This study was carried out to construct mapping population and to evaluate the methods involved, including polymorphic DNA marker system and appropriate statistical analysis. As an initial step to establish chicken genome mapping project, White Leghorn (WL) and Korean Ogol chicken (KOC) were used for generating backcross population. From 8 initial parents, total 280 backcross progenies were obtained and 40 were used for genotyping and linkage analysis. For development of novel polymorphic markers for KOC, Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers specific for this chicken line were generated. Also included in this study were six microsatellite markers from East Lansing map as reference loci. For segregation analysis, 15 RAPD markers and 6 microsatellites were used to genotype the backcross population. Among the RAPD markers that we developed, 2 pairs of markers were identified to be linked and another 4 RAPD markers showed linkage with microsatellites of known map. In summary, this study showed that our backcross population generated from the mating of KOC to WL serves as a valuable genetic resource for genotyping. Furthermore, RAPD markers are proved to be valuable in linkage mapping analysis.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.9
no.2
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pp.207-215
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2004
The present study was carried out to evaluate the ISSR and RAPD markers for their efficiency as genetic marker systems to establish the relationships between 18 mulberry genotypes. A total of 36 from 56 (64%) RAPD primers and 12 from 48 (25%) ISSR primers produced reproducible amplification patterns. A high proportion of polymorphic bands ranging from 44 to 91% was observed respectively with RAPD and ISSR markers. The average Resolving Power (Rp) of ISSR primers was higher than RAPD primers. The ISSR primers, UBC 825, 868 and 873, and RAPD primers, UBC 712, 720 and 729, possessed the highest Rp values and could in each instance distinguish all the 18 genotypes. Similarity matrix values were estimated based on Jaccards coefficient, considering 109 polymorphic ISSR and 212 polymorphic RAPD bands and two dendrograms were constructed. The dendrograms obtained with ISSR and RAPD markers distinguished the eight exotic genotypes from the ten indigenous (Indian) genotypes. A significant correlation value (r=0.959; p=0.001) for the cophenetic matrix between the RAPD and ISSR matrices was observed. The results indicated that the ISSR and RAPD markers could assist in the differentiation of genotypes and permit the determination of genetic distances that might be exploited by mulberry breeders in improvement programs.
Molecular markers have become fundamental tools for crop genome study. The objective of this study was to construct a genetic linkage map for cowpea with PCR-based molecular markers. Five hundred and twenty random RAPD primers were screened for parental polymorphism. Ninety RAPD markers from sixty primers was segregated in 75 F2 mapping population derived from the cross of local cultivars GSC01 and GSC02. 70 RAPD markers were found to be genetically linked and formed 11 linkage groups. Linkage map spanned 474.1 cM across all 11 linkage groups. There are six linkage groups of 40 cM or more, and five smaller linkage groups range from 4.9 to 24.8 cM. The average linkage distance between pairs of markers among all linkage groups was 6.87 cM. The number of markers per linkage group ranged from 2 to 32. The longest group 1 spans 190.6 cM, while the length of shortest group 11 is 4.9 cM. This map is further needed to be saturated with the various markers such as RFLP, AFLP, SSR and more various populations and primers. In addition, morphological markers and biochemical markers should be united to construct a comprehensive linkage map.
Linkage maps based on molecular markers are valuable tools in plant breeding and genetic studies. A population of 76 RI lines from the mating of A3733 and PI437.088 was evaluated with Random Amplified Polymorphic DNA(RAPD) and Simple Sequence Repeats (SSR) markers to create soybean molecular linkage map, 302 RAPD and 21 SSR markers were genetically linked and formed forty linkage groups. These linkage groups spanned a genetic distance of 1,775 cM. The average distance between markers was 5.5 cM.
The genetic relationship was examined with PCR-RAPD markers among three scallop species, Chlamys farreri farreri, Patinopecten yessoensis, and Agropecten irradians. Six primers were selected from 60 primers used to compare PCR-RAPD profiles among species. All primers showed distinct RAPD band patterns between the three species. In Chiamys farreri farreri, the morphological characteristics such as shell size and color were considerably different between the two geographical populations. RAPD profile, however, showed that no significant genetic differences were found between the two geographical populations. Polymorphic alleles were observed within a population of each species. Thus, PCR-RAPD markers are useful in identifying scallop species and in understanding scallop population genetic structure.
From fruiting bodies of L. edodes strain L-54, single-spore isolates (SSIs) were collected. Two parental types of L-54 were regenerated via monokaryotization. By means of random-amplified polymorphic DNA (RAPD), DNA samples from L-54, its two parental types, and 32 SSIs were amplified with arbitrary primers. Dedikaryotization was demonstrated, and 91 RAPD-based molecular markers were generated. RAPD markers that were segregated at a 1:1 ratio were used to construct a linkage map of L. edodes. This RAPD-linkage map greatly enhanced the mapping of other inheritable and stable markers [such as those that are linked to a phenotype (the mating type), a known gene (priA) and a sequenced DNA fragment (MAT)] with the aid of mating tests, bulked-segregant analysis, and PCR-single-strand conformational polymorphism. These markers comprised a genetic map of L. edodes with 14 linkage groups and a total length of 622.4 cM.
The objective of this study was to assess genetic diversity among 6 different wild ginseng populations from New York, Kentucky, North Carolina, Pennsylvania, Tennessee and Virginia, and to compare these wild populations to one cultivated population. RAPD markers were used to estimate the genetic difference among samples from the 7 populations. The 64 random primers were screened, and 15 primers were selected which exhibited the 124 highly reproducible polymorphic markers. The ratio of discordant bands to total bands scored was used to estimate the genetic distance within and among populations. Multidimensional scaling (MDS) of the relation matrix showed distinctive separation between wild and cultivated populations. The MDS result was confirmed using pooled chi-square tests for fragment homogeneity. This study suggests that RAPD markers can be used as population-specific markers for American ginseng.
Srinives, P.;Chowdhury, A.K.;Tongpamnak, P.;Saksoong, P.
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.46
no.2
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pp.112-120
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2001
Genetic diversity of 47 East-Asian vegetable soybean was characterized by means of agro-morphological traits and RAPD markers. A field trial was conducted to evaluate 14 agro-morphological traits. To study RAPD-based DNA analysis, a total of sixty 10-mer random primers were screened. Of these, 23 polymorphic markers in 16 varieties used for screening. Among 207 markers amplified, 48 were polymorphic for at least one pairwise comparison within the 47 varieties. A higher differentiation level between varieties was observed by using RAPD markers compared to morphological markers. Correspondence analysis using both types of marker showed that RAPD data could fully discriminate between all varieties, whereas morphological markers could not achieve a complete discrimination. Genetic distances between the varieties were estimated from simple matching coefficients, ranged from 0.0 to 0.640 with an average of 0.295$\pm$0.131 for morphological traits and 0.042 to 0.625 with an average of 0.336$\pm$0.099 for RAPD data, respectively. Cluster analysis based on genetic dissimilarity of these varieties gave rise to 4 distinct groups. The clustering results based on RAPDs did not match with those based on morphological traits. Geographical distribution of most varieties in each of the groups were not well defined. The results suggested that the level of genetic diversity within this group of East-Asian vegetable soybean varieties was sufficient for a breeding program and can be used to establish genetic relationships among them with unknown or unrelated pedigrees.
The objective of this study was to develop a linkage map of soybean under the genetic background of Korean soybean. A set of 89 F/sub 5/ lines was developed from a cross between 'Pureunkong', which was released for soy-bean sprout, and 'Jinpumkong 2', which had no beany taste in seed due to lack of lipoxygenase 1, 2, and 3. A linkage map was constructed for this population with a set of 113 genetic markers including 7 restriction fragment length polymorphism (RFLP) markers, 79 randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers, 24 simple sequence repeat(SSR) markers, and 3 morphological markers. The map defined approximately 807.4 cM of the soybean genome comprising 25 linkage groups with 98 polymorphic markers. Fifteen markers remained unlinked. Seventeen linkage groups identified here could be assigned to the respective 13 linkage groups in the USDA soybean genetic map. RFLP and SSR markers segregated at only single genetic loci. Fourteen of the 25 linkage groups contained at least one SSR marker locus. Map positions of most of the SSR loci and their linkages with RFLP markers were consistent with previous reports of the USDA soybean linkage groups. For RAPD, banding patterns of 13 decamer primers showed independent segregations at two or more marker loci for each primer. Only the segregation at op Y07 locus was expressed with codominant manner among all RAPD loci. As the soybean genetic map in our study is more updated, molecular approaches of agronomically important genes would be useful to improve Korean soybean improvement.
Nuclear DNA was isolated from the sperm cells representing genetic characteristics and genomic polymorphisms of rainbow trout by polymerase chain reaction(PCR) amplification of DNA using arbitrary primers. Genomic DNA fingerprints were generated from rainbow trout sperm DNA by polymerase chain reaction amplification using 20 arbitrary decamers as primers. Out of these primers, 4 generated 17 highly reproducible RAPD markers, producing almost six polymorphic bands per primers. Four of 6 primers tested generated amplified fragments which were polymorphic between different individuals. Polymorphic DNA fragments were reproducibly amplified from independent DNA preparations made from individuals. Rainbow trout was distinctly observed 3 specific DNA markers (2. 3, 2.0 and 1.3kb) in bandsharing. Individual fragments generated using the same arbitrary primer, demonstrated that a single primer detected at least three independent genomic polymorphisms in rainbow trout sperm DNA. The RAPD polymorphism generated by this primer may be used as a genetic marker for individual identification The RAPD-PCR technique has been shown to reveal informative polymorphism in many species of fish. The present results demonstrate that RAPD markers are abundant, reproducible and provide a basis for future gene mapping and MAS in these important aquaculture species using RAPD polymorphic markers. It is concluded that RAPD polymorphisms are useful as genetic markers for fish breed differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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