• 한국균학회지
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• 제51권4호
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• pp.389-396
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• 2023

본 연구에서는 교배형 분석을 활용하여 표고의 교배균주를 육성하고 그로부터 발생한 자실체의 특성을 알아보고자 하였다. 단핵균주 분리에는 산백향과 청흥1호 품종을 이용하였는데, 산백향은 버섯으로부터 100여개의 단포자를 분리하였으며, 청흥1호는 원형질체 분리 및 재생과정을 통해 단핵균주를 얻었다. 이렇게 얻는 단핵균주는 우선 교배형 분석을 실시하였으며, 교배 가능한 조합을 확인하고 총 60개의 균주를 교배하였다. 톱밥재배는 2 kg 사각블럭배지를 이용하였으며, 배양 120일 후에 버섯 발생처리를 하였다. 그 결과 60균주의 교배성공률은 100%에 이르렀으며, 그 중 55개인 91.7%의 균주에서 버섯이 발생하였다. 모든 균주에서 정상적인 버섯이 발생하였으며, 그 중 10개 균주에서는 주름살을 온전하게 형성하지 않는 기형버섯도 발생하는 것을 확인하였다. 버섯의 형태적인 특성은 매우 다양하게 나타났으며, 이러한 특성을 사전에 파악하기 위해서는 교배모본의 특성을 평가할 수 있는 연구가 더 필요하다.

• 미생물학회지
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• 제33권1호
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• pp.31-37
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• 1997

Aspergillus niger와 Penicillium chrysogenum간의 lipase 우수 생성 종간 형질전환체를 획득하고, 유전분석을 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) P. chrysogenum의 영양요구물을 확인하여 본 결과 Tyrosine 요구성임을 알 수 있었다. (2) 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생 조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KCl, 효소의 처리 시간은 180분 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. (3) 핵전이에 의한 형질전환의 빈도는 $1.3{\times}$10^{-3}$$ $-3.8{\times}$10^{-3}$$으로 비교적 낮은 편이었다. (4) 유전적 안정성, conidia의 크기, DNA 함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. (5) 형질전환체의 lipase활성은 모균주와 비교하여 1.4-2.2배 증가하였다.

• 한국균학회지
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• 제27권6호
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• pp.399-405
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• 1999

${\alpha}-amylase$ 생산력이 우수한 야생형인 S. fiburigera의 핵을 순수분리하여 영양요구성 변이주인 S. cerevisiae(tyr-, ura-)의 원형질체에 전달하는 핵전이를 이용하여 종간잡종을 형성시킨 후 이들 형질전환체로부터 ${\alpha}-amylase$ 고생산 균주를 획득하였다. 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6M KC1, 효소처리 시간은 90분, 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환율은 0.25%로 비교적 낮은 편이었으며, 유전적 안정성, 세포크기의 체적, DNA함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. 형질전환 체의 ${\alpha}-amylase$ 활성은 모균주와 비교하여 약 $1.2{\sim}1.9$배 증가하였다.

• 미생물학회지
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• 제28권2호
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• pp.128-133
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• 1990

고등한 진핵생물에서 nucleosome 구성에 중요한 역할을 하는 histone 단백질이 하등한 진핵생물에서도 존재하는지의 여부를 알아보기 위하여 실험을 하였다. 하등한 균류에 속하는 Rhizopus 속의 5종(R. acidus, R. arrhizus, R. formosaensis. R R. japoηicus, R. oryzae)을 재료로 하여 15% polyacrylamide acid-urea gel과 18% P이yacηlam ide SDS-gel을 이용하여 전기영동하였다. 분자량을 비교하기 위하여 marker protein으로 Cytochrome C와 함께 15% polyacrylamide SDS-gel을 이용하였으며 모든 gel에서 standard로써 calf thymus histone을 사용하여 electrophoreticmobility를 비교하였고 호 한 속내에서의 종간의 차이가 있는지를 설험하였다 실험결과는 한 속내에서 종에 따른 차이로 볼 수 없었으며 standard인 calf thymus histone HI. H2A, H2B, H3, H4와 유사한 electromobility흘 갖는 protein band를 확인할 수 있었으며 HI histone은 t성확하게 일치되지가않았다.따라서 하등한균류인Rhizopµs에서도고등 진핵생불과유사한단백질이 존재함을 주정할 수가 있었다.

• 한국수산과학회지
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• 제32권1호
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• pp.117-120
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• 1999

해산 녹조류 참흩파래, Monostroma nitidum의 엽체를 효소처리하여 다량의 원형질체를 분리하였다. 최적 효소액의 조합은 $4\%$ R-10+$3\%$ Macerozyme R-10+$3\%$ Abalone acetone power로서 생체조직 300mg 당 $4.41\times10^6$개의 원형질체가 분리되었다. 원형질체의 수율은 효소처리 270분에 최대였다. 분리 직후의 원형질체는 구형으로 직경 $13\~33\mu$m의 크기였다. 분리된 원형질체는 0.4M mannitol을 함유한 f/2배지에서 배양한 후 매주 mannitol이 함유되지 않은 f/2 배지로 절반씩 교환함으로서 분화율을 높일 수 있었다. f/2배지를 사용한 적정 배양조건에서 원형질체는 배양 3일 후 새로운 세포벽을 형성하였으며 10일 후 발아하기 시작하여 엽체로 발달하였다. 항생물질의 배지내 첨가는 배양체의 분화를 저해하였다.

• Journal of Microbiology
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• 제44권4호
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• pp.383-395
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• 2006

Four different Trichoderma strains, T. harzianum CECT 2413, T. asperellum T53, T. atroviride T11 and T. longibrachiatum T52, which represent three of the four sections contained in this genus, were transformed by two different techniques: a protocol based on the isolation of protoplasts and a protocol based on Agrobacterium-mediated transformation. Both methods were set up using hygromycin B or phleomycin resistance as the selection markers. Using these techniques, we obtained phenotypically stable transformants of these four different strains. The highest transformation efficiencies were obtained with the T. longibrachiatum T52 strain: 65-70 $transformants/{\mu}g$ DNA when transformed with the plasmid pAN7-1 (hygromycin B resistance) and 280 $transformants/l0^7$ spores when the Agrobacterium-mediated transformation was performed with the plasmid pUR5750 (hygromycin B resistance). Overall, the genetic analysis of the transform ants showed that some of the strains integrated and maintained the transforming DNA in their genome throughout the entire transformation and selection process. In other cases, the integrated DNA was lost.

• 한국초지조사료학회지
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• 제13권3호
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• pp.170-176
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• 1993

이탈리안 라이그라수(Lolium muliflorum Lam.)의 원형질체 분리 및 생존성에 영향을 미치는 몇가지 요인들에 대하여 조사한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 성숙배. 미숙배 및 유종에 있어서 분화력이 높이 캘러스 유기는 4^{\circ}C.$에서 7일간 저온처리와 기본배지에 $AgNO_3$ 5mg/을 첨가한 것이 효과적이었다. 캘러스로부터의 재분화는 BAP 0.2mg/l와 2,4-D 2mg/l의 조합에서 가장 좋았다. 유종에서 유기되 현탁배양 세포를 액체배지에서 5일 간 진탕배양한 후 효소(4% cellulase R10, 2% macerozyme, 2% pectinase)와 삼투압 조절제인 0.6M mannitol을 첨가한 용액에서 생존율이 높은 원형질체를 얻었다. 그리고원형질체는 KM8P배지의 agarose 고체배지에서 헤포분열과 미세포괴가 이루어졌다.

• 한국수산과학회지
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• 제32권2호
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• pp.155-159
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• 1999

일반적으로 규조류는 무독한 적조생물로 알려져 있으나, Chaetoceros spp.의 특정한 종은 적조를 형성할 경우 수산생물에 직$\cdot$간접적인 영향을 미치기도 한다. 본 연구는 해양 세균을 이용하여 규조류 Chaetoceros spp. 적조의 방제기술 개발을 위한 목적의 일환으로 우리나라 연안에서 Chsetoceros calcitrans증식 저해균을 검색 분리하였으며 분리균의 세균학적 특성과 각종 규조류의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 1. C. calcitrans에 대해서 증식 저해활성이 간한 균을 검색$\cdot$분리한 결과 Alteromonas sp.로 동정되었으며, 이 균을 Alteromonas sp. SR-14로 명명하였다 2. Alteromonas sp. SR-14는 생해수, 숙성해수, 무기염 배지 및 미세조류 C. calcitrans 배양석액에서 증식할 수 있었다. 3. Alteromonas sp. SR-14는 C. calcitrans, C. muclleri 및 C. negracile 등에 대해서만 증식 저해활성이 있었다. 4. Alteromonas sp. SR-14에 의한 C. calcitrans의 사멸과정은 대부분의 경우 외형을 그대로 유지하면서 세포 내용물만 서서히 소실되었고, 부분적으로는 protoplast도 출현하였다가 용해되는 경우도 있었다.

• BMB Reports
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• 제52권11호
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• pp.653-658
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• 2019

MYB-type transcription factors (TFs) play important roles in plant growth and development, and in the rapid responses to unfavorable environmental conditions. We recently reported the isolation and characterization of a rice (Oryza sativa) MYB TF, OsMYB102, which is involved in the regulation of leaf senescence by downregulating abscisic acid (ABA) biosynthesis and the downstream signaling response. Based on the similarities of their sequences and expression patterns, OsMYB102 appears to be a homolog of the Arabidopsis thaliana AtMYB44 TF. Since AtMYB44 is a key regulator of leaf senescence and abiotic stress responses, it is important to examine whether AtMYB44 homologs in other plants also act similarly. Here, we generated transgenic Arabidopsis plants expressing OsMYB102 (OsMYB102-OX). The OsMYB102-OX plants showed a delayed senescence phenotype during dark incubation and were more susceptible to salt and drought stresses, considerably similar to Arabidopsis plants overexpressing AtMYB44. Real-time quantitative PCR (RT-qPCR) revealed that, in addition to known senescence-associated genes, genes encoding the ABA catabolic enzymes AtCYP707A3 and AtCYP707A4 were also significantly upregulated in OsMYB102-OX, leading to a significant decrease in ABA accumulation. Furthermore, protoplast transient expression and chromatin immunoprecipitation assays revealed that OsMYB102 directly activated AtCYP707A3 expression. Based on our findings, it is probable that the regulatory functions of AtMYB44 homologs in plants are highly conserved and they have vital roles in leaf senescence and the abiotic stress responses.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제50권
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• pp.11-18
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• 2023

Manihot esculenta Crantz, commonly known as cassava, is a staple aliment that is a significant source of revenue for farmers. The embryogenic callus is crucial in the genetic engineering of various crop species, including cassava. Four cultivar cassava landraces from East Java were assessed for their ability to produce friable embryogenic callus (FEC) for protoplast isolation. In this study, four cassava cultivars; (Kaspro, Kuning, Gajah, and Gendruwo); were used to obtain FEC, which involved the culture of immature leaf lobes (ILLs) and apical buds (ABs) media containing MS supplemented with 33 μM picloram and 2 μM of CuSO₄ (M1) or MS supplemented with 50 μM 2,4-D and 2 μM CuSO₄ (M2). The highest FEC induction efficiency ranged from 72% to 57%, and the highest FEC number ranged from 4.7 to 3.7 with AB explants in media containing MS + 33 μM pilocram and 2 μM CuSO₄ (M1). On the other hand, the efficiency of somatic embryogenesis induction ranged from 67% to 53%, and the number ranged from 4.4 to 3.4. The efficiencies of FEC induction ranged from 48% to 42%, and the number ranged from 3.1 to 2.6 with AB explants in media containing MS + 50 μM 2,4-D and 2 μM CuSO₄ (M2); the efficiency of FEC induction ranged from 56% to 50%, and the value ranged from 3.6 to 2.4 with ILL explants. The FEC induction of the Gendruwo cultivar, which was examined using AB and ILL explants, demonstrated the lowest efficiency. Nevertheless, all four cultivars showed the ability to generate FEC, even though their effectiveness differed depending on the explant genotype and the applied media.