• 제목/요약/키워드: RNA degradation intermediates

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MS2 Labeling of Endogenous Beta-Actin mRNA Does Not Result in Stabilization of Degradation Intermediates

  • Kim, Songhee H.;Vieira, Melissa;Kim, Hye-Jin;Kesawat, Mahipal Singh;Park, Hye Yoon
    • Molecules and Cells
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    • 제42권4호
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    • pp.356-362
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    • 2019
  • The binding of MS2 bacteriophage coat protein (MCP) to MS2 binding site (MBS) RNA stem-loop sequences has been widely used to label mRNA for live-cell imaging at single-molecule resolution. However, concerns have been raised recently from studies with budding yeast showing aberrant mRNA metabolism following the MS2-GFP labeling. To investigate the degradation pattern of MS2-GFP-labeled mRNA in mammalian cells and tissues, we used Northern blot analysis of ${\beta}$-actin mRNA extracted from the Actb-MBS knock-in and $MBS{\times}MCP$ hybrid mouse models. In the immortalized mouse embryonic cell lines and various organ tissues derived from the mouse models, we found no noticeable accumulation of decay products of ${\beta}$-actin mRNA compared with the wild-type mice. Our results suggest that accumulation of MBS RNA decay fragments does not always happen depending on the mRNA species and the model organisms used.

전사체와 대사물질 구조분석을 통한 Novosphingobium pentaromativorans US6-1의 dibenzofuran 분해 경로 해석 (Investigation of biodegradation pathway of dibenzofuran by Novosphingobium pentaromativorans US6-1 via transcriptomic and mass-spectrometric analysis)

  • 나혜윤;권개경
    • 미생물학회지
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    • 제54권1호
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    • pp.46-52
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    • 2018
  • 다환 방향족 탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH) 우수 분해균주인 Novosphingobium pentaromativorans US6-1의 dibenzofuran (DBF) 분해경로를 밝히기 위하여 중간대사물질 분석과 전사체 분석을 진행하였다. GC/MS로 중간대사물질을 분석한 결과, 3(2H)-벤조퓨라논이 검출되었는데 이 화합물은 측면 이산소화에 의해 생성된 중간대사산물들의 기본 골격이 되는 물질로써 균주 US6-1에 의한 DBF의 분해가 측면 이산소화로 진행될 가능성을 시사한다. RNA-Seq 분석 결과, 균주 US6-1이 DBF에 노출되었을 때 발현되는 유전자들의 대부분이 lateral dioxygenation과 관련이 있다는 것을 확인하였다. 이상의 결과로부터N. pentaromativorans US6-1에 의해 일어나는 측면 이산소화를통한 DBF 분해경로와 관련 유전자들을 제시하였다.