 후 철 이온, TOC, 탁도 값이 큰 차이를 보이지 않아 PRB의 음용수 관정 영향은 없는 것으로 판단되어 해당 지중정화기술의 지중 주입 적합성을 확인하였다. 질산성질소는 PRB 설치 42일 차까지 5 mg/L보다 낮은 농도가 유지되었으나 84일 차부터 PRB 내부의 질산성질소 제거 유효 기간이 끝나 원래의 농도를 회복하였다. PRB 설치 후 아질산성 질소와 암모니아성 질소의 검출은 PRB에 의한 질산성 질소의 환원에 의한 감소를 보여주었으며, 미생물 분석 결과 종 다양성이 증가하고 탈질 미생물을 포함하고 있는 Betaproteobacteria Class 군집이 크게 증가한 결과는 질산성 질소가 생물학적 환원작용에 의한 정화 가능성도 보여주었다.
Aamylin or islet amyloid polypeptide (IAPP) is a peptide synthesized and secreted with insulin by the pancreatic β-cells. A role for amylin in the pathogenesis of type 2 diabetes (T2D) by causing insulin resistance or inhibiting insulin synthesis and secretion has been suggested by in vitro and in vivo studies. These studies are consistent with the effect of endogenous amylin on pancreatic β-cells to modulate and/or restrain insulin secretion. Here, we reported the correlation between amylin and insulin in rat insulinoma inS-1e cells by treating 2-deoxy-ᴰ-glucose (2-DG) and/or mannose. Cell viability was not affected by 24 h treatment with 2-DG and/or mannose, but it was significantly decreased by 48 h treatment with 5 and 10 mm 2-DG. in the 24 h treatment, the synthesis of insulin in the cells and the secretion of insulin into the media showed a significant inverse association. in the 48-h treatment, amylin synthesis vs. the secretion and insulin synthesis vs. the secretion showed a significant inverse relation. The synthesis of amylin vs. insulin and the secretion of amylin vs. insulin showed a significant inverse relationship. The p-ERK, antioxidant enzymes (Cu/Zn-superoxide dismutase (SOD), Mn-SOD, and catalase), and endoplasmic reticulum (ER) stress markers (cleaved caspase-12, CHOP, p-SAPK/JNK, and BiP/GRP78) were significantly increased or decreased by the 24 h and 48 h treatments. These data suggest the relative correlation to the synthesis of amylin by cells vs. the secretion into the media, the synthesis of amylin vs. insulin, and the secretion of amylin vs. insulin under 2-DG and/or mannose in rat insulinoma INS-1E cells. Therefore, these results can provide primary data for the hypothesis that the amylin-insulin relationships may be involved with the human amylin toxicity in pancreatic beta cells.
Kim, Se-Woong;Park, Jong-Im;Jung, Yeon-Gil;Roh, Sangho
Reproductive and Developmental Biology
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제38권4호
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pp.143-146
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2014
Antioxidants, as reactive oxygen species scavengers, are one of the beneficial additives in serum-free defined culture medium. In this study, three separate experiments were performed to determine the effects of 3-hyroxyflavone added to the culture medium on the developmental competence of follicular bovine oocytes during in vitro maturation (IVM) and/or in vitro culture (IVC). The rate of blastocyst developed from oocytes cultured in IVM medium with 3-hyroxyflavone was significantly higher than that from control oocytes (39.0% vs. 26.3%, p<0.001), respectively. However, oocytes cultured in the medium with addition of 3-hyroxyflavone only at IVC period did not show significance in the blastocyst development when compared with control. When 3-hyroxyflavone was added to both IVM and IVC media, the rate of blastocyst formation was even significantly lower (21.1%) than control (26.5%; p<0.05). The present findings suggested that antioxidative activity of 3-hydroxyflavone added to only IVM medium beneficially affected the developmental competence of follicular bovine.
Chitosan and CA/BTCA were employed in order to induce crosslinking in the fiber for the improvement of wrinkle recovery of the cotton fabrics and the endowment of anti-microbial functions to the fabric. The treated fabrics were dyed by using reactive dyestuff and their dyeing behaviors were investigated. As a result, the fabric treated with chitosan only exhibited more dye-uptake amount than the untreated fabric, and the treated and untreated fabrics together showed excellent light-fastness and wash-fastness. In the cases that CA or BTCA was added to the chitosan, the CA-treated showed better dye-uptake and dyeing properties as light-fastness than the BTCA-treated. In conclusion, it is possible to maintain the dye-uptake level at reduced treatment cost when the CA is employed as a substitute cross-linking agent for BTCA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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