• 제목/요약/키워드: Purification and characterization

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Cucurbita pepo에서 분리한 Light Membrane Vesicle의 ATPase와 Phosphatase의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of ATPase and Phosphatase of Light Membrane Vesicles Isolated from Cucurbita pepo)

  • 오승은
    • Journal of Plant Biology
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    • 제33권4호
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    • pp.325-332
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    • 1990

  • Light membrane vesicles were isolated from the zucchini hypocotyl by floatation on ficoll density gradients and the proteins were solubilized with Triton X100. Three ATP-hydrolyzing enzymes were partially purified by ion-exchange and gel filtration chromatography and isoelectric focusing. There are plasma membrane-type ATPase whose activity was inhibited by vanadate but not by nitrate, tonoplast-type ATPase which was sensitive to nitrate but insensitive to vanadate and one having a phosphatase activity with a pI value different from that of an acid phosphatase. A fraction was obtained after DEAE-ion-exchange chromatography crossreacting with polyclonal antibodies against Ca2+ -ATPase from human erythrocytes.

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식물세포 Taxus chinensis 배양으로부터의 Paclitaxel 대량 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Paclitaxel from Plant Cell Cultures of Taxus chinensis in Large-Scale Process)

  • 김진현;기은숙;민범찬;최형균;홍승서;이현수
    • KSBB Journal
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    • 제15권5호
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    • pp.537-540
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    • 2000

  • 일반적으로 paclitaxel과 유사한 구조를 가진 복잡한 유도체의 분리나 최종 제품에서의 엄격한 규정 등으로 인하여 한 단계의 HPLC system으로 정 제하는 것은 상당히 어렵다. 이러한 이유로 두 단계 HPLC system으로 식물세포 배양액으로 부터 paclitaxel의 대량 정제를 수행하였다. 즉, 첫번째 단계에 서 reverse-phase HPLC column, 두번째 단계에서 normal­p phase HPLC column을 사용하여 최종 제품을 얻었다. 또한 최종 정 제 된 paclitaxel 내 에 포함되어 있는 불순물 profile 확 언, 함량 분석, 그리고 이들 물질들에 대한 분리, 정제 및 동 정을 실시하였다 이들 불순물들 중에서 0.1% 이상되는 것은 모두 6종 (side chain derivative, baccatin III, 10-deacetyltaxol, cephalomannine, taxane derivative, 7-epitaxol)이며 NMR과 MS를 사용하여 화학구조를 분석한 결과 이미 알려진 pacli­t taxel 유도체 또는 전구체와 동일한 물칠로 밝혀 졌다. 본 연구 결과는 결국 paclitaxel 생산을 위한 품질관리 (quality con­t tr이)와 허가를 위한 자료로 유용하게 사용되어 진다.

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