Korean frogs (R. dybowskii and R. nigromaculara) were collected from chonnam area and their oocyte maturation was induced by using in ultro follicle culture system. Follicles were isolated from the frog ovary and cultured for 24 hr in (amphibian Ringer's soluion AR) at 22 C in the presence or absence of hormones. Follicular cocytes of R. dybowskii were induced to mature (germinal vesicle breakdown, GVBD) by the presence of progesterone, 0.1 $\mu$g/2 ml and that of R. nigromaculata by 1 $\mu$g/2 ml of progesterone. Follicles of the frogs were also responded to (frog pituitary homogenate FPH) in terms of their cocyte maturation. Follicular cocytes of R. dybowskii were induced to mature by FPH at concentration of 0.01 pituitary equivalent/2 ml and that of R.nigromaculata at 0.1 pit equiv./2 ml. The culture time required for the maturation of bath frog follicles was 915 hr. The responsiveness of the follicles of korean frogs to hormones (progesterone or FPH) was nearly the same as that of R. pipiens which are most commonly used amphibians. Particularly, follicular cocytes of R. dybowskii used from February matured spontaneously without stimulation of hormones during in vitro culture. Furthermore, those cocytes were spontaneous- ly ovulted when the ovarian fragments were cultured in a flask.
Using three species of Korean frogs (Rana dybowskii, R. rugosa and R. nigromaculata), the annual spermatogenic pattern, the seasonal changes in the steroidogenic competence, and responsiveness of testis to gonadotropins in terms of testosterone secretion in vitro were examined. The spermatogenic pattern of R. dybowskii was classified as a discontinuous type since spermatogenesis stops completely after spawning in late winter (February) until mid-summer (July). In contrast, the pattern of R. nigromaculata and R. rugosa was classified as a potent continuous type since sperm was always present in the seminiferous tubules all year round. In all three species, the levels of testicular testosterone and that of testosterone secreted by testis following in vitro culture were very low in late summer (August), but increased thereafter until winter (hibernation period). Interestingly, responsiveness of testis in vitro to gonadotropins in terms of testosterone secretion increased markedly in November (early hibernation period). Specifically, bullfrog LH was more effective than FSH in stimulating the secretion of testosterone by frog testis in vitro during hibernation period. This fact suggests that testosterone secretion by testis during hibernation is at least regulated by the pituitary gonadotropin rather than environmental factors. Taken together, the data presented here suggest that testicular cycles of three species of Korean frogs are closely linked to their females breeding cycles, and are eventually controlled by various environmental cues.
Amphibian biodiversity, community structure and habitats were surveyed in the Mt. Myungji area from April 2002 to March 2003. During the survey period 2orders, 4 families, 7 species of amphibians were observed. Bombina orientalis (DI =45.1%) was dominant and Bufo stejnegeri (DI = 12.8%), Rana rugosa and Rana dybowskii (DI = 9.9% each) Rana nigromaculata and Rana huanrenensis (DI 1.4% each), and Onycodactylus fisheri (DI = 7.0%) followed. Frequency of occurrence of O. fisheri and B. stejnegeri was largely different according to the altitude and human residence in their habitats.R. nigromaculata and R. huanrenensis showed low frequency of occurrence (<10%) suggesting the decrease in habitation density in this area. The species richness (R'), general diversity (H'), and evenness (E') of amphibians in this area were 0.98, 2.12, and 0.76, respectively, suggesting relatively healthy condition of amphibian community in this area.
The tadpoles of 12 Korean anuran species, including Bombina orientalis, Bufo gargarizans, B. stejnegeri, Hyla japonica, Kaloula borealis, Rana dybowskii, R. huanrenensis, R. coreana, R. nigromaculata, R. chosenica, R. rugosa, and R. catesbeiana, were classified based on their morphological characteristics. We collected eggs or tadpoles of the 12 Korean anuran species from Gangwon, Incheon, Chungcheong, and Gyeonggi districts in 2005 and 2006 breeding seasons. When the tadpoles reached at $27{\sim}37$ Gosner's developmental stages, we described morphological characteristics of the tadpoles of each anuran species and measured their physical parameters such as total length, body length, and body mass. After that, we chose 12 morphological characteristics to identify each species and to use them as classification keys such as eye location, caudal musculature pattern, spiracle location, oral disc morphology, and labial tooth row formula. In this paper, we presented classification keys, morphological characteristics, and drawings for the tadpoles of 12 anuran species.
A survey was performed to find out the intermediate hosts of Gnathostoma nipponicum in Jeju-do (Province), the Republic of Korea. In August 2009 and 2010, a total of 82 tadpoles, 23 black-spotted pond frogs (Rana nigromaculata), 7 tiger keelback snakes (Rhabdophis tigrinus tigrinus), 6 red-tongue viper snakes (Agkistrodon ussuriensis), and 2 cat snakes (Elaphe dione) were collected in Jeju-do and examined by the pepsin-HCl digestion method. Total 5 gnathostome larvae were detected in 3 (50%) of 6 A. ussuriensis, 70 larvae in 3 of 7 (42.9%) R. tigrinus tigrinus, and 2 larvae in 2 of 82 (8.7%) frogs. No gnathostome larvae were detected in tadpoles and cat snakes. The larvae detected were a single species, and $2.17{\times}0.22mm$ in average size. They had characteristic head bulbs, muscular esophagus, and 4 cervical sacs. Three rows of hooklets were arranged in the head bulbs, and the number of hooklets in each row was 29, 33, and 36 posteriorly. All these characters were consistent with the advanced third-stage larvae of G. nipponicum. It has been first confirmed in Jeju-do that R. nigromaculata, A. ussuriensis, and R. tigrinus tigrinus play a role for intermediate and/or paratenic hosts for G. nipponicum.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2000.05a
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pp.512-512
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2000
Some planorbid snails such as Hippeutis cantori and Segmentina hemisphaerula have reported as the molluscan intermediate hosts of Neodiplostomum seoulense, one of important snail-borne human intestinal trematodes in Korea. However, one of the Korean lymnaeid snail species, Austropeplea ollular was also found to be the first intermediate ho of N. seoulense. In field-collected Austropeplea snails from Sorae and Kimpo out of se collected localities, the bifurcated cercariae of N. seoulense were shed (infection rat 0.3%), whereas no Radix auricularia and Fossaria truncatula were found shedding cercariae. Each of 12 tadpoles of Rana nigromaculata, known as the second intermedia host of N. seoulense, were exposed to 200 cercariae shed from field-collected A ollula. F tadpoles of R. nigromaculata were found to be massively infected with metacercariae o N. seoulense (recovery rate: 62.1%). Each of five rats (Sprague-Dowley strain) was or fed with 200 metacercariae, and eggs of N. seoulense were detected in the rat feces on week later. These rats were killed 4 weeks after postinfection and adult worms of N seoulense were recovered from the small intestines (recovery rate: 9%). This is the f report of A. ollula as the first molluscan intermediate host for N. seoulense in Korea.
In order to clarify intra-and inter-specific variation of Korean Rana species, the partial DNA sequences of mitochondrial 16S rDNA gene were determined from 6 Korean and 1 Japanese Rana species, DNA sequences from Korean and Japanese species were comparison-analysed within, and also with the sequences from three species of Japanese brown frogs. DNA similarities were calculated as 91.3∼97.3% among brown frog (R. amurensis coreana, R. dybowskii and R. huanrenensis), as 96.11∼97.26% among pond frogs (R. nigromaculata and R. planeyi chosenica). Genetic distance of pond frog and wrinkle fyog (R. rugosa) were near than that of pond frog and brown frog. Two clusters were formed brown frogs and the other group by neigh-bor-joining and maximum-likelihood analysis, also the populations of R. nigromaculata were well distinguished between Korean peninsula and Korean island. But result from maximum-likelihood analysis slightly differed from neighbor-joining to cluster of R. rugosa. Further analyses for their population will be necessary to study the phylogenetic status.
The genetic variations among six species of Rana from Korea (R. nigro-maculata, R. piancyi, R. dybowskii, R. sp, R. rugosa type A, B and R. amurensis) were investigated using 499 bases of mitochondrial DNA sequences for ND2 (NADH dehydrogenase subunit 2) gene and $tRNA^{Trp}$ gene. Partial sequences of ND2 gene (427 bp) and full sequences of $tRNA^{Trp}$ gene (73 bp) were identified. The level of sequence divergences ranged from 0.2 to 5.2% within species and 4.9-28.0% among 6 species of the genus Rana. The $tRNA^{Trp}$ gene of the genus Rana was composed of 77 nucleotides which showed a two dimensional "cloverleaf" structure. The secondary structure of $tRNA^{Trp}$ was not found compensatory changes which could potentially confound phylogenetic inference. In the neighborjoining tree, brown frogs were clustered first with the level of sequence divergence of 13.20% between R. amurensis and R. dybowskii, and 9% between R. dybowskii and R. sp. supported by 99% bootstrap iterations, respectively. R. nigromaculata and R. plancyi were clustered into another group with 5.1% divergence supported by 100% bootstrap iteration. R. rugosa A 8nd B types were grouped by 4.9% divergence and clustered into the last group with other two groups with 100% bootstrap iterations.
A total of 220 tadpoles was captured in 6 areas and total 117 frogs, Rana nigromacuzata, were collected in 11 areas in Korea. They were examined for their infection status by the metacercariae of Fibricola seoulensis by peptic digestion technique and by histological observation with hematoBylineosin staining. This study was carried out from August, 1983 to September, 1984. Followings are the results. 1. The tadpoles of R. nigromaculata were positive for the metacercariae from 3.3% to 100% by area. The number of metacercariae per infected tadpole ranged from 1 to 584, and the mean number Per tadpole ranged from 7.6 to 221 by area. 2. The metacercariae from 16 tadpoles were counted by the body portion. A great majority of the metacercariae was collected from abdominal cavity, 98.3% of 484 counted larvae. And 6(1.2%) larvae were from proximal tail and 2(0.4%) from trunk. 3. Histological sections of tadpoles showed many metacercariae in abdominal cavity but none in other parts. The larvae were free in the spaces among intestinal loops or around primitive liver. A few larvae were in duct-like tissues near trunk wall. There was little infiltration of inaammatory cells. 4. The metacercarial infection rates of frogs ranged from 0% to 100% by area. The larval burden was 1 to 470 by infected frogs, and mean number ranged from 1 to 175.6 by area. By above results, it is suggested that the cercariae of F. seoulensis may infect R. nigromaculata already in the stage of tadpole. Almost all of the metacercariae were concentrated in abdominal cavity of tadpoles. According to the infection status of frogs, this nuke is prevalent almost nationwidely in rice paddies in Korea.
Previous studies have postulated that isometric animals exert similar locomotory capacity (speed, distance) because the amount of energy available for the motion would be the same regardless of body mass (m). To test propriety of this theory, we examined body shape and take-off potential of two frog species, Rana nigromaculata (powerful jumpers) and Bombina orientalis (slow hoppers). Morphological measurements included thigh muscle mass (indicative of total muscle force), hindlimb length (L, determining acceleration distance), and interilial width (shaping take-off motion). To gauge locomotory capacity, take-off speed (v) and take-off angle ($\theta$) were measured from video analyses, and jump distance (R) and take-off Power ($P_{t}$ ) were calculated from equations $R=V^{2}sin2\theta/g$ and ($P_{t}$=$㎷^{3}/2L$(where g is the gravitational constant). Scaling exponents of morphometric variables for both species were 0.96-1.11 for thigh muscle mass, 0.28-0.29 for hindlimb length, and 0.30-0.36 for interilial width. Scaling exponents of locomotory performance for the two species were -0.01-0.14 for take-off speed, 0.24-0.31 for jump distance, and 0.66-0.84 for take-off power. The results demonstrate that the frogs of this study showed isometric body shape within species, but that take-off response changed allometrically with body mass, indicating that these data did not fully support the previous proposition. An exception was found in take-off speed of B. orientalis, in which the speed changed little with body mass (slope=-0.01). These findings suggest that the energy availability approach did not properly explain the apparent allometric relations of the take-off response in these animals and that an alternative model such as a power production approach may be worth addressing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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