The aim of this study was to compare the results of morphological phenotypic examination and molecular biological method, randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) using clinical isolates from Korean patients infected with dermatophytes. A total of 44 clinical isolates have been collected by Korean Collection Medical Fungi (KCMF) and those were subjected for the RAPD analysis. The results showed that the fungal strains that have RG1 band patterns were identified as Trichophyton rubrum by the neighbour-joining analysis. Additionally, other fungal strains that have RG3 band patterns were identified as Epidermophyton floccosum and RG5 band patterns were identified as Micorsporum gypseum. Even though molecular biological method such as RAPD are not necessary, it might be useful when some strains have similar morphological characteristics or when same species has phenotypic variations. In this study, therefore, we targeted internal transcribed spacer (ITS) regions of fungal rDNA, performed RAPD and then compared with morphological phenotypic examination.
Taxonomic position of 46 Korean isolates of Rhizoctonia solani which were classified into nine intraspecific groups by anastomosis and cultural characteristics was analyzed by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and sequence analyses of the internal transcribed spacer (ITS) regions of ribosomal DNA. All the isolates within each group showed highly similar band patterns in RAPD. The ITS regions of the isolates within the same groups showed a high level of sequence similarity above 96.0% whereas similarities among different groups were below 94.4%. When compared with several reference strains of R. solani from foreign countries, all the Korean isolates were clustered with the foreign isolates belonging to the same groups in the phylogenetic tree. All six Korean strains of AG-4 were identified as HG-1 out of 3 subgroup of AG-4. We discussed taxonomic position of Korean isolates of R. solani and showed that sequence analysis with ITS regions could be a rapid and useful method for identification of intraspecific group of R. solani.
The genetic variations in three major river populations viz. the Halda, the Jamuna and the Padma of the Indian major carp, Catla catla were analyzed by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers. Four decamer primers were used for amplifying DNA of 10 individuals from each population. The proportion of polymorphic loci and the gene diversity estimates were 59.4 and 0.20 for the Halda, 37.5 and 0.14 for the Jamuna and 46.9 and 0.16 for the Padma populations respectively indicating the existence of a relatively high level of genetic variation in the Halda river population. The inter-population similarity indices, gene flow and genetic distance values indicated that the Jamuna-Padma population pair of catla was genetically closer than the Halda-Jamuna and the Halda-Padma population pairs in compliance with the geographical distances among them. The coefficient of gene differentiation ($G_{ST}$=0.13) reflects some degree of genetic differentiation among three populations of catla studied. The data suggest that the RAPD technique could be used to discriminate different river populations of catla.
꽃도라지(Eustoma grandiflorum) 조직배양시 발생한 5개의 변이체와 모본을 이용하여 PCR 반응으로 나타난 RAPDs 밴드 형태로 유전적인 변이 유무를 확인하려고 하였다. 6개의 분류군은 엽수, 옆모양, 줄기직경, 초장 그리고 옆면적과 같은 형태적인 특징이 달랐다. 실험한 20개의 임의 primers 중에서 모본과 변이체에서 모두 밴드를 나타낸 5개 PCR 반응에서 증폭밴드는 총 34개였으며 64.7%의 다형성을 나타냈다. 밴드의 유무를 코드화하여 NTSYS-PC (ver. 1.5)분석으로 나타난 변이체들의 유전적인 거리값의 차이가 변이체인 5개체와 정상 식물체간 비유사성 계수는 0.72에서 0.91로 밀접한 유사성을 나타냈으며 거리값이 0.79에서 두 그룹으로 나뉘어졌기 때문에 변이체의 형태적인 차이와 거의 일치되는 유전적인 차이를 나타냈다.
Genomic DNA from the muscle of marsh clam (Corbicula leana) from Gochang, Muan and a Chinese site was extracted to identify genetic differences and similarity by randomly amplified polymorphic DNAs-polymerase chain reaction (RAPD- PCR). Out of 20 primers, seven primers produced amplified fragments which were consistently polymorphic. A total of 1,246 amplified products were produced of which 530 were polymorphic $(42.5\%)$. The number of polymorphic bands produced per primer varied from 40 to 122 with an average of 75.7 in marsh clam from Gochang. 3.28 of the 23.0 polymorphic bands per lane were found to be polymorphic. Also, about $4.34\%$ of total polymorphic bands were specific to marsh clam from Gochang. The major common bands of 0.28 kb generated by primer OPB-15 (GGAGGGTGTT) were present in every individuals, which were polymorphic. This common bands in every individuals should be diagnostic of specific strains, species and/or their relatedness. Primer OPB-19 (ACCCCCGAAG) produced the highest number of 12 specific bands. The intra-population variation was revealed in the band patterns identified by this primer. The random primer OPB-12 (CCTTGACGCA) yielded the amplified fragments which were consistently polymorphic between the marsh clams from Gochang and from Muan. This primer produced a total of 77 polymorphic bands: 31 bands from Gochang, 14 from Muan and 32 from the Chinese populations. An average of polymorphic bands were 1.8 from Gochang and 2.5 from the Chinese populations. This value obtained from the Chinese population was higher than those from the two domestic populations. Generally, the RAPD polymorphism generated by these primers may be useful as a genetic marker for strain or population identification of marsh clam.
피속 잡초 수집종 33종을 대상으로 RAPD marker를 이용하여 피 수집종 간의 유전적변이를 알아보고, 수집종들을 판별할 수 있는 DNA marker를 선발하기 위하여 본 실험을 수행한 결과를 요약하면 다음과 같다. Operon사에서 제작된 74개의 10-mer RAPD primer 가운데에서 명확한 다형성을 보이는 6개 primer를 선발하였다. 이들 primer로 PCR에서 증폭된 밴드는 31개이었으며 이 가운데 다형성을 나타내는 band는 26개(83.9%)로 나타났다. 피 수집종 간의 유연 관계를 분석한 결과 공시된 피 수집종은 크게 3그룹으로 분류할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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