Sponge in Lake Baikal is an unique organism. Microorganisms in sponges are assumed as precious resources for bioactive materials. For understanding the bacterial community in Baikalian sponges by cultivation, 92 strains of bacteria were isolated from lake water and 2 species of sponges, Baikalospongia sp. and Lubomirskia sp., Thirty five bacterial strains are isolated from ambient water near the sponge, 27 bacterial strains from Baikalospongia sp., 30 bacterial strains from Lubomirskia sp.. As a result, 78.3% and 57.6% of isolated bacterial strains has amylase and protease activity respectively, while strains with cellulose and lipase activities were 38.0% and 34.8%. By 16S rRNA sequence analysis of selected strains, 13 strains which were isolated from Baikalospongia sp. were belong to Pseudomonas spp.. Whereas, 14 strains which were isolated from Lubomirskia sp. were Pseudomonas spp., Buttiauxella agrestis, Pseudomonas fluorescens, Yersinia ruckeri, Bacillus spp., Paenibacillus spp., Bacillus thuringiensis, Bacillus simplex, Brevibacterium spp., Acinetobacter lwoffii. In culture media, Pseudomonas spp. dominance was supposed that according to allelophathy.
By the successive enrichment culture, more than 250 methanol-utilizing bacteria were isolated from various samples such as soil, waste water and sewage. Two strains of which were selected and tentatively identified as Acinetobacter sp. and Pseudomonas sp. experiments were carried out to determine the growth conditions for the higher biomass yield and to demonstrate the difference to protein composition dependent upon carbon sources of these two species. the results were as follows ; 1. the optimum pH was determined as 8 in the both species. The optimum temperature in Acinetobacter sp. was $25^{\circ}C{\sim}30^{\circ}C$ and pseudomonas sp. was $30^{\circ}C-35^{\circ}C$. The optimum initial concentration of mthanol was determined as 1-2% in Acinetobacter sp. and 2-3% in pseudomonas sp. 2. The optimum concnetrations of nitrogen source, micro-elements, and vitamins such as biotin and thiamine-HCl in Acnetobactar sp. were 1g $(NH_4)_3SO4,\;1{\sim}3mg\;Mn^{++},\;4mg\;Fe^{++},\;10{\mu}g\;biotin,\;and\;100{\mu}g$ thiamine-HCl per liter medium. In the Pseudomonas sp., 2g $(NH_4)_3SO4,\;1mg\;Mn^{++},\;trace\;amounts\;of\;Fe^{++},\;5{\mu}g\;biotin,\;and\;100{\mu}g$ thiamine HCl per liter were effective. Maximum biomass yield was 2.5g/l in Acinetobacter sp. and 4.8g/l in Pseudomonas sp. 3. Protein composition of the two strains exhibited that alkai-labile protein was higher than alkali-stable protein. In Pseudomonas sp., the contents of acid soluble fraction and alkali-stable protein of the cells grown in the methanol medium were higher than in sucrose medium. On the other hand, in Acinetobacter sp., alkalilabile protein of the cells grown in sucrose medium was higher than in methanol medium.
Various rhizobacteria was isolated, and was bacterialized into the substrates to clarify the plant growth promoting effects of rhizobacteria on the early growth of red peper seedlings. Total 125 bacterial isolates were primarily isolated and purified from the soils in greenhouse. And four strains were finally screened, based on the antifungal activities against Fusarium sp., Pythium sp. and Rhizoctonia sp. of red pepper plants. The strongest antifungal strain RB 109 has a antagonistic activity against Fusarium sp., Pythium sp. and Rhizoctonia sp. in terms of 66.0%, 65.0% and 66.1%. Early growth of red pepper seedlings was promoted, when cultured solution of rhizobacteria RB 109 was bacterialized into the substrates. Antifungal rhizobacteria RB 109 was identified as Pseudomonas sp. related strains, which has a similarity of 82% to the Pseudomonas sp.
The identification of eicosapentaenoic acid (EPA) by Pseudomonas sp. CH-414 were investigated under the optimal culture conditions. The maximum dry cell weight and phospholipid production showed about 10 mg/ml and 0.6 mg/ml, respectively, at the 48 hr cultivation. The phospholipid form produced by Pseudomonas sp. CH-414 was elucidated as a phosphatidyt ethanolamine by thin layer chromatography. EPA was contained about 15% in the. extractable lipid, and the amount of EPA was about 83 $\mu $g/ml from the culture broth. Also myristic, palmitic, palmitoleic, stearic and oleic acids were identified with gas chromatography.
26 bacterial strains capable of growing on Terephthalic acid (TPA) in minimal medium were isolated from soil and wastewater by selective enrichment culture, and among them, one isolate which was the best in the cell growth and TPA degradation was selected and identified as Pseudomonas sp. T-1 by its characteristics. Cell growth almost revealed a stationary phase at 24 hrs after cultivation. Cell growth dramatically increased in a minimal medium containing 0.1% of TPA as a sole carbon source and TPA was not detected any more at 80 hrs after cultivation. Therefore, it is suggested that Pseudomonas sp. T-1 could be effectively used for the biological treatment of wastewater containing TPA.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.23
no.1
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pp.104-109
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1994
For Selection of powerful antagonistic bacteria for biological control of soil borne Erwinia rhapontici causing rot of the vegetables and fruit, excellent straints (S43, S62) were selected from rhizopere in vegetables root rot suppressive soil. Selected strains were identified to be Pseudomonas sp. with Apl 20NE kit tests. Optimum culture condition for the maximum production of antagonistic substance was determined , when isolate was cultured in 523 synthetic broth media at pH 7.0 and 30 during 3 days. Antagonistic substance productivity of isolated Pseudomonas sp. (S43, S62) in the fertilizer soil were increased to about 40-50% compared to that in the non fertilizer soil.
Glutathione S-transferase (GST) was purified from Pseudomonas sp. DJ77, and its N-terminal sequence was determined to be MKLFISPGACSL. A specific tyrosyl residue in the vicinity of the N terminus is conserved in all the known cytosolic GSTs and has been shown to function as a catalytic residue in $\alpha$, $\mu$, $\pi$ class GSTs from mammals. However, Pseudomonas sp. DJ77 GST has the Phe-4 and Ile-5 instead of Tyr in N-terminus. Its replacement with tyrosine did not significantly affect the enzyme activity. Results from in vitro biochemical analyses were confirmed by the in vivo activity-based CDNB growth inhibition analyses. Our results clearly indicate that GST of Pseudomonas sp. DJ77 has a novel reaction mechanism different from that of mammalian GSTs.
Enrichment techniques led to the isolation of a Pseudomonas sp. strain P2 from municipal waste-contaminated soil sample, which could utilize different isomers of a commercial mixture of 4-nonylphenol when grown in the presence of phenol. The isolate was identified as Pseudomonas sp., based on the morphological, nutritional, and biochemical characteristics and 16S rDNA sequence analysis. The ${\beta}$-ketoadipate pathway was found to be involved in the degradation of phenol by Pseudomonas sp. strain P2. Gas chromatography-mass spectrometric analysis of the culture media indicated degradation of various major isomers of 4-nonylphenol in the range of 29-50%. However, the selected ion monitoring mode of analysis of biodegraded products of 4-nonylphenol indicated the absence of any aromatic compounds other than those of the isomers of 4-nonylphenol. Moreover, Pseudomonas sp. strain P2 was incapable of utilizing various alkanes individually as sole carbon source, whereas the degradation of 4-nonylphenol was observed only when the test organism was induced with phenol, suggesting that the degradation of 4-nonylphenol was possibly initiated from the phenolic moiety of the molecule, but not from the alkyl side-chain.
Bacteria have evolved various types of resistance mechanism to toxic heavy metals, such as arsenic and antimony. An arsenical and antimonial resistant bacterium was isolated from a shallow creek draining a coal-mining area near Taebaek City, in Kangwon-Do, Korea. The isolated bacterium was identified and named as Pseudomonas sp. KM20 after biochemical and physiological studies were conducted. A plasmid was identified and its function was studied. Original cells harboring the plasmid were able to grow in the presence of 15 mM sodium arsenite, while the plasmid-cured (plasmidless) strain was sensitive to as little as 0.5 mM sodium arsenate. These results indicated that the plasmid of Pseudomonas sp. KM20 does indeed encode the arsenic resistance determinant. In growth experiments, prior exposure to 0.1 mM arsenate allowed immediate growth when they were challenged with 5 mM arsenate, 5 mM arsenite, or 0.1 mM antimonite. These results suggested that the arsenate, arsenite, and antimonite resistance determinants of Pseudomonas sp. KM20 plasmid were indeed inducible. When induced, plasmid-bearing resistance cells showed a decreased accumulation $of\;73^As$ and showed an enhanced efflux $of\;^73As$. These results suggested that plasmid encoded a transport system that extruded the toxic metalloids, resulting in the lowering of the intracellular concentration of toxic oxyanion. In a Southern blot study, hybridization with an E. coli R773 arsA-specific probe strongly suggested the absence of an arsA cistron in the plasmid-associated arsenical and antimonial resistance determinant of Pseudomonas sp. KM20.
Pseudomonas sp. P20 was a bacterial isolate which has the ability to degrade 4-chlorobi- phenyl(4CB) to 4-chlorobenzoic acid via the process of meta-cleavage. The recombinant plasmid pCK1 was constructed by insetting the 14-kb EcoRI fragment of the chromosomal DNA containing the 4CB-degrading genes into the vector pBluescript SK(+). Subsequently, E. coli XL1-Blue was transformed with the hybrid plasmid producing the recombinant E. coli CK1. The recombinant cells degraded 4CB and 2,3-dihydroxybiphenyl(2,3-DHBP) by the pcbAB and pcbCD gene products, respectively. The pcbC gene was expressed most abundantly at the late exponential phase in E. coli CK1 as well as in Pseudomonas sp. P20, and the level of the pcbC gene product, 2,3-DHBP dioxygenase, expressed in E. coli CK1 was about two-times higher than in Pseudomonas sp. P20. The activities of 2,3-DHBP dioxygenase on catechol and 3-methylcatechol were about 26 to 31% of its activity on 2,3-DHBP, but the enzyme did not reveal any activities on 4-methylcatechol and 4-chlorocatechol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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