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Cellular Dynamics of Rad51 and Rad54 in Response to Postreplicative Stress and DNA Damage in HeLa Cells

  • Choi, Eui-Hwan;Yoon, Seobin;Hahn, Yoonsoo;Kim, Keun P.
    • Molecules and Cells
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    • 제40권2호
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    • pp.143-150
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    • 2017
  • Homologous recombination (HR) is necessary for maintenance of genomic integrity and prevention of various mutations in tumor suppressor genes and proto-oncogenes. Rad51 and Rad54 are key HR factors that cope with replication stress and DNA breaks in eukaryotes. Rad51 binds to single-stranded DNA (ssDNA) to form the presynaptic filament that promotes a homology search and DNA strand exchange, and Rad54 stimulates the strand-pairing function of Rad51. Here, we studied the molecular dynamics of Rad51 and Rad54 during the cell cycle of HeLa cells. These cells constitutively express Rad51 and Rad54 throughout the entire cell cycle, and the formation of foci immediately increased in response to various types of DNA damage and replication stress, except for caffeine, which suppressed the Rad51-dependent HR pathway. Depletion of Rad51 caused severe defects in response to postreplicative stress. Accordingly, HeLa cells were arrested at the G2-M transition although a small amount of Rad51 was steadily maintained in HeLa cells. Our results suggest that cell cycle progression and proliferation of HeLa cells can be tightly controlled by the abundance of HR proteins, which are essential for the rapid response to postreplicative stress and DNA damage stress.

Characterization of UV-damaged repair genes in cells

  • Choi, In-Soon
    • Journal of Life Science
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    • 제10권2호
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    • pp.50-54
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    • 2000
  • The RAD4 gene of Saccharomyces cerevisiae is essential for the incision step of UV-induced excision repair. A yeast RAD4 gene has been previously isolated by functional complementation. In order to identify the RAD4 homologous gene from fungus Coprinus cinereus, we have constructed cosmid libraries from electrophoretically separated chromosomes of the C. cinereus. The 13 C. cinereus chromosomes were resolved by pulse-field gel electrophoresis, hybridized with S. cerevisiae RAD4 DNA, and then isolated homologous C. cinereus chromosome. Here, we report the cloning and characterization of fungus C. cinereus homolog of yeast RAD4 gene. Southern blot analysis confirmed that C. cinereus contains the sequence homologous DNA to RAD4 gene and this gene exists as a single copy in C. cinereus genome. When total RNA isolated from C. cinereus cells was hybridized with the 3.4 kb BglII DNA fragment of the S. cerevisiae RAD4 gene, a 2.5 kb of transcript was detected. The isolated gene encodes a protein of 810 amino acids.

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효모의 재조합 변이주를 이용한 인간 Centromeric Alphoid DNA Repeat의 안정성에 관한 연구 (Stability of Human Centromeric Alphoid DNA Repeat during Propagation in Recombination-Deficient Yeast Strains)

  • 김광섭;신영선;이상엽;안은경;도은주;박인호;임선희;선우양일
    • 미생물학회지
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    • 제43권4호
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    • pp.243-249
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    • 2007
  • Centromere는 채세포분열과 생식세포분열 등 맡은 주요 기능을 담당하는 고도로 분화된 구조이다. Alphoid DNA (${\alpha}$-satellite)는 인간뿐 아니라 모든 영장류의 염색체 내 centromere에서 발견되는 반복서열의 대부분을 차지한다. 인간 인공염색체(Human Artificial Chromosome, HAC)의 개발에서 가장 핵심적인 부분은 centromere의 분리 및 안정적인 유지에 있다. 이 영역은 출아효모에서 alphoid DNA 반복서열을 hook으로 이용하여 Transformation-associated recombination (TAR) cloning법을 사용하여 선택적으로 분리할 수 있다. 이러한 실험방법으로 먼저 repeat array를 rolling-circle amplication (RCA)를 통하여 약 5 kb까지 길이를 연장시킨 후, 효모내에서 상동성재 조합을 이용한 TAR cloning법을 사용하여 분리할 수 있다. 이렇게 분리된 35 kb-50 kb 길이의 4종류의 centromeric DNA repeat arrays (2,4,5,6 mer)를 사용하여, 반복서열의 안정성 유지를 조사하기 위해 상동성재조 합 변이주인 rad51, rad52, rad54를 사용하여 비교 분석하였다. 야생주, rad51과 rad54 변이주를 이용하여 형질전환을 수행한 결과, 반복서열의 크기에 있어서 많은 변화를 나타내었다. 반면, rad52 변이주는 야생주와 다르게 형질전환빈도가 매우 낮은 비율로 나타났으나, centromeric DNA repeat array의 안정성은 3배 이상으로 높게 나타냈다. 이러한 결과들을 미루어, rad52 변이주를 사용하여 centromeric DNA repeat arrays의 형질전환실험에서 발생하는 맡은 변이를 줄일 수 있을 것으로 보인다. 이러한 유전적 방법은 HAC 제작에서 반복서열의 유지에 훨씬 효율적으로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.

ON WEAKLY 2-ABSORBING PRIMARY SUBMODULES OF MODULES OVER COMMUTATIVE RINGS

  • Darani, Ahmad Yousefian;Soheilnia, Fatemeh;Tekir, Unsal;Ulucak, Gulsen
    • 대한수학회지
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    • 제54권5호
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    • pp.1505-1519
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    • 2017
  • Assume that M is an R-module where R is a commutative ring. A proper submodule N of M is called a weakly 2-absorbing primary submodule of M if $0{\neq}abm{\in}N$ for any $a,b{\in}R$ and $m{\in}M$, then $ab{\in}(N:M)$ or $am{\in}M-rad(N)$ or $bm{\in}M-rad(N)$. In this paper, we extended the concept of weakly 2-absorbing primary ideals of commutative rings to weakly 2-absorbing primary submodules of modules. Among many results, we show that if N is a weakly 2-absorbing primary submodule of M and it satisfies certain condition $0{\neq}I_1I_2K{\subseteq}N$ for some ideals $I_1$, $I_2$ of R and submodule K of M, then $I_1I_2{\subseteq}(N:M)$ or $I_1K{\subseteq}M-rad(N)$ or $I_2K{\subseteq}M-rad(N)$.

흉부X선검사(胸部X線檢査)에 있어서 피폭선량(被曝線量)의 경감(輕減)에 대한 검토(檢討) (Reduction of Exposure dose in Cheat Roentgenography)

  • 허준;김창균;강홍석
    • 대한방사선기술학회지:방사선기술과학
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    • 제2권1호
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    • pp.15-22
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    • 1979
  • Author made a experiment on the exposure dose with various intensifying screens in taking chest roentgenogram and obtained the results as follows; 1. Special speed type was the most sensitive intensifying screen, the r(gamma) value of this screen was distributed from 2.6 to 2.9. 2. The resolution activity of intensifying screen was inversely proportional to its sensitivity. If, the sensitivity and detail of the fine detail speed type intensifying screen at 100 KV were 100, those of the special speed type were 549 and 54.44 respectively. 3. If the exposure dose of the fine detail type intensifying screen was 1.0 at 60 KV, that of the special speed type intensifying screen was 0.1 at 80KV, and the skin dose of patient was as follows; it was 64.8 mRad at 60KV in mid speed type, 8.1 mRad at 80KV in super high speed type, and 7.2 mRad at 80KV in special speed type intensifying screen respectively.

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렌티바이러스와 아데노바이러스를 통하여 쥐의 중간엽줄기세포에 사람 나트륨/옥소 공동수송체 유전자를 전달하였을 때의 발현성능 비교 (Comparison of Human Sodium/Iodide Symporter (hNIS) Gene Expressions between Lentiviral and Adenoviral Vectors in Rat Mesenchymal Stem Cells)

  • 박소연;김성진;이원우;이희란;김현주;정준기;김상은
    • Nuclear Medicine and Molecular Imaging
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    • 제42권5호
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    • pp.394-400
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    • 2008
  • 목적: 줄기 세포에서 렌티바이러스와 아데노바이러스를 이용해 유전자를 전달하였을 때 유전자 발현 정도를 정량적으로 비교하는 연구는 보고되지 않았다. 저자들은 쥐의 중간엽줄기세포(이하 rMSC)에 사람 나트륨/옥소 공동수송체 (이하 hNIS) 유전자를 렌티바이러스와 아데노바이러스를 통하여 전달하고 발현 정도를 정량적으로 비교해 보았다. 대상 및 방법: hNIS를 발현하는 rMSE (lenti-hNIS-rMSC)의 생산은 hNIS유전자를 렌티바이러스 벡터인 pLenti/UbC/V5-DEST (Invitrogen)에 클로닝하여 pLenti-hNIS를 얻은 후 rMSC에 감염시켜서 3주간 blasticidin으로 선별하였다. hNIS를 발현하는 재조합 아데노바이러스(Rad-hNIS)는 homologous recombination 방법에 의하여 생산하였으며 Rad-hNIS의 rMSC에 대한 transduction efficiency는 Rad-GFP를 사용하여 MOI 1, 5, 20, 고리고 100에서 평가하였고 그 결과는 각각 $19.1{\pm}4.7%$, $54.0{\pm}6.4%$, $85.7{\pm}8.7%$, 그리고 $98.4{\pm}1.3%$이었다. 두 바이러스 전달 시스템에서 hNIS의 발현정도를 ummunocytochemistry, western blot 그리고 방사성옥소 섭취실험을 통해 평가하였다. 결과: Immunocytochemistry와 western blot으로 hNIS 단백질의 양을 비교하였을 때 lenti-hNIS-rMSC에서 발현하는 hNIS 단백질의 양은 Rad-hNIS를 rMSC에 MOI 20으로 감염시킨 경우보다는 많았으나 MOI 50 보다는 작았다. 그러나 방사성옥소 섭취실험에서 lenti-hNIS-rMSC ($29,704{\pm}6,659\;picomole/10^6\;cells$)는 MOI 100의 Rad-hNIS를 rMSE에 감염시킨 경우($6,168{\pm}2,134\;picomole/10^6\;cells)$ 보다도 높은 섭취율을 보였다. 결론: 렌티바이러스를 통하여 hNIS를 rMSC에서 발현하도록 했을 때 아데노바이러스를 전달 벡터로 사용한 경우에 비하여 단백질 발현 양은 상대적으로 적었으나 hNIS의 기능은 더 우수하였다. hNIS를 리포터 유전자로 사용한 줄기세포추적은 벡터에 따른 유전자 발현효율의 차이를 고려하고 시행되어야 할 것으로 생각한다.

갑상선암 환자에 대한 방사성옥소 치료시 물리적 선량 측정 (Physical Dosimetry in Radioactive Iodine Treatment in the Patients with Thyroid Cancer)

  • 김명선;정내인;이재용;김종순;김종호;이명철;고창순;김희근;강덕원;송명재
    • 대한핵의학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.124-132
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    • 1994
  • 서론 : 방사성옥소는 갑상선암 환자에서 수술요법과 병용하여 많이 쓰이고 있으나 환자에 따라 방사성옥소 흡수량과 배설량, 암조직의 방사성옥소 섭취율이 차이가 나기 때문에 같은 양을 투여하더라도 치료효과나 부작용이 차이가 날 수 있다. 그러므로 본 연구에서는 체내 피폭된 물리적 선량을 측정하여 치료효과와 방사선영향의 정도를 비교하였다. 방법 : 수술요법을 시행한 분화된 갑상선암 환자 27명을 대상으로 하여 100mCi 150mCi, 200mCi의 방사성옥소를 투여하고 BEL DOSIMETRY PROTOCOL에 따라 방사선량을 구하고 반대수 용지위에 혈액 리터당 투여량에 대한 백분율의 로그값, 잔류량 백분율과 시간의 관계를 그래프로 그려 베타선량과 감마선량을 구한 뒤 총 물리학적 선량을 구하였다. 결과 : 1) 100mCi 투여군에서 물리적 선량은 평균 $56.54{\pm}13.02$ rad 이었고 150 mCi 투여군에서는 $76.83{\pm}19.97$ rad, 200mCi 투여군에서는 $95.08{\pm}25.51$ rad 이었고 각 평균값 사이에는 유의한 상관관계가 있었다. 2) 48시간후 체내 잔류율은 평균 26.34% 이었다. 3) 전이여부와 물리적 선량과의 사이에 유의한 상관관계는 없었다. 4) 갑상선 글로불린과 갑상선 자극 호르몬, Thallium scan으로 추적 관찰한 19명중 17명이 치유되었다. 5) 백혈구, 림프구, 호중구, 혈소판 모두 4-6주에 최저치로 감소한뒤 3개월내에 회복되었다. 6) 물리적 선량과 생물학적 선량 사이에 유의한 상관관계는 없었다. 결론 : 우리나라에서 수술후 갑상선암의 치료에 통상적으로 사용하는 방사성옥소의 양(100-200mCi)은 일시적 골수부전과 경도의 염색체 이상을 초래하나 혈액내방사선 조사량이 안전용량 범위(200rad)에 속하며 48시간 후 체내잔류량은 서양인과 큰 차이가 없었다.

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Analysis and Monitoring of Environmental Parameters in a Single-span Greenhouse during Strawberry Cultivation

  • Park, Minjung;Kang, Taegyeong;Yun, Sung-wook;Lim, Ryugap;Son, Jinkwan;Kang, Donghyeon
    • 한국환경과학회지
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    • 제30권11호
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    • pp.907-914
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    • 2021
  • In this study, strawberry cultivation environment in a greenhouse located in Jeonju was monitored and internal environmental parameters were analyzed. Temperature, humidity, RAD, and PPF sensors were installed to monitor environmental conditions in the test greenhouse. Data were collected every 10 minutes during four winter months from sensors placed across the greenhouse to assess its permeability and environmental uniformity. Temperature and humidity inside the greenhouse were relatively uniform with negligible deviations among the center, south, and north; however, it was judged that further analysis of gradients of these parameters from the east to the west of the greenhouse would be needed. Both RAD (Total solar radiation) and PPF (Photosynthetic photon flux) had high values on the south and were low on the north and the reduction rate of these parameters was 54% and 61%, respectively, indicating that a significant amount of light could not be transmitted. This implied a significant decrease in the amount of light entering the greenhouse during winter. Therefore, it is concluded that environmental control devices and auxiliary lighting are needed to achieve uniform greenhouse environment for efficient strawberry cultivation.

Inconel 600 및 690 튜브 재질의 일반 부식에 관한 실험적 연구 (An Experimental Research on Uniform Corrosion of Inconel 600 and 690 Tubing Material)

  • 염유선;황정래;전인섭;김숭평;윤장희
    • 방사성폐기물학회지
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    • 제4권2호
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    • pp.103-116
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    • 2006
  • 본 논문은 국내 PWR 발전소에서 S/G tube 재질로 사용되고 있는 Inconel 600 및 690에 대한 부식 실험을 수행함으로써 작업자들의 주요 피폭원인 $^{58}Co,\;^{60}Co,\;^{51}Cr,\;^{54}Mn,\;^{59}Fe$의 생성량을 예측하고자 하였다. 이를 위해 Inconel 600 및 690 재질로 총 12개의 시편을 제작하여 실제 발전소의 운전조건과 유사하거나 가혹한 조건에서 전면 부식실험을 pH별로 20일씩 총 60일간 수행하였고, 실험 결과를 정량적으로 분석하기 위해 GDS(Glow Discharge Spectrometer) 장비를 사용하였다. GDS 장비를 이용하여 정량적으로 분석한 결과 pH 7 및 9에서는 Inconel 600이 Inconel 690에 비해 부식이 잘 되는 것으로 나타난 반면, pH 4에서는 Inconel 690이 부식이 더 잘 되는 것으로 평가되었다. 이러한 경향을 보이는 것은 과도상태의 영향이 과도하게 반영된 것에 기인한 것으로 비교적 정확한 결론을 도출하기 위해서는 장시간의 부식 실험을 수행함으로써 과도상태에 의한 영향을 최소화해야 할 것으로 판단된다.

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Seismic and progressive collapse assessment of SidePlate moment connection system

  • Faridmehr, Iman;Osman, Mohd Hanim;Tahir, Mahmood Bin Md.;Nejad, Ali Farokhi;Hodjati, Reza
    • Structural Engineering and Mechanics
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    • 제54권1호
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    • pp.35-54
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    • 2015
  • The performance of a newly generated steel connection known as SidePlateTM moment connection for seismic loading and progressive collapse phenomenon has been investigated in this paper. The seismic evaluation portion of the study included a thorough study on of interstory drift angles and flexural strengths based on 2010 AISC Seismic Provisions while the acceptance criteria provided in UFC 4-023-03 guideline to resist progressive collapse must be satisfied by the rotational capacity of the connections. The results showed that the SidePlate moment connection was capable of attaining adequate rotational capacity and developing full inelastic capacity of the connecting beam. Moreover, the proposed connection demonstrated an exceptional performance for keeping away the plastic hinges from the connection and exceeding interstory drift angle of 0.06 rad with no fracture developments in beam flange groove-welded joints. The test results indicated that this type of connection had strength, stiffness and ductility to be categorized as a rigid, full-strength and ductile connection.