• 한국버섯학회지
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• 제12권3호
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• pp.226-231
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• 2014

본 연구는 큰느타리버섯의 고온적응성 형질에 관련된 SCAR marker를 개발하기 위해 수행되었다. operon 사의 OPA(20개), OPB(20개), OPL(20개), OPP(20개), OPR(20개), OPS(20개) 등 총 120개 primer를 random primer(10 mer)로 사용하여 대립 계통 7종과 고온성 계통 7 종을 대상으로 RAPD를 이용한 bulked segregant analysis를 실시하여 OP-A06 primer로부터 대립 계통에는 나타나지 않고 고온성 계통에만 나타나는 특이적인 RAPD 밴드를 얻었다. OP-A06 primer를 이용한 RAPD 결과, 약 385 bp 부근에서 고온성 계통에 특이적인 DNA 밴드가 관찰되었으며 이 DNA 밴드의 염기서열 말단을 근거로 SCAR 마커로 사용할 specific primer인 OP-A06-1-F와 OP-A06-1-R를 디자인하였다. SCAR 마커 OP-A06-1-F/-1-R primer를 이용하여 PCR을 수행한 결과에서도 385 bp 부근에서 대립 계통과 구별되는 DNA 밴드가 고온성 계통에서 확인되었으며 random primer인 OP-A06 primer를 이용하여 PCR을 수행했을 때보다 재현성이 높고 진한 DNA 밴드임을 확인할 수 있었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제12권1호
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• pp.31-35
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• 2004

국내에서 육성 또는 외국에서 도입되어 재배되고 있는 고추냉이 (Wasabia japonica Matsum.) 7품종의 10개체와 울릉도 자생 1개체, 총 11개체에 대한 유연관계 분석을 위하여 RAPD분석을 실시하였다. RAPD분석에 사용한 random primer는 총 50종류였으며 screen 결과 21종류만이 11품종 전체에서 반응을 보였다. 21종류의 primer로부터 관찰된 밴드는 총 144개였으며 이중 다형화 (polymorphism)를 보이는 앤드는 68개 (47.2%)로 primer 한 개당 평균 3.2개의 다형화 밴드를 보였다. Primer별 밴드의 수는 $2{\sim}13$개로 다양하게 나타났고 평균 밴드의 수는 6.8개였다. 유집분석 결과 phenogram은 유사도지수 $0.81{\sim}0.96$의 높은 범위 내에서 11개체들이 단계통군으로 유집되었으나 품종내 개체간에는 뚜렷하게 유집되지 않았다. 울릉도에 자생하는 개체의 경우는Sayatori와 Himenisiki 품종을 제외한 나머지 8개체를 위한 자매군으로 유집되었다. 이러한 결과는 neighborjoining 분석에서도 같은 경향을 보였다. 따라서 고추냉이의 종내 유연관계 분석을 위한 방법으로 RAPD법은 유용하지 않은 것으로 나타났으며 좀더 정확한 유연관계분석을 위해서는 AFLP방법이나 계통분류에 널리 이용되는 핵, 업록체 DNA의 유전자 염기서열 비교와 같은 정밀한 분자계통학적 연구가 수행되어져야 할 것으로 사료된다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제39권1호
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• pp.5-12
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• 2000

임의증폭 다형 DNA(RAPD)와 미토콘드리아 12S, 16S rRNA 유전자의 제한단편 DNA 표식자에 의해 한국에서 발생하는 담배가루이 개체군들의 biotype을 판별하였다. 진천의 장미 온실과 서울 내곡동의 포인세티아 온실에서 발생한 담배가루이는 일본, 이스라엘, 호주의 B biotype 과 동일한 DNA 단편들을 보유하였다. 여러 지역의 노지 콩 (Glycine max), 고구마 (Ipomea batatas), 들깨 (Perilla frutescens)에서 채집된 담배가루이 개체군들은 일본 시코쿠의 인동덩굴(Lonicera japonica)에서 채집된 담배가루이와 같은 DNA로 표식되었다. 이들 non-B biotype은 한국, 일본 등 극동아시아 지역에 고유한 계통으로 보인다. 최근 한국에서 발견된 담배가루이 Bemisia tabaci(Gennadius)의 주사전자현미경 관찰에 의한 형태적 특정을 온실 원예작물의 주요해충인 온실가루이 Trialeurodes vaporariorum (Westwood)와 비교하여 기재하였다.

• Journal of Microbiology
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• 제38권3호
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• pp.137-144
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• 2000

The genetic relationship of six Lactobacillus strains and five laboratory isolated form fermented milk were determined by a random amplified polymorphic DNA(RAPD)-Polymease chan reaction (PCR) method. With 42 random primers. the result were analyzed by using the NTSYS-PC software for phenetic analysis. it revealed that all tested bacteria were divided into three distinct clusters. The clusters implied three subgenuses existed for the genus Lactobacillus, which were previously proposed by Rogosa and Sharpe. From the results, it was also possible to determine that the isolated Lactobacillus strains from fermented milk were grouped into L. acidophilus or L. bulgaricus. Interestingly. the three tested L. casei strains were divided into different clusters implying different subgenuses, i.e., Thermobacterium (L. casei YIT 9018) and Streptobacterium(L. casei CHR. Hansen and L.casei ATCC 4646). According to the distance matrix generated by an UPGMA program, the isolated bacteria LT01 and LT02 were determined as a subspecies of L. bulgaricus. The HK01, HK02 and HK03 were very closely related to either L. acidophilus or L. case YIT 9018. Hence, RAPD-PCR appears to be a very practical method to determine the genetic relationships of the Lactobacillus species and to characterize the unknown Lactobacillus strains at the subspecies level.

• 한국균학회지
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• 제38권1호
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• pp.34-39
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• 2010

느티만가닥버섯의 품종구분을 위하여 국내 버섯보존기관으로부터 수집한 30종의 품종에 대한 RAPD 분석을 실시하였다. 이를 위하여 고체배지상의 균사로부터 염색체 DNA를 분리하였고 이를 주형으로 하여 3개의 random primer로 PCR 반응을 수행하였다. 그 결과 각 PCR 반응에서 200 bp에서 3000 bp 범위의 크기를 가진 DNA 밴드 약 30종이 관찰되었다. DNA 밴드 패턴은 UPGMA 방법으로 분석하여 그 결과를 dentrogram으로 나타내었다. 느티만가닥버섯은 2개의 클러스터로 분석되었으며, 클러스터 1은 다시 3개의 작은 그룹으로 나눌 수 있었다. 반면, 클러스터 2의 경우에는 유전적으로 클러스터 1보다 다양한 품종으로 구성되어 있었다. 흥미롭게도 덕유산에서 채집된 야생종 Hm3-10의 경우 어느 클러스터에도 속하지 않는 고유의 품종임을 확인하였다. RAPD 결과 나타나는 품종별 고유의 DNA 밴드를 품종특이적 마커로 개발하기 위하여, Hm0-4 품종의 250 bp 특이밴드를 TA-클로닝하고 염기서열을 결정하였다. 결정된 염기서열을 바탕으로 PCR primer를 디자인하였고 이를 이용하여 PCR 반응을 수행하였다. 그 결과 250 bp DNA 밴드는 Hm0-4 품종에서만 관찰되었으며 이는 이러한 접근법이 품종특이적 마커개발에 잘 적용됨을 보여주는 것이다.

• 한국환경과학회지
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• 제12권12호
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• pp.1293-1301
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• 2003

A species of facultative photo-organotrophic, purple, non-sulfur bacterium was isolated from the 47 point at west and south coast of Korea in September 2001. Separated 13 samples of changes with red color under 28-32$^{\circ}C$, 3000 lux, anaerobe conditions for 7 days cultivated in basal medium. For pure isolation from 13 samples, we used agar-shake tube method (0.4 ％ agar) and separated 5 strains through 13-repetition test. EGH-24 and EGH-30 was identified as the same strain through the RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR of strain EGH-9, EGH-13, EGH-23, EGH-24, EGH-30. Four isolates cultivated in synthesis wastewater for wastewater biodegradation test. EGH-24 was selected with efficient wastwater treating strain. Based on the results obtained from morphology, nutrient requirements, major bacteriochlorophyll content, 16S-rDNA phylogenetic analysis, EGH-24 strain may be identified as a new strain of the genus Rhodobacter and named Rhodobacter sp. EGH-24.

• 한국작물학회지
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• 제54권4호
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• pp.346-350
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• 2009

The cultivated radish (Raphanus sativus L.) is a major vegetable crop in the world wide and fast-growing species that grows inhabitats of six continents. It is very important to determine hybrid seed purity in the production of hybrid Brassica vegetable seeds to avoid unacceptable contamination with self-inbred (sib) seeds. The use of random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers for evaluating seed purity in $F_2$-hybrid radish cultivars demonstrated. One hundred eighty seeds from the F1 male and female harvest were subsequently screened for seed purity using 13 primers. The 13 primers result in 17 cultivar-specific bands and 23 variable RAPD bands scored for cultivar. RAPD analysis of hybrid seeds from the harvest revealed 128 seeds tested except underdevelopment and decayed seeds were sibs. Especially, $F_2$ hybrids of radish, OPC13, OPD20 were presented clear hybrid bands. It maintains higher than average level of genetic diversity compared with their correspondent parents. RAPD amplification of DNA extracted from germinated individuals from the female harvest reveal that 10 of 208 seeds tested were self-inbred (4.8%). RAPD analysis of hybrid seeds from the male harvest revealed 7 of the 208 seeds tested were sibs (3.4%). The RAPD may lead to a better insight in to the hybrid seed purity.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제29권4호
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• pp.207-212
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• 2005

In the present study, we investigated the effects of genotypes on in vitro maturation and fertilization in porcine fresh/frozen-thawed oocytes. The porcine cumulus-oocyte complexes (COCs) were divided into four groups according to whether they were: (1) in vitro matured; (2) cryopreserved and in vitro matured; (3) in vitro fertilized and (4) cryopreserved, and in vitro fertilized. Maturation of porcine COCs was accomplished by incubation in NCSU23 medium. Immature oocytes were cryopreserved by Open Pulled Straws (OPS) method according to Vajta et al., (1998). Oocytes stained by Acetic-Orcein method were observed under the microscope. DNA extracted from the ovaries was analyzed by RAPD (random amplified polymorphic DNA) and SSCP (single strand conformational polymorphisrrt) method. The rates of oocytes maturation and fertilization were significantly high in AA genotype. The results indicated that in vitro maturation and fertilization in porcine fresh/frozen-thawed oocytes may be affected by genotypes in pigs.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제41권4호
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• pp.181-188
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• 2003

A new species of Acanthamoeba was isolated from a freshwater fish in Korea and tentatively named Acanthamoeba sp. YM-4 (Korean isolate YM-4). The trophozoites were $11.0-23.0{\;}{\mu\textrm{m}}$ in length and had hyaline filamentous projections. Cysts were similar to those of A. culbertsoni and A. royreba, which were previously designated as Acanthamoeba group III. Acanthamoeba YM-4 can survive at $40^{\circ}C$, and its generation time was 19.6 hr, which was longer than that of A. culbertsoni. In terms of the in vitro cytotoxicity of lysates, Acanthamoeba YM-4 was weaker than A. culbertsoni, but stronger than A. polyphaga. On the basis of the mortality of experimentally infected mice, Acanthamoeba YM-4 was found to be highly virulent. The isoenzymes profile of Acanthamoeba YM-4 was similar to that of A. royreba. An anti-Acanthamoeba YM-4 monoclonal antibody, McAY7, was found to react only with Acanthamoeba YM-4, and not with A. culbertsoni. Random amplified polymorphic DNA marker analysis and RFLP analysis of mitochondrial DNA and of 18S small subunit ribosomal RNA, placed Acanthamoeba YM-4 in a separate cluster on the basis of phylogenetic distances. Thus the Acanthamoeba Korean isolate YM-4 was identified as a new species, and assigned as Acanthamoeba sohi.

• 한국수산과학회지
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• 제30권2호
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• pp.297-304
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• 1997

한국산과 중국산 피조개를 대상으로 형태적 차이와 RAPD (Random amplified polymorphic DNA) 기법을 이용한 유전적 차이점을 비교 연구하였다. 실험에 사용한 피조개는 경남 진해만에서 천연채묘된 치패와 중국 산동성 영성시에서 인공채묘된 치패를 채집하여 사용하였다. 두 집단의 형태적 차이는 패각형질의 부위별 길이와 무게를 계측하여 계측형질별 상관관계로 조사하였다. 그리고 유전적 차이점은 primer 종류별로 생성된 RAPD band 들간의 유사정도로 비교하였다. 각장에 대한 최대방사능길이의 상대성장율이 두 집단에서 뚜렷한 차이 $(P\leq0.05)$를 나타내어, 중국산이 한국산보다 패각의 후단부가 길다는 것을 알 수 있었다. 방사능의 수는 한국산 피조개가 $36\~41$ 였고, 중국산이 $39\~43$조 였다. RAPD-PCR 결과 19가지의 primer들로 부터 각각 $2\~6$개의 band를 볼 수 있었다. 한국산과 중국산 피조개간의 유전적 유사도는 0.29로 매우 낮아 두 집단 간의 유전적 구별이 명확하게 나타났다. 또한 한국산 피조개 개체별 유전적 유사도는 $0.58\~0.40$로, 중국산은 $0.48\~0.32$로 한 국산 피조개가 중국산보다 개체별 유전적 유사도가 높았다.