아가리쿠스버섯의 약효성분으로 고형 음용차를 제조하기 위하여 건 버섯을 열수추출, 에탄올 침전, 투석, 동결건조 등의 처리를 행하여 단백다당체를 분리하고 부형제로 dextrin(DE=9, DE=23) 및 ${\beta}$-cyclodextrin(CD)을 각각 첨가하여 분무건조한 후 압출하여 과립을 제조한 다음 부형제의 종류에 따른 과립의 품질특성을 조사 비교하였다. 과립의 수분함량은 DE=9 첨가구에서 가장 높았고, 총당 함량은 ${\beta}$-CD, DE=23, DE=9 첨가구 순이었으나, pH와 단백질함량은 부형제에 따른 유의적인 차이를 보이지 않았다. L값은 DE=9, ${\beta}$-CD, DE=23 첨가구 순이었고, -a값은 부형제간 거의 차이가 없었으며, b값은 ${\beta}$-CD 첨가구에서 가장 높게 나타났다. 과립의 용해도는 DE=9보다 DE=23과 ${\beta}$-CD 첨가구에서 높았으며 두 종류의 부형제간 차이는 보이지 않았다. 흡습성은 ${\beta}$-CD 첨가구에서 가장 크게 나타났으며 DE=9 첨가구에서 가장 적게 나타났다. 관능검사 결과 종합적인 기호도는 ${\beta}$-CD가 가장 우수하였다.
담자균류인 좀우단버섯 Paxillus atrotomentosus의 항암성분을 구명하기 위하여 그 균사체를 열수 추출하여 단백 다당체를 분리하였고, 이를 DEAE-cellulose ion 교환수지와 Sepharose CL-4B gel filtration chromatography로 정제하였다. 분획들을 각각 20 또는 50 mg/kg/day의 용량으로 마우스의 복강내에 투여하였을 때, sarcoma 180 고형암에 대하여 Fr. A가 68.51%의 가장 높은 억제율을 나타내었다. 항암기전을 밝히기 위하여 마우스에 대한 면역학적 실험을 한 결과, Fr. A는 대조군에 비해 활성화된 macrophage에서 분비되는 superoxide anion 양을 1.1배, hemolytic plaque assay에서의 용혈반 형성 세포수를 2.3배 증가시켰고 감소된 DTH 반응을 정상수준으로 회복시켰다. 암세포에 대한 직접적인 영향을 조사하기 위하여 MTT assay를 한 결과 대조군에 비해 세포의 viability가 약 32% 감소됨을 나타내었다. 화학분석에 의해, 이 성분은 fucose, galactose, glucose, mannose 및 xylose로 구성된 86.36%의 다당체와 14종의 아미노산으로 구성된 1.52%의 단백질 및 1.64% hexosamine으로 구성된 protein-bound polysaccharide이었다. 이 성분을 paxillan으로 명명한다.
Kim, Byong-Kak;Cho, Hye-Youn;Kim, Jin-Sook;Kim, Ha-Won;Choi, Eung-Chil
생약학회지
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제24권3호
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pp.203-212
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1993
To find antitumor components in the hot water extract of the cultured mycelia of Ganoderma lucidum, protein-bound polysaccharides were purified and fractionated (Fr. I-V) by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepbarose CL-4B gel filtration. When a dose of 20 mg/kg/day of each was, i.p., injected into ICR mice, the inhibition ratios against the solid form of sarcoma 180 were $64.2{\sim}75.8%$. The antitumor component was examined for immunological activity. It increased the amount of superoxide anion released by induced macrophages in peritoneal cavity to 1.8 times and the count of hemolytic plaque-forming cells (PFC) was increased to 4.4 times as compared with those of the control group. It contained 68.6% polysaccharide which consisted of mannose, glucose, galactose, fucose and xylose and 5.1% protein consisting of 17 amino acids. The contents of hexosamine were 0.78%. The molecular weight of Fr. V that showed the highest antitumor activity was $5.8{\times}10^4$ dalton by Sepharose CL-4B gel filtration. It was named lucidan.
한국산 고등균류의 성분중에서 항암성분을 탐색하고자, 경기도 수원에서 채집한 간버섯 Trametes sanguinea (L. ex Fr.) Lloyd.로 부터 무미 무취인 짙은 갈색 분말을 추출 분리하였다. 이 물질은 마우스에 이식된 sarcoma 180에 대해 높은 저지율을 보였고, 그 저지작용은 이 물질의 치료적인 투여에 의해서 나타났다. 이 물질의 성분은 다당류와 단백질이었으며, 다당류는 fucose, glucose와 galactose의 3종의 당을 함유하였다. 단백질 분획은 13종의 아미노산으로 구성되었으며, 특히 산성 아미노산이 많은 반면에 염기성 아미노산은 적었다.
한국산 고등 균류의 항암성분을 연구하고자 강원도에서 채집한 붉은싸리버섯 Ramaria formosa $(Fr.)Qu\acute{e}l$. 로 부터 추출, 농축, 침전시킨후, 그 침전을 원심분리하고 Visking tube를 사용하여 정제한 결과 단백질-다당체를 얻었다. 이 물질의 항암 효과를 쥐에 이식된 sarcoma 180에 대하여 시험하였으며 50 mg/kg/day의 용량으로 10일간 투여한 결과 그 종양억제율은 66%였다. 8마리중 2마리에서는 완전한 종양 퇴화를 관찰하였다. 이 항암 성분을 화학적으로 분석하여 그 다당체의 대부분은 4종의 단당으로 구성되었고 단백질 부분은 14종의 아미노산으로 구성되어 있음을 밝혔다.
조개느타리 Pleurotus pulmonarius을 액내 배양하여 항암 성분인 단백성 다당체를 얻었다. 이 성분의 항암 효과는 20 mg/kg/day 투여군에서 51.0 %의 저지율을 나타내었다. 또한 단백성 다당체는 DEAE-Sephadex 이온 교환수지와 Sephadex G-200을 이용하여 정제하였고 여기서 Fraction $C_1$인 항암성분을 얻었다. 이 항암성분은 다당체와 단백질로 구성되어 있었으며 항암 효과는 10 mg/kg/day 투여군에서 81.8 %의 저지율을 보였다. 이런 항암작용의 기전을 알기 위해 복강내에 Fraction $C_1$을 투여하고 이에 대한 복강세포의 증가를 관찰한 결과 면역세포 중 macrophage의 증가가 두드러겼으며 이는 soluble starch와 비교해 볼 때 훨씬 많은 macrophage 증가 효과가 있음을 증명하였다. 이 성분을 pulmonaran이라 명명하였다.
To determine contents of inorganic elements of Ganoderma lucidum, the horn-shaped carpophores and the pileus of Ganoderma lucidum were incinerated and analyzed by inductively coupled plasma atomic emission spectrophotometry. The ash contents of the pileus and the horn-shaped carpophore were 1.48% and 1.40%, respectively. The pileus contained calcium, magnesium, sodium, manganese, iron, zinc and germanium in that order. The horn-shaped carpophore contained magnesium, calcium, zinc, manganese, iron, copper and germanium in that order. To examine the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum for immunopotentiating activity, its fruit bodies were extracted with hot water. Purification of the extract was carried out by acetone precipitation and dialysis. The fraction obtained during the purification procedure consisted of a polysaccharide moiety (51%) and a protein moiety (5%). When the compound was administered intraperitoneally to the mice at a dose of 50mg/kg, it enhanced the accumulation of the peritoneal exudate cells, macrophage and polymorphonuclear leucocytes, thereby indicating immunopotentiation.
To find antitumor components from higher fungi, the mycelia of Collybia confluens (Pers. ex Fr.) Kummer were cultured in artificial media. For efficient production of the mycelia, the influences of various modifications of culture conditions were examined. A water-soluble protein-bound polysaccharide fraction, Fr. A, was obtained from the mycelia by hot water extraction. When Fr. A was purified and fractionated by DEAE-cellulose and Sepbadex G-200 gel filtration chromatographies into four fractions which were designated B, C, C-I and C-II. The tumor inhibition ratios of these fractions ranged from 46% to 75% against the solid forms of sarcoma 180 in ICR mice at doses of 20 and 50 mg/kg/day when given intraperitoneally. Especially, Fr. C which was named Collyban(CB) exhibited a marked life-prolonging effect of the mice against ascitic forms of sarcoma 180 at a dose of 50 mg via i.p. administration. To extend spectra of the antitumor activities and eliminate the effects of allograft rejection, the characterization of antitumor effects of CB was performed in syngeneic host-tumor systems. It did not show any antitumor activity against L1210 murine leukemia in $CD_2Fl$ mice but prolonged their life span against ascitic forms of $MM_{46}$ carcinoma in $C_3H/He$ mice. Also it exhibited antitumor activity against human cervical cancer HeLa cells that were xenografted into nude mice having BALB/c genetic backgrounds by the i.p. injection at a dose of 100 mg/kg/day. In order to characterize the antitumor components, CB was examined by chemical analysis. It was acidic protein-bound polysaccharides composed of 31% polysaccharide, 27% protein and 3% hexosamine. CB was fractionated into two fractions, Fr. C-I(M.W.: 500 Kd) and Fr. C-II(M.W.:30 and 8 Kd) by Sephadex G-200 gel filtration chromatography.
영지버섯 Ganoderma lucidum과 잔나비걸상버섯 Ganoderna applanatum의 원형질체 융합균주 5개에 대하여 항암실험을 실시하여 그 중에서 다른 것에 비해 항암력이 높은 융합균주 F-2를 선발하였다. 그 항암성분을 조사하기 위하여 융합체의 균사를 액내 배양하고 열수추출물로부터 얻은 단백 다당체를 DEAE cellulose ion exchange column chromatography와 Sepharose CL-4B gel filtration을 이용하여 5가지 분획(Fr. I-V)으로 분리, 정제하여 모균주들과의 차이점을 비교, 분석하였다. 모균주와 분리한 각 성분들을 20mg/kg/day 용량으로 마우스의 복강에 투여하였을 때 sarcoma 180 고형암에 대하여 균주보다 융합체 성분(Fr. ll)의 종양억제율이 최고 1.5배로 증가되었다. 그리고 마우스의 면역에 영향을 미치는 항암성분을 연구한 결과, 대조군에 비해 활성화된 대식세포에서 분비되는 superoxide anion의 양을 1.2배, 비장세포중의 용혈반 형성 세포수를 4.3배로 증가시켰다. 화학분석에 의하면 이 성분은 glucose, galactose, mannose, fucose와 xylose로 구성된 다당류가 85.2%이며 15종의 아미노산으로 구성된 단백질이 0.39%이었고, hexosamine이 0.39%로 구성되었으며 분자량은 $5.6{\times}10^4$ dalton이었다.
Three Angelica sinensis polysaccharide fractions (APFs), named APF1, APF2 and APF3, were isolated and purified from Radix A. sinensis and their antioxidant activities were evaluated in isolated mouse peritoneal macrophages by pretreatment with APFs before exposure to 0.2 mM tertbutylhydroperoxide (t-BHP). The results showed that pretreatment of the macrophages with APFs as low as $10{\mu}g$/ml could significantly enhance t-BHP-decreased cell survival, intracellular glutathione (GSH) content and superoxide dismutase (SOD) activity, and also inhibited t-BHP-increased lactate dehydrogenase (LDH) leakage and malondialdehyde (MDA) formation (p < 0.05), and APF3 was the most active fraction, followed by APF2 and APF1 in decreasing order. Furthermore, we found for the first time that the bound-protein in APF3 was associated closely with the protective effects and the polysaccharide inhibited the excess NO release from t-BHP-activated macrophages to protect host cells.
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