Leticia Aparecida Silva Batista;Alexandre Henrique dos Reis-Prado;Hebertt Gonzaga dos Santos Chaves;Lara Cancella de Arantes;Luis Fernando Santos Alves Morgan;Carolina Bosso Andre;Thais Yumi Suzuki;Francine Benetti
Restorative Dentistry and Endodontics
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제48권4호
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pp.39.1-39.23
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2023
Objectives: This study aimed to investigate the effectiveness of different topical/systemic agents in reducing the damage caused by bleaching gel to pulp tissue or cells. Materials and Methods: Electronic searches were performed in July 2023. In vivo and in vitro studies evaluating the effects of different topical or systemic agents on pulp inflammation or cytotoxicity after exposure to bleaching agents were included. The risk of bias was assessed. Results: Out of 1,112 articles, 27 were included. Nine animal studies evaluated remineralizing/anti-inflammatories agents in rat molars subjected to bleaching with 35%-38% hydrogen peroxide (HP). Five of these studies demonstrated a significant reduction in inflammation caused by HP when combined with bioglass or MI Paste Plus (GC America), or following KF-desensitizing or Otosporin treatment (n = 3). However, orally administered drugs did not reduce pulp inflammation (n = 4). Cytotoxicity (n = 17) was primarily assessed using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay on human dental pulp cells and mouse dental papilla Cell-23 cells. Certain substances, including sodium ascorbate, butein, manganese chloride, and peroxidase, were found to reduce cytotoxicity, particularly when applied prior to bleaching. The risk of bias was high in animal studies and low in laboratory studies. Conclusions: Few in vivo studies have evaluated agents to reduce the damage caused by bleaching gel to pulp tissue. Within the limitations of these studies, it was found that topical agents were effective in reducing pulp inflammation in animals and cytotoxicity. Further analyses with human pulp are required to substantiate these findings.
Rhus verniciflua Stokes (Anacadiaceae) is a plant that is native to East Asian countries, such as Korea, China, and Japan, and it has been found to exert various biological activities including antioxidative, anti-aggregatory, anti-inflammatory, anti-mutagenic, and apoptotic effects. Sulfuretin is one of the major flavonoid component isolated from the heartwood of R. verniciflua. Reactive oxygen species (ROS), produced via dental adhesive bleaching agents and pulpal disease, can cause oxidative stress. In the present study, we isolated sulfuretin from R. verniciflua and demonstrated that sulfuretin possesses cytoprotective effects against hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced dental cell death. $H_2O_2$ is a representative ROS and causes cell death through necrosis in human dental pulp (HDP) cells. $H_2O_2$-induced cytotoxicity and production of ROS were blocked in the presence of sulfuretin, and these effects were dose dependent. Sulfuretin also increased heme oxygenase-1 (HO-1) protein expression. In addition, to determine whether sulfuretin-induced HO-1 expression mediated this cytoprotective effect, HDP cells were cotreated with sulfuretin in the absence or presence of SnPP, an inhibitor of HO activity. Sulfuretin-dependent HO-1 expression was required for suppression of $H_2O_2$-induced HDP cell death and ROS generation. These results indicate that sulfuretin-dependent HO-1 expression was required for the inhibition of $H_2O_2$-induced cell death and ROS generation. In addition, sulfuretin may be used to prevent functional dental cell death and thus may be useful as a pulpal disease agent.
Objectives: Sodium hypochlorite (NaOCl) is an excellent bactericidal agent, but it is detrimental to stem cell survival, whereas intracanal medicaments such as calcium hydroxide ($Ca[OH]_2$) promote the survival and proliferation of stem cells. This study evaluated the effect of sequential NaOCl and $Ca(OH)_2$ application on the attachment and differentiation of dental pulp stem cells (DPSCs). Materials and Methods: DPSCs were obtained from human third molars. All dentin specimens were treated with 5.25% NaOCl for 30 min. DPSCs were seeded on the dentin specimens and processed with additional 1 mg/mL $Ca(OH)_2$, 17% ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) treatment, file instrumentation, or a combination of these methods. After 7 day of culture, we examined DPSC morphology using scanning electron microscopy and determined the cell survival rate with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. We measured cell adhesion gene expression levels after 4 day of culture and odontogenic differentiation gene expression levels after 4 wk using quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: DPSCs did not attach to the dentin in the NaOCl-treated group. The gene expression levels of fibronectin-1 and secreted phosphoprotein-1 gene in both the $Ca(OH)_2$- and the EDTA-treated groups were significantly higher than those in the other groups. All $Ca(OH)_2$-treated groups showed higher expression levels of dentin matrix protein-1 than that of the control. The dentin sialophosphoprotein level was significantly higher in the groups treated with both $Ca(OH)_2$ and EDTA. Conclusions: The application of $Ca(OH)_2$ and additional treatment such as EDTA or instrumentation promoted the attachment and differentiation of DPSCs after NaOCl treatment.
본 연구에서는 인위적으로 노출시킨 비글견의 치수조직을 기존의 수산화칼슘제재와 MTA, 접착성 레진, 광중합형 수산화칼슘제재를 사용하여 직접치수복조한 후 각 재료에 따른 치수의 반응을 광학현미경 하에서 조직학적으로 관찰하여 비교분석하였다. 2마리 비글견의 36개 치아를 이용하여, 실험적으로 치수를 노출시키고 노출된 치수에 치수복조재를 적용한 후 와동은 복합레진으로 충전하여 직접치수복조술을 시행하였다: (1) Mineral Trioxide Aggregate (MTA: $ProRoot^{(R)}$ MTA, Dentsply, Tulsa, USA), (2) Clearfil SE Bond (Dentin adhesive system: Kuraray, Osaka, Japan), (3) Ultra-Blend (Photopolymerized Calcium hydroxide: Ultradent, South Jordan, USA), (4) Dycal (Quick setting Calcium hydroxide: LD Caulk Co., Milford, USA). 희생전 90일, 30일, 7일 전에 각 복조재별로 3개씩의 와동을 충전하였고 비글견을 희생시키고 조직시편을 제작하였다. 시편을 H&E 염색 후 광학 현미경으로 치수염증반응과 경조직 형성 정도를 관찰하였다. MTA 군은 초기에는 경조직 형성이 관찰되지 않고 치수조직의 위축과 부분괴사가 관찰되었으나 시간이 지나면서 경조직 형성이 관찰되었다. Clearfil SE Bond군은 초기에 염증세포의 침윤과 치수세포의 괴사를 관찰할 수 있었고 시간이 지날수록 치수 세포의 괴사가 더욱 진행한 양상을 보였다. Ultra-blend 군과 Dycal 군은 MTA 군과 비슷하게 초기에는 경조직 형성을 보이지 않고 중등도의 염증반응이 관찰되었으며 시간이 지나면서 경조직 형성이 관찰되었다. MTA, 수산화칼슘제재와 광중합 수산화칼슘제재는 초기의 치수염증반응 이후 조상아세포층, 상아질교 형성을 보여 직접치수복조재로 적당하였으며, 접착성 레진은 심한 염증반응과 치수 조직의 괴사 양상을 보여 직접치수복조재로 부적당하다는 결론을 얻을 수 있었다.
Kim, Sunil;Lee, Sukjoon;Jung, Han-Sung;Kim, Sun-Young;Kim, Euiseong
Restorative Dentistry and Endodontics
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제44권2호
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pp.20.1-20.8
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2019
Objectives: To achieve pulp-dentin complex regeneration with tissue engineering, treatment efficacies and safeties should be evaluated using in vivo orthotopic transplantation in a sufficient number of animals. Mice have been a species of choice in which to study stem cell biology in mammals. However, most pulp-dentin complex regeneration studies have used large animals because the mouse tooth is too small. The purpose of this study was to demonstrate the utility of the mouse tooth as a transplantation model for pulp-dentin complex regeneration research. Materials and Methods: Experiments were performed using 7-week-old male Institute of Cancer Research (ICR) mice; a total of 35 mice had their pulp exposed, and 5 mice each were sacrificed at 1, 2, 4, 7, 9, 12 and 14 days after pulp exposure. After decalcification in 5% ethylenediaminetetraacetic acid, the samples were embedded and cut with a microtome and then stained with hematoxylin and eosin. Slides were observed under a high-magnification light microscope. Results: Until 1 week postoperatively, the tissue below the pulp chamber orifice appeared normal. The remaining coronal portion of the pulp tissue was inflammatory and necrotic. After 1 week postoperatively, inflammation and necrosis were apparent in the root canals inferior to the orifices. The specimens obtained after experimental day 14 showed necrosis of all tissue in the root canals. Conclusions: This study could provide opportunities for researchers performing in vivo orthotopic transplantation experiments with mice.
Objectives: This study investigated the indirect effect of calcium-enriched mixture (CEM) cement and mineral trioxide aggregate (MTA), as 2 calcium silicate-based hydraulic cements, on human dental pulp stem cells (hDPSCs) through different dentin thicknesses. Materials and Methods: Two-chamber setups were designed to simulate indirect pulp capping (IPC). Human molars were sectioned to obtain 0.1-, 0.3-, and 0.5-mm-thick dentin discs, which were placed between the 2 chambers to simulate an IPC procedure. Then, MTA and CEM were applied on one side of the discs, while hDPSCs were cultured on the other side. After 2 weeks of incubation, the cells were removed, and cell proliferation, morphology, and attachment to the discs were evaluated under scanning electron microscopy (SEM). Energy-dispersive X-ray (EDXA) spectroscopy was performed for elemental analysis. Alkaline phosphatase (ALP) activity was assessed quantitatively. The data were analyzed using the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. Results: SEM micrographs revealed elongated cells, collagen fibers, and calcified nucleations in all samples. EDXA verified that the calcified nucleations consisted of calcium phosphate. The largest calcifications were seen in the 0.1-mm-thick dentin subgroups. There was no significant difference in ALP activity across the CEM subgroups; however, ALP activity was significantly lower in the 0.1-mm-thick dentin subgroup than in the other MTA subgroups (p < 0.05). Conclusions: The employed capping biomaterials exerted biological activity on hDPSCs, as shown by cell proliferation, morphology, and attachment and calcific precipitations, through 0.1- to 0.5-mm-thick layers of dentin. In IPC, the bioactivity of these endodontic biomaterials is probably beneficial.
Fiber characteristics and fiber distribution of thermomechanical pulp(TMP), bisulfite chemithermomechanical pulp(bisulfite CTMP), neutral sulfite chemithermomechanical pulp(neutral sulfite CTMP) from kenaf(Hibiscus cannabinus L., Malvaceae) cultivar Tainug-2 cultivated in the reclaimed land of Korea were examined to use effectively nonwood fibers as an alternative raw material sources for papermaking. Yields of TMP and CTMP from kenaf were lower than those of TMP from hardwoods and CTMP from softwoods and hardwoods. Bark fibers of kenaf cultivar Tainung-2 ranged 2.04 to 2.30 mm long and $18.7{\sim}19.7{\mu}m$ width. Core fibers averaged 0.63 to 0.80 mm long and $29.5{\sim}31.4{\mu}m$ wide. Coarseness of bark fiber was higher than that of core fiber, and fiber from TMP were higher than those from both bisulfite CTMP and neutral sulfite CTMP. Curl indexes of bark fibers were higher than those of core fibers. However curl indexes were not significantly affected by the pulping conditions. Short fiber distributions were higher in core fibers from TMP and CTMP and long fiber distributions were higher in bark fibers. There was no significant difference in fiber distribution of whole and core fibers obtained from TMP and CTMP, Fibers from neutral sulfite CTMP, however, exhibited a little higher long fiber distribution. Distinct difference in anatomical characteristics was found between core and bast fibers of kenaf plant. Parenchyma cell, pith parenchyma cell and vessel were observed in core fibers and bast fiber in bast sections.
This paper dealt with the distribution of normal mast cells in the spleen, liver and lung on cattle, horses, pigs and dogs, and also degranulation of mast cells in the dogs infected with Rompun (2% Xylazine HCl). The results observed are summarized as follows. Normal mast cells were distributed in spleen, liver and lung on cattle, horse, pig and dog. Mast cells were observed in both red pulp and surroundings of white pulp of the spleen in horse, in the white pulp of the spleen in cattle, in the trabeculae of the spleen in pigs, and in white pulp and red pulp of the spleen in dogs, respectively. Mast cells were observed in the portal triad of the liver in cattle and horses, in both portal triad and interlobular connective tissues of the liver in pigs, and not only the portal triad but also walls of the sinusoids and the central veins in dogs. A large number of mast cells were observed in the interlobular septa and peribronchioles of lung on all the species in this experiment. The mast cells are more numerous in the lungs than other organs. Author considers that numbers of normal mast cells distributed in the tissue is related to the dosage of Rompun in animal. The degranulation of mast cells were observed in the subcutaneous tissues of dog intramuscularly injected with Rompun(0.5ml/times) for 4 or 5 times and subcutaneously injected with Rompun(0.3ml/times) for 4 times. In dog intradermally injected with 0.1ml of Rompun, mast cells were decreased in number at 30 minutes and markedly decreased in number at 2 hours, but more or less increased in number at 3 hours after injection. In addition, the granules of the mast cells were decreased in number at 30 minutes and marked degranulation of the mast cells were recognized at 2 hours after injections, but normal mast cells begun to appear in subcutaneous tissue with the lapse of time from 3 hours after injection. There was also observed local infiltration of neutrophils in subcutaneous tissues of dogs intradermally injected with 0.1ml of Rompun at 30 minutes. At 2 hours after injection, numerous neutrophils and a small number of eosinophils were observed in the site of injection. Conclusionally, Rompun was regarded as a factor which causes the degranulateon of mast cell and the authors considered that histamine released from the mast cells by Rompun might cause relaxation of skeletal muscle.
Seo, Min-Seock;Hwang, Kyung-Gyun;Kim, Hyong-Bum;Baek, Seung-Ho
Restorative Dentistry and Endodontics
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제37권3호
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pp.142-148
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2012
Objectives: We analyzed gene-expression profiles after 14 day odontogenic induction of human dental pulp cells (DPCs) using a DNA microarray and sought candidate genes possibly associated with mineralization. Materials and Methods: Induced human dental pulp cells were obtained by culturing DPCs in odontogenic induction medium (OM) for 14 day. Cells exposed to normal culture medium were used as controls. Total RNA was extracted from cells and analyzed by microarray analysis and the key results were confirmed selectively by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). We also performed a gene set enrichment analysis (GSEA) of the microarray data. Results: Six hundred and five genes among the 47,320 probes on the BeadChip differed by a factor of more than two-fold in the induced cells. Of these, 217 genes were upregulated, and 388 were down-regulated. GSEA revealed that in the induced cells, genes implicated in Apoptosis and Signaling by wingless MMTV integration (Wnt) were significantly upregulated. Conclusions: Genes implicated in Apoptosis and Signaling by Wnt are highly connected to the differentiation of dental pulp cells into odontoblast.
Inflammatory cells express the inflammatory cytokines and growth factors induced by lipopolysaccharide (LPS). Odontoblasts are located at the pulp-dentin interface and extend their cell processes far into the dentin where they are the first cells to encounter microorganisms or their products. Therefore, this study examined the expression of some growth factors related to the signal pathway, such as growth factor receptor binding protein 2 (Grb2)-Ras in odontoblast-like dental pulp cells, after a treatment with LPS. After 60 minutes, the mRNA and protein expression levels of Grb2 and Ras were higher in the LPS-treated cells than in the control cells. The level of vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) mRNA expression was increased significantly to a level similar to that of Grb2 and Ras at 60 minutes. The platelet-derived growth factor-AA (PDGF-AA) mRNA level was expressed strongly in the odontoblast like dental pulp cells without an association with LPS stimulation. Scanning electron microscopy revealed many extensions of the cytoplasmic processes and the number of processes increased gradually at 30, 60 and 90 minutes after LPS stimulation. From these results VEGF and bFGF expression might be induced through the Grb2-Ras signal transduction pathway in LPS treated odontoblasts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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