Five pigs industry with outbreaks of transmissible gastroenteritis(TGE) in Gyeongbuk province were investigated during the period from January to December 2000. The typical signs of TGE in piglets had transient vomiting and a watery yellowish diarrhea, rapid loss of weight, dehydration and high mortality in pigs under 2 weeks of age. Clinical signs of TGE in growing and finishing pigs and sows were usually limited to inappetence and diarrhea for one or a few days, with vomiting observed in an occasional animal. The detection of TGE viral antigen in epithelial cells of the small intestine had been used in indirect fluorescent antibody test (IFA) for diagnosing TGE in young pigs. WかR had been successfully used to detect the DNA derived from TGEV in specimen of intestinal swabs. Among 5 pigs industry, four showed typical signs of epizootic TGE and one progressing enzootic TGE. It was 22~53 days that the duration of initial clinical disease in TGE outbreaks of pigs investigated in Gyeongbuk province in 2000. However the duration related directly to herd size. Mortality of piglets under 2 weeks of age for duration was 53.2~88.2%, but that of piglets 2~5 weeks of age was 2.5~6.5%. The piglets of 1 weeks of age died mostly during duration of TGE, but varied considerably with husbandry and other environmental factors.
An indirect double antibody enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for rapid detection of a new virus isolated from abnormally swimming salmonid fish, RVS (Retrovirus of salmonid). Results using brain tissue homogenates, and infected cell cultures are described. The sensitivity of the methods is $10^{2.6}$$TCID_{50}/100{\mu}l$ of the examined cell culture fluid. The specificity was confirmed by the ELISA inhibition test and virological examinations. Viral antigen could be detected in artificially infected fish tissue homogenates. The assay will allow the diagnosis of RVS-infected fish within a day.
Monoclonal antibody (mAb)-based enzyme immune-slide assay (EISA) was used for the detection of Peste des petits ruminants (PPR) virus from field samples collected from a natural outbreak. The clinicopathological study was undertaken to diagnose the case primarily of PPR. Antigen was detected from discharges and faeces of infected goats and swabs of postmortem lesions prepared on glass slide or glass plate using acetone fixation. Nasal discharge collected at the early stage of disease course or lung is an appropriate ante- or postmortem sample for this technique, respectively. Convalescent polyclonal sera collected from recovered animals which were diagnosed as PPR by EISA showed high antibody titer against PPR by C-ELISA, demonstrating the satisfactory specificity of the test. Therefore, EISA is a sensitive and specific assay to confirm PPR infection both in field and laboratory conditions and especially suitable for developing country.
Salmonellosis caused by a number of serotypes of Salmonella is an infectious, acute or chronic, zoonotic disease and characterized by enteritis and diarrhea, septicemia in animal. In these studies we investigated the prevalent serotypes of Salmonella causing animal salmonellosis in Korea and the 71 strains of Salmonella spp. were isolated from materials such as mesenteric lymph nodes, fecal samples from slaughtered animal. With the identification test results, the most prevalent serotypes were, in order, S stanley 31 strains (43.7%), S typhimurium 19 strains (26.8%) and S montevideo 11 strains (15.5%), respectively. And we could establish the method for detection of antibodies to broad variety of Salmonella serotypes. Lipopolysaccharide(LPS) antigen extracted from Salmonella was more sensitive and specific than outer membrane protein antigen from that for detection of Salmonella antibody by using an indirect ELISA. The optimal concentration of antigen was 100ng/ml of LPS, the dilutions of conjugate and serum were 1 : 1,000~2,000 and 1 : 200~400, respectively. The mix LPS-ELISA which was used by mixing LPS from S typhimurium (group B), S choleraesuis (group C) and S enteritidis (group D) were more rapid and effective than that used LPS from individual strain for detection of Salmonella serogroup O4, O7 and O9 antibody at the same time. We could obtain the high values of optical density ($0.73{\pm}0.32$) by mix LPS-ELISA on the farm which had occurred salmonellosis, but very low values of $0.17{\pm}0.06$ on the negative farm of salmonellosis. So, the mix LPS-ELISA may be used to monitor the serological surveillance for the presence of infection with a number of serotypes of Salmonella and would be useful for prevention and control of salmonellosis in animal.
Kim, Jae-Seok;Lee, Su-Kyung;Ko, Dae-Hyun;Hyun, Jungwon;Kim, Hyun Soo
Annals of Laboratory Medicine
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v.39
no.1
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pp.50-57
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2019
Background: The Automated Fluorescent Immunoassay System (AFIAS) rotavirus assay (Boditech Med Inc., Chuncheon, Korea) is a new rapid antigen test for rotavirus detection. We evaluated the performance of this assay for detecting rotaviruses and their specific genotypes in clinical stool samples. Methods: AFIAS rotavirus assay was performed in 103 rotavirus-positive and 103 rotavirus-negative stool samples (confirmed by both PCR and ELISA), and its results were compared with those of PCR, ELISA, and immunochromatographic assay (ICA). We evaluated diagnostic sensitivity/specificity, the detectability of rotavirus subtypes, lower limit of detection (LLOD), reproducibility, cross-reactivity, and interference of AFIAS rotavirus assay. Results: Based on PCR and ELISA results, diagnostic sensitivity and specificity of the AFIAS rotavirus assay were both 99.0%. LLOD results showed that the AFIAS assay had sensitivity similar to or greater than ICA and ELISA. High reproducibility was confirmed, and no cross-reactivity or interference was detected. This assay could detect genotypes G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[6], G4P[8], G8P[4], G8P[8], G9P[4], and G9P[8]. Conclusions: The AFIAS rotavirus assay showed high reproducibility, sensitivity, and specificity as well as excellent agreement with ELISA, PCR, and ICA. It detected the most common as well as unusual genotypes of rotavirus prevalent in Korea. It could be a useful onsite assay for rapid, convenient, and cost-effective detection of rotavirus infection.
Kim, Tae-jong;Kim, Yun-sik;Kim, Jae-chun;Yoon, Wha-joong;Lee, Won-chang;Shin, SJ;Chang, YF
Korean Journal of Veterinary Research
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v.37
no.2
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pp.349-358
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1997
Mycobacterium paratuberculosis is the etiologic agent of Johne's disease, a chronic inflammatory bowel syndrome in ruminants. The attempts to control or eradicate the disease were severely hampered by the inadequacies of present diagnostic methods. The first purpose of this study was to detect Johne's disease out of 577 cows in the province of Kyunggi, Chungchong, Gangweon and the second purpose was to compare the results of non-absorbed ELISA, absorbed ELISA, PCR, and conventional culture methods. The third purpose was to increase diagnostic specificity, accuracy and rapidity. When non-absorbed ELISA test was conducted with Mycobacterium paratuberculosis antigen, the prevalence of positive was 10.9%. To increase diagnostic specificity, absorbed ELISA test with Mycobacterium phlei was used. In this test, the positive prevalence was 1.7%. For the specific detection of Mycobacterium paratuberculosis, PCR was applied to bacterial culture obtained from fecal samples of cattle. The DNA sequences derived from IS900 were used to prepare DNA primers for detection and identification of Mycobacterium paratuberculosis by PCR. PCR for M paratuberculosis isolated from fecal cultures amplified specific target DNA. PCR was much more rapid than that obtained by conventional culture technique in diagnosis of Johne's disease.
African swine fever (ASF) is a highly contagious disease of domestic pigs and wild boars (WBs). Without a vaccine, early antibody and antigen detection and rapid diagnosis are crucial for the effective prevention of the disease and the employment of control measures. In Sardinia, where 3 different suid populations coexisted closely for a long time, the disease persists since 1978. The recent ASF eradication plan involves more stringent measures to combat free-ranging pigs and any kind of illegality in the pig industry. However, critical issues such as the low level of hunter cooperation with veterinary services and the time required for ASF detection in the WBs killed during the hunting season still remain. Considering the need to deliver true ASF negative carcasses as early as possible, this study focuses on the evaluation and validation of a duplex pen-side test that simultaneously detects antibodies and antigens specific to ASF virus, to improve molecular diagnosis under field conditions. The main goal was to establish the specificity of the two pen-side tests performed simultaneously and to determine their ability to detect the true ASF negative carcasses among the hunted WBs. Blood and organ samples of the WBs hunted during the 2018/2019 hunting seasons were obtained. A total of 160 animals were tested using the pen-side kit test; samples were collected for virological and serological analyses. A specificity of 98% was observed considering the official laboratory tests as gold standards. The new diagnostic techniques could facilitate faster and cost-effective control of the disease.
Lee, Jun Yeol;Lee, Sol;Kim, Han Sung;Kim, Kwang Nam
Pediatric Infection and Vaccine
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v.24
no.1
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pp.31-36
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2017
Purpose: This study aimed to examine the accuracy of rapid influenza diagnostic tests (RIDT) in children with an influenza-like illness and to evaluate factors associated with greater accuracy. Methods: Pediatric patients, who visited Hallym University Sacred Heart Hospital with an influenza-like illness between June 2011 and May 2016, were enrolled in this study. We tested 798 samples using a real-time polymerase chain reaction (PCR) for respiratory viruses and compared the results with rapid influenza tests. Results: In comparison with the results of the multiplex PCR, the positive agreement rates of RIDT for influenza A and B virus were 75.7% and 60.0%, respectively. The performance of RIDT varied according to days after fever onset. The positive agreement rates of RIDT for influenza A and B tests, performed within 4 days of fever onset, were 77.6% and 73.2%, but the rates for tests performed more than 5 days after fever onset were 66.7% and 21.4%, respectively. Conclusions: The RIDT is a quick and simple aid to diagnosis, but is less sensitive than the labeled sensitivity. Moreover, test performance varied according to days after fever onset. Test specimens for RIDT should be collected as soon as possible after the onset of symptoms (less than 4 days).
Yang, Song I;Han, Mi Seon;Kim, Sun Jung;Lee, Seong Yeon;Choi, Eun Hwa
Pediatric Infection and Vaccine
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v.26
no.2
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pp.81-88
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2019
Purpose: Early detection of Mycoplasma pneumoniae is important for appropriate antimicrobial therapy in children with pneumonia. This study aimed to evaluate the diagnostic value of a rapid antigen test kit in detecting M. pneumoniae from respiratory specimens in children with lower respiratory tract infection (LRTI). Methods: A total of 215 nasopharyngeal aspirates (NPAs) were selected from a pool of NPAs that had been obtained from children admitted for LRTI from August 2010 to August 2018. The specimens had been tested for M. pneumoniae by culture and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Tests with Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$ were performed and interpreted independently by two investigators who were blinded to the culture results. Results: Among the 215 NPAs, 119 were culture positive for M. pneumoniae and 96 were culture negative. Of the culture-positive specimens, 74 (62.2%) were positive for M. pneumoniae by Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$, and 92 of the 96 (95.8%) culture-negative specimens were negative for M. pneumoniae by Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$. When culture was used as the standard test, the sensitivity and specificity of Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$ were 62.2% and 95.8%, respectively. Additionally, the positive predictive value, negative predictive value, and overall agreement rates with Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$ were 94.9%, 67.2%, and 77.2%, respectively. Conclusions: A positive test result of Ribotest $Mycoplasma^{(R)}$ suggests a high likelihood of culture-positive M. pneumoniae infection. However, a negative test result should be interpreted with caution because nearly one-third of negative test results reveal culture-positive M. pneumoniae infections.
The study was undertaken to evaluate sensitivity and specificity of rapid Avian Influenza (AI) and Newcastle Disease virus (NDV) combo antigen kits from field samples of domestic (broiler and layer chicken, native chicken) and semi-domestic (duck, goose, pigeon and quail) birds of Bangladesh. Samples were collected from naturally infected AI suspected domestic and semi-domestic birds of five different outbreak areas in Bangladesh. From each area two birds were selected for sampling, and from each bird three types of samples (tracheal, cloacal and oro-nasal swabs) were collected. A total of 210 field samples from a total of 70 birds were collected and tested using AI and NDV combo antigen rapid diagnostic kits in the study. All three different samples from a bird showed similar pattern of reaction. Out of 210 samples, 15 samples (5 birds), 63 samples (21 birds) and 27 samples (9 birds) were positive for AIV, NDV and both for AIV and NDV, respectively; whereas the remaining birds were negative for either AIV or NDV in this screening test. Among the five AIV positive, a layer chicken from wet market in Mymensingh, Netrokona, Gibandha and Kurigram and a native chicken from wet market in Kurigram area was positive to AIV. The semi-domestic birds are either positive to NDV or free from both AIV and NDV. This study revealed that the AIV and NDV rapid diagnostic kits could be effectively use to diagnose the respective virus in trachea, oro-nasal and cloacal samples simultaneously. AIV-NDV combo Ag test result clearly indicates that the test kit designed for AIV and NDV could diagnose the disease rapidly with less effort and higher scientific know how which could be used for the detection of AIV and NDV using field samples in large scale.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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