인삼을 처리온도 및 처리시간을 변수로 하여 열처리한 다음 80% 메탄올로 추출하여 성분 및 생리활성 변화를 분석하였다. 총 폴리페놀 함량은 고온고압처리에 따라 증가하다가 $140^{\circ}C$, 4시간 이후에 감소하였으며, $150^{\circ}C$, 1시간 처리구에서 29.46mg/g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. 총 플라보노이드 함량은 고온고압처리에 따라 증가하다가 $150^{\circ}C$에서는 2시간 처리구에서 4.75mg/g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. $IC_{50}$은 처리온도와 시간이 증가할수록 감소하여 항산화활성이 무처리구(17.68mg/g)보다 증가한 것을 알 수 있었으며, 가장 활성이 높은 처리구는 $140^{\circ}C$, 3시간 처리구로 0.22mg/g으로 나타났다. 4년근 인삼의 조사포닌 함량은 1.18%이었으며, 고온고압처리에 따라 ginsenoside는 대부분 처리온도가 높아질수록, 처리시간이 길어질수록 감소하는 경향을 보였다. $Rg_1$, Re, $Rb_2,\;Rb_3$은 비교적 낮은 온도에서는 안정하였으나 $130^{\circ}C$ 이상의 온도에서는 불안정하여 감소하였다. Rf는 열처리에 비교적 안정하였으며, $Rg_3,\;Rh_2$는 고온고압처리에 의해 새로이 생성되거나 함량이 증가하여 최대 생성 조건은 $130^{\circ}C$에서는 4-5시간, $140^{\circ}C$에서는 2-4시간, $150^{\circ}C$에서는 2시간으로 나타났다.
We previously reported the protein isolated from Coptidis Rhizoma (CRP), which has antifungal activity against a fungal pathogen, Candida albicans. In the current study, we investigated what portion in the CRP is responsible for the antifungal activity. For the investigation, the CRP was fractionated on a Shepadex G-50 column. Data resulting from the fractionation, seven fractions were obtained. Fractions (Fr.) I, II, and III eluted initially from the column showed no inhibitory effect on the growth of C. albicans, whereas Fr. IV, V, and VI eluted later revealed inhibition of the growth, and Fr. IV and VI showed potent antifungal activity by broth susceptibility analysis. However, Fr. VI was contained in the CRP more than Fr. IV, which led us to select the VI for the following experiments. In a murine model of a subcutaneous candidiasis caused by C. albicans, the Fr. VI displayed a therapeutic effect on nude mice pretreated with anti-neutrophil monoclonal antibody (RB68C5) and then infected subcutaneously with live C. albicans. At day 16, these mice were healed almost up to 78% of the infected area when compared to infected area of control nude mice that received diluent (Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline; DPBS), instead of the Fr. VI (P<0.01). The Fr. VI blocked hyphal formation from blastoconidial form of C. albicans (P<0.01), which might prevent penetration of hyphae to the deeper site of skin and thus helps the healing. In the ionic strength test, the effect of Fr. was influenced by $Ca^{2+}$ ion just like other known antimicrobial peptides, but the influence was affected at an extremely high concentration such as 500 mM. Thus, such ion-concentration is considered to be meaningless in the clinical situation. Considering all data together, Coptidis Rhizoma is appeared to produce an antimicrobial peptide that has therapeutic effect on subcutaneous infection caused by C. albicans.
본 연구는 홍삼의 가능성 식품개발을 위한 기초 자료로 활용하기 위하여 추출 시간에 따른 홍삼 부위별 ginsenoside의 함량 변화를 비교하였다. 동체, 지근 및 세근의 총 ginsenoside 최고 함량은 동제 21시간, 지근 18시간, 세근 12시간 추출하였을 때 각각 23.04, 65.68 295.92 mg/100 ml이었고, 추출시간이 증가할수록 ginsenoside의 총량은 감소하였다. Ginsenoside $Rg_1$과 $Rb_1$의 최고 함량은 동제 21시간, 지근 15시간, 세근 12시간 추출하였을 때 각각 5.76, 28.39, 117.83 mg/100 ml 이었고, $Rb_2$와 Re의 함량은 동체 21시간, 지근 18시간, 세근 9시간 추출하였을 때 각각 5.76, 28.39, 117.83 mg/100 ml이었다. 홍삼으로부터의 총 ginsenoside의 추출비율은 동체 21.3%, 지근 21.1%, 세근 67.1%이었다.
생장이 우수한 인삼모상근 세포주 (KGHR-1, KGHR-5, KGHR-8) 및 6년생 인삼근의 부위별로 ginsenoside 양상 및 생성특성을 조사하였다. 인삼모상근 및 6년생 인상근에서 ginsenoslde-Rb$_1$, Rb$_2$, Rc, Rd, Re, Rf, Rg$_1$, Rg$_2$을 확인하였으며, 인삼모상근 세포주간 및 인삼근 부위별로 ginsenoside의 함량은 큰 차이를 나타내었다. 8종류의 ginsenoside함량이 가장 높은 인삼모상근은 KGHR-1 세포주로 17.42 mg/g dry wt와 함량을 나타내었다. 모상근세포주 KGHR-1은 ginsenoside-Rd, Rg$_1$을, KGHR-5는 ginsenoside-Rb$_1$, Rg$_1$을, 그리고 KGHR-8은 ginsenoside-Rd, Re을 상대적으로 많이 생성하는 특징을 지니고 있으며, ginsenoside-Rf의 생성은 매우 낮았다. 6년생 인삼근의 부위별 ginsenoside의 함량은 주근, 지근, 세근순으로 많았으며, 주근에서 ginsenoside-Rc의 생성은 ginsenoside의 50.99%로써 모상근 세포주의 4.90~6.89%보다 매우 높았다. 6년생 인삼근의 총 ginsenoside에 대한 ginsenoside-Rg$_1$의 비율은 3.43~14.18% 수준으로 주근, 지근, 세근순으로 급격히 감소하였으며, 모상관의 17.14~24.43%와 비교할 때 매우 낮은 수준을 나타내었다. 따라서 인삼모상근 배양을 통하여 특정 ginsenosides생산이 가능하리라 생각된다.
본 연구에서는 발효홍삼과 발효하지 않은 홍삼을 BALB/c mouse에 경구투여한 후 혈청을 채취하여 주요 진세노사이드 생체이용율을 LC-MS/MS이용하여 분석하였다. 또한 이들의 항염효과를 IL-1𝛽, TNF 정량분석을 통해 비교하였다. 홍삼을 발효하였을 때, Rd를 포함한 전체적인 총 진세노사이드 함량이 증가하는 것을 확인하였으며, 마우스에게 투여하였을 총 진세노사이드 TG 의 혈액 검출량 AUC 또한 발효홍삼을 섭취하였을 때 높은 것을 확인하였다. Cmax값 또한 동일하게 발효홍삼을 섭취하였을 때 증가하는 것을 확인하였다. 염증지표를 확인 하였을때 유도군과 비교하여 IL-1𝛽, TNF의 감소효과는 확인하였으나 그룹간의 유의적 차이는 발생하지 않았다. 이상의 연구결과로 probiotics가 발효홍삼의 ginsenoside 생체이용율을 향상시키는 중요한 요인임을 확인하였고, 이는 probiotics를 이용한 천연물 발효제제의 적용 확장과 그 산업적 활용성 증대에 기여할 수 있을 것으로 사료된다.
The chemical and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity changes of ginsenoside $Rb_1$-glycine and ginsenoside $Rg_1$-glycine mixtures by Maillard reaction were investigated to identify the role of Maillard reaction in the increased antioxidant activity of ginseng by heat-processing. The DPPH radical scavenging activity of $Rg_1$-glycine mixture was more strongly increased by heat-processing than that of $Rb_1$-glycine mixture. From the analyses of ginsenosides, $Rb_1$ was gradually changed into 20(S)-$Rg_3$, 20(R)-$Rg_3$, $Rk_1$ and $Rg_5$ by heat-processing. $Rg_1$ was gradually changed into 20(S)-$Rh_1$, 20(R)-$Rh_1$, $Rk_3$ and $Rh_4$ by heat-processing. However, the generation of these less-polar ginsenosides was not related to the increased DPPH radical scavenging activity of $Rb_1$-glycine and $Rg_1$-glycine mixtures because their DPPH radical scavenging activities were already significantly increased when dried at $50^{\circ}C$, which temperature induce no structural changes of ginsenosides. In the comparison of browning compound levels of $Rg_1$-glycine and $Rb_1$-glycine mixtures, the extents of Maillard reaction were positively correlated with their increased free radical scavenging activities. Based on the chemical and DPPH radical scavenging activity changes of $Rg_1$-glycine and $Rb_1$-glycine mixtures by heat-processing, we clearly identified that the increased free radical scavenging activity of ginsenoside is mediated by the Maillard reaction between sugar moiety of ginsenoside and amino acid.
구증구포방법은 기존의 홍삼제조방법에서와 같이 9회 반복 과정으로 새로운 신규사포닌 등 성분변화가 일어나지만 시간이 오래 걸리고 복잡하며 어떤 특수 성분이 얼마나 증가 되는지 보고 되어 있지 않다. 또한 기존의 구증구포방법은 제조공정 중 건조시 보통 $60^{\circ}C$에서 열풍건조를 하기 때문에 건조시 관리의 부족으로 간혹 벤조피렌에 노출되는 경우가 있다. 본 방법은 새로운 자동 구증구포방법으로 제조시간이 약 2배정도 단축되며 특히 건조시 습열냉각건조를 통하기 때문에 벤조피렌함량이 거의 검출되지 않았다. 또한 사포닌 변환 등은 기존 구증구포방법과 같이 사포닌 변화가 일어나 홍삼에서만 나타나는 Rg3와 기타 효능활성물질 등이 분석되었다. 인삼사포닌의 경우에는 증포횟수가 증가함에 따라 흡수가 어려운 major ginsenoside(Rg1, Re, Rb1, Rc, Rb2 및 Rd)의 함량이 점차적으로 감소되고 대신 흡수가 빠르고 항암활성이 강한 minor ginsenoside (Rh1, 20(S)-Rg2, 20(R)-Rg2, 20(S)-Rg3, 20(R)-Rg3, Rk1 및 Rg5)의 함량이 점차적으로 증가하였다. 특히 diol계 사포닌인 ginsenosides Rb1, Rb2, Rc 및 Rd는 Rg3, Rk1 및 Rg5로 전환되었고, triol계 사포닌인 ginsenosides Rg1 및 Re는 Rh1, Rg2로 전환되었다. 수삼에서의 환원당, 산성다당체 및 총 페놀 화합물 함량은 7회까지 유의적으로 증가하였고 8회부터 점차 감소하는 경향을 보였다. DPPH 라디칼 소거활성은 7회까지 점차적으로 감소하여 $IC_{50}$값이 68% 감소되는 것으로 나타났으며 7회부터 9회까지는 큰 유의적 차이가 없었다. 결론적으로 본 자동 구중구포방법은 기존의 방법과 물질생성은 거의 비슷하지만 시간이 단축되고 벤조피렌 함량이 거의 검출되지 않아 앞으로 고부가가치 인삼산업에 많은 도움을 줄 것으로 생각된다.
경북 풍기산 원료삼의 증자 및 건조 조건별 홍삼의 품질 및 기능성을 알아보기 위해 5년 근을 대상으로 증자 조건(2.5, 3.5, 4.5시간)과 건조 조건(열풍건조: $60-65^{\circ}C/24$시간, $40^{\circ}C/3-4$일, 동결 건조: $-80^{\circ}C/56$시간, 원적외선건조: $900W/62^{\circ}C/68$시간) 별로 이화학적 특성과 ginsenoside함량을 비교 분석하였다. 시료의 황색 도와 갈변도는 지근이 본근에 비해 높은 수치를 보였으며, 증자시간 3.5, 4.5, 2.5시간의 순으로 그리고, 원적외선건조, 열풍건조, 동결건조의 순으로 높은 수치를 보였다. 증자 및 건조시료의 가용성 고형분, 총 페놀, 총 플라보노이드, 산성다당체, 전자공여능 등의 특성은 3.5시간 증자와 원적외선 건조가 가장 양호한 결과를 보였다. 조사포닌 함량은 증자시간 및 건조방법에 영향을 받지 않았다. 함량이 높은 $ginsenoside-Rg_1$, -Re, -Rf $-Rb_2$, 등은 증자시간이 길어질수록 감소하였으나 $-Rg_3$ 및 $-Rh_2$의 함량은 유의적으로 증가하여 본근은 3.5시간, 지근은 4.5시간 증자시료에서 가장 높은 함량을 보였다(P<0.01). 증자 시료의 건조방법을 ginsenoside 관점에서 고려한다면 동결건조방법(2,824mg%)이 열풍건조(2,669 mg%)나 원적외선건조(2,667 mg%)에 비해 가장 타당한 것으로 판단되며, $ginsenoside-Rg_3$ 및 $Rh_2$의 함량은 동결건조와 열풍건조 간에 유의적인 차이가 없었다.
A novel ${\beta}$-proteobacterium, designated BXN5-$27^T$, was isolated from soil of a ginseng field of Baekdu Mountain in China, and was characterized using a polyphasic approach. The strain was Gram-staining-negative, aerobic, motile, non-spore-forming, and rod shaped. Strain BXN5-$27^T$ exhibited ${\beta}$-glucosidase activity that was responsible for its ability to transform ginsenoside $Rb_1$ (one of the dominant active components of ginseng) to compound Rd. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences showed that this strain belonged to the family Comamonadaceae; it was most closely related to Ramlibacter henchirensis $TMB834^T$ and Ramlibacter tataouinensis$TTB310^T$ (96.4% and 96.3% similarity, respectively). The G+C content of the genomic DNA was 68.1%. The major menaquinone was Q-8. The major fatty acids were $C_{16:0}$, summed feature 4 (comprising $C_{16:1}$${\omega}7c$ and/or iso-$C_{15:0}$ 2OH), and $C_{17:0}$ cyclo. Genomic and chemotaxonomic data supported the affiliation of strain BXN5-$27^T$ to the genus Ramlibacter. However, physiological and biochemical tests differentiated it phenotypically from the other established species of Ramlibacter. Therefore, the isolate represents a novel species, for which the name Ramlibacter ginsenosidimutans sp. nov. is proposed, with the type strain being BXN5-$27^T$ (=DSM $23480^T$ = LMG $24525^T$ = KCTC $22276^T$).
The extent of growth L. plantarum (LP), L. delbrueckii subsp. bulgaricus (LD), L. fermentum (LF), S. thermophilus (ST), B. longum (BI) and S. cerevisiae (SA) was generally good with the lower concentration of the ginseng extract. Total sapogenin content was slightly different with kinds of a fermentation microorganism and the time of fermentation process, and generally reduced compare to before fermentation. The content of ginsenoside Rb1, Rb2, Rb3, Re and Rf were decreased with the fermentation but ginsenoside Rd was increased by the E, LF and SA fermented extract. The content of compound K increased in the order of not-fermented extrac < enzyme fermented extract < enzyme and microorganism fermented extract, and as the fermented time get longer, the content of compound K was sightly increased. Especially, the content of compound K of the SA fermented extract was the most increased, also it of the BI, LD and LF fermented extract was increased, so these extract were considered a high valuable. Polyphenol content of the BI, LD, LP and ST fermented extract indicated $9.18{\pm}0.39{\sim}15.68{\pm}0.54$ mg/10 g which was lower than it of a not-fermented extract ($11.92{\pm}0.26{\sim}28.41{\pm}0.39$ mg/10 g). Flavonoid content of a ginseng fermented extract indicated $26.93{\pm}0.17{\sim}156.45{\pm}1.29$ mg/10 g, it was higher than a not-fermented extract ($18.06{\pm}0.90$ mg/10 g). As the fermented time get longer, the flavonoid content tendency to increase. DPPH radical scavenging activity of a fermented ginseng extract was $24.11{\pm}1.41{\sim}55.62{\pm}0.33%$, it was slightly lower compared to a natural antioxidant, vitamin C. But it of the LF and ST fermented extract was similar to a natural antioxidant, vitamin C. It has not a concerned in a fermentation. Nitrite scavenging ability of a 24 hr fermented extract was above 80% at pH 2.5 and 4.2, it was similar to an artificial antioxidant, BHT ($84.76{\pm}0.13%$; pH2.5, $84.98{\pm}0.11%$; pH 4.2). It has not a concerned in a fermentation. SOD-like activity of a fermented extract was lower than that of a not-fermented extract ($19.22{\pm}0.51%$), but it of the E and LP-fermented extract was a very highly notable value. As the fermented time get longer, the SOD-like activity tendency to increase.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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