Microorganisms capable of utilizing 2,4,5-trichlorophenoxyacetic acid(2,4,5-T) as sole carbon source were isolated from soil by enrichment culture. Among these strains, EL-O7IP had the highest biodegradability of 2,4,5-7, and according to its morphological and physiological characteristics, it was identified as Pseudomonas sp. This strain was resistant to rifampicin, streptomycin, ampicillin, kanamycin and such metal ions as $Zn^{2+}$, $Cu^{2+}$ Various compounds of chlorinated phenol and substrate analogs were more easily utilized than 2,4,5-7, but biodegradation rate for each compound was different. The strain easily utilized the compounds of chlorinated substituents on phenol in the order of ortho-, para-, and meta- position. The biodegradability of this strain was very stable. Key words : 2,4,5- trichlorophenoxyacetic acid, Pseudomonas sp .
Pseudomonas sp. DJ77 의 chromosomal DNA로 부터 6-8kb XhoI 절편 상에 존재하는 phenanthrene 분해에 관련된 유전자군을 vector pBLUESCRIPT SK(+)에 클로닝하였다. 이렇게 얻은 재조합 plasmid인 pHENX7을 가지고 있는 JM101 균주는 3-methylcatechol을 노란색의 meta-cleavage 화합물로 전환학 수 있었다. 그러자 삽입된 절편의 방향이 반대가 되도록 제조한 pHENX7R 은 extradiol dioxygenase 활성을 나타내지 않기 때문에 전사방향을 알 수 있었다. pHENX7과 이의 유도체들을 지니는 JM101 균주에서 PhnC(24kDa), PhnD(31 kDa), PhnE(34 kDA), PhnF(15 kDa) 의 4 polypeptide 를 확인학 수 있었고 개개의 유전자의 위치와 범위를 알 수 있었다. 유전자 순서는 phnC-phnD-phnE-phnF-phnG 이었으며, phnD, phnE, phnG 는 각기 gluthione S-transferase, meta-cleavage compound hydrolase, extradiol dioxygenase, metacleavage compound dehydrogenase 의 유전자이었다.
Kim, Hae-Young;Moon, Deok Hyun;Chung, Seon-Yong;Park, Jeong-Hun
Environmental Engineering Research
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제15권2호
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pp.57-62
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2010
The purpose of this study was to investigate the effect of mixing methods on the biodegradation of sorbed naphthalene and phenanthrene in soils. Biodegradation was initiated by inoculating Pseudomonas sp. KM1 into equilibrated soil slurry vials. Four different mixing methods, including no mixing, orbital shaking, rolling and rotating were utilized to enhance the biodegradation of both naphthalene and phenanthrene. The experimental results showed that the sorbed compounds were more effectively biodegraded with rolling and rotating mixing methods. The sorbed naphthalene concentrations were reduced to 0 mg/kg via the rolling and rotating methods. However, with no mixing and the orbital shaking methods, the sorbed naphthalene concentrations were comparatively high, ranging from 2.59 to 20.45 mg/kg. Similar trends were observed for the biodegradation of phenanthrene, but the concentrations remaining were higher than those of naphthalene, due to the limited bioavailability of the sorbed phenanthrene. The rolling and rotating mixing methods are suggested can distribute bacteria uniformly in the slurry system; improve the mass transfer rate and the probability of physical contact between bacteria and the sorbed contaminants, resulting in higher bioavailability of the contaminants.
The effects of the presence of commercial non-ionic surfactants on the cell growth and diesel degradation by Pseudomonas sp. OSD were studied. Most surfactants inhibited the diesel biodegradation at high concentration(1000mg/1). However, some surfactants showed no inhibition at lower concentrations. Tween 20, Brij 58, Brij 78 were not inhibitory to the diesel biodegradation even at high concentration. These chosen surfactants has relatively high HLB values. There exists complicated relationship for diesel bioremediation between cell hydrophobicity, surfactant HLB, contaminants, an soil.
유기염소계 난분해성 산업폐수처리에 효과적인 미생물제제 개발을 위하여 PCP (pentachlorophenol)와 TCE (trichloroethylene) 등과 같은 유기계 염소화합물이 오염되어있는 토양 및 산업폐수로부터 PCP 분해활성이 높은 GP5, GP19와 TCE 분해활성이 높은 GA6, GA15를 분리하였다. 이들 분리균주 GP5, GP19, GA6, GA15등은 Acetobactor sp., Pseudomonas sp., Arthrobacer sp., Xanthomonas sp.과 유사한 것으로 나타나 최종적으로 Acetobacter sp. GP5, Pseudomonas sp. GP19, Arthrobacer sp. GA6, Xanthomoas sp. GA15로 명명하였다. 유기염소계 산업폐수의 처리를 위한 복합미생물제제 OC17은 PCP와 TCE를 분해하는 4개의 분리 분리균주와 방향족화합물 분해균주인 Acinetobacter sp. KN11, Neisseria sp. GN13의 배양액을 혼합하여 제조하였다. 복합미생물제제 OC17은 $2.8{\times}10^9CFU/g$의 균체수를 갖고 있으며, 밀도는 $0.299g/cm^3$, 수분함량은 26.8%를 나타내었다. 복합미생물 제제 OC17은 PCP 500 mg/l가 포함되어있는 인공폐수를 이용한 실험에서 배양 65시간에 87%의 분해효율을 나타내었고, TCE (300 uM)의 분해효율은 배양 50시간에 90%의 분해효율을 나타내었다. 복합미생물제제 OC17을 이용한 유기 염소계 산업폐수의 처리효율 시험을 위한 연속배양 실험 에서 10일간 처리 하였을 때 91%의 COD 제거효율을 나타내었다.
Pseudomonas sp. P20 was shown to be capable of degrading biphenyl and 4-chlorobiphenyl (4CB) to produce the corresponding benzoic acids wnich were not further degraded. But the potential of the strain for biodegradation of 4CB was shown to be excellent. The pcbA, B, C and D genes responsible for the aromatic ring-cleavage of biphenyl and 4CB degradation were cloned from the chromosomal DNA of the strain. In this study, the pebC and D genes specifying degradation of 2, 3-dihydroxybiphenyl (2, 3-DHBP) produced from biphenyl by the pebAB-encoded enzymes were cloned by using pBluescript SK(+) as a vector. From the pCK102 (9.3 kb) containing pebC and D genes, pCK1022 inserted with a EcoRI-HindIII DNA fragment (4.1 kb) carrying pebC and D and a pCK1092 inserted with EcoRI-XbaI fragment (1.95 kb) carrying pebC were constructed. The expression of pcbC and D' in E. coli CK102 and pebC in E. coli CK1092 was examined by gas chromatography and UV-vis spectrophotometry. 2.3-dihydroxybiphenyl was readily degraded to produce meta-cleavage product (MCP) by E. coli CK102 after incubation for 10 min, and then only benzoic acid(BA) was detected in the 24-h old culture. The MCP was detected in E. coli CK1022 containing pebC and 0 genes (by the resting cells assay) for up to 3 h after incubation and then diminished completely in 8 h, whereas the MCP accumulated in the E. coli CK1092 culture even after 6 h of incubation. The 2, 3-DHBP dioxygenases (product of pebC gene) produced by E. coli CK1, CK102, CK1023, and CK1092 strains were measured by native PAGE analysis to be about 250 kDa in molecular weight, which were about same as those of Pseudomonas sp. DJ-12, P. pseudoa1caligenes KF707, and P. putida OU83.
아닐린분해능이 있는 Flavimonas oryzihabitans과 4-chlorobiphenyl (4-CBP)를 분해하는 Pseudomonas sp.를 원형질체 융합하여 아닐린과 4-CBP를 모두 분해하는 융합균주를 개발하고, 융합체의 특성을 조사하였다. F. oryzibhavitans는 융합체 선별표지 위애 NTG처리하여 chloramphenicol 내성 ($Cm^r$)을 유발하였다. Lysozyme-EDTA에 의한 각 모균주의 원형질체 생성율은 약 99%이었고, 원형질체의 재생율은 5.0~6.6%이었다. 원형질체는 40% PEG 6000을 사용하였을 때 효과적으로 융합이 이루어졌으며 융합율은 $3.16{\times}10^{-4} $이었다. 융합균인 F22의 DNA양는 모균주에 비해 약 2배 정도 증가 하였으며, 생화학적 특성은 모균주의 특성이 혼합하여 나타났다. F22는 5 mM 아닐린 최소배지에서는 모균주와 성장능과 분해능이 거의 비슷하였고, 10 mM 아닐린 최소배지에서는 1.5배 빠른 성장속도를 나타내었으나, 4-CBP 분해능은 모균주보다 약간 낮게 나타났다.
4-Chlorobiphenyl(4CB) 과 biphenyl 을 분해하는 Pseudomoas sp. DJ-12 의 pcbAB 는 분해초기 단계에 작용하는 4-chlorobiphenyl dioxygenase 와 dihydrodiol dehydrogenase 효소를 생산하는 유전자들이다. 이 유전자를 E. coli XL1-Blue 에 플로닝하여 CU101 형질전환체를 얻었다. CU101 의 pCU101 재조합 plasmid 에 클로닝된 pcbAB 유전자는 크기가 약 2.2 kb 이고 3 개의 Hind III 제한효소 위치가 있었으며, 독자적인 promoter 를 가지고 있었다. CU101 에 대하여 biphenyl 을 기질로 하여 생성된 대사산물을 resting cell assay 를 한 결과 2, 3-dihydroxybiphenyl 이 검출되어 pcbAB 유전자들이 E. coli 에서 잔 발현된다는 것을 의미하였다. 그러나 dechlorination 작용은 pcbAB 유전자와 관계없이 4AB 의 개환과정 후 생성된 4-chlorobenzoate 에서 일어나는 것으로 해석된다.
The effects of environmental factors on degradation of Aroclor 1242 were investigated with four Gram-negative bacterial isolates. Their biodegradabilities of the Aroclor were well correlated to their growth rates on the Aroclor added as a sole carbon and energy source. The optimum concentration of the Aroclor for biodegradation of the substrate in MM2 medium was 0.5mg/ml in HK-100, HK-123, and MS-1003 strains, but 1 mg/ml in DJ-26 strain. The optimum temperature and pH were $30^{\circ}C$ and 7.0, respectively, for all the strains. On the basis of the results which the strain of DJ-26 showed the highest degradability of the Aroclor as well as the highest growth rate under the optimum environmental conditions, the bacterial isolate identified as Pseudomonas sp. was found to be a strain usable for treatment of the toxic and recalcitrant chemical pollutants, such as polychlorinated aromatic hydrocarbons.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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