• 동의생리병리학회지
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• 제17권6호
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• pp.1448-1452
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• 2003

The water extract of Scutellariae radix was treated to rat and the primary culture of hepatocytes, and the expressions of several glutathione S-transferase (GST) isozymes and the activity of GST Yc1/2 were investigated by Western blot and by the use of HPLC. The results were obtained as follows: The water extract of Scutellariae radix did not induce the expressions of cytosolic GST Ya and GST Yp in rat livers. But, the extract increased the expression of cytosolic GST Yc1/2 to 2-4 fold higher than control. The expression of GST Yc1/2 in the primary culture of rat hepatocytes was induced by the water extract of Scutellariae radix in a dose-dependent manner, reaching 21-fold over control with 50 ㎍/㎖ treatment. The induction of the expression of GST Yc1/2 in rat livers increased the formation of AFB₁-glutathione conjugate from AFB₁-8,9-epoxide which was made in the metabolism of AFB₁.

• 한국양식학회지
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• 제11권2호
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• pp.241-248
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• 1998

Vitellogenin(VTG) 합성에 미치는 A23187의 영향을 무지개송어의 배양 간세포를 이용하여 실험을 행하였다. 간세포는 2일간 배양한 후, Estradiol-$17^{\beta}$($E_2$, $2{\times}10^{-6}$M) 및 A23187 ($10^{-7)$~$10^{-5}$M)을 첨가하여 7일간 배양하였다. 그리고, $E_2$에 의한 VTG 합성시의 A23187이 미치는 영향에 대해서도 조사하였다. A23187이 미치는 영향에 대해서도 조사하였다. A23187 ($10^{-7)$~$10^{-5}$M)의 첨가에 의해 간세포에서의 VTG 합성은 농도의 증가에 따라 감소하였다.$E_2$에 의해 합성된 VTG는 A 23187 ($10^{-5}$M)의 첨가에 의해 대조군($E_2$만의 첨가)의 약 18%로 유의하게 감소하였다. 그러나,$E_2$제거로는 대조군의 약 47% 밖에 감소되지 않았다. 이러한 결과로 보아, 세포내의 저장 Ca은 번역 단계 또는 번역 후 단계를 조절함으로써, VTG 합성을 조절하는 것으로 추정된다.

• Animal cells and systems
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• 제7권3호
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• pp.227-235
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• 2003

Bisphenol A (BPA), nonylphenol (NP), and 4-tert-octylphenol (OP) are known endocrine disrupting chemicals (EDCs) with estrogenic activity in fish. This study compared the effects of BPA, NP and OP on in vitro vitellogenin (VTG) synthesis in primary cultures of hepatocytes of the Chinese minnow Phoxinus oxycephalus. The VTG secreted into the culture medium was measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which we developed in this study using an antibody prepared from homogenates of Chinese minnow egg. VTG synthesis was induced by estradiol-17$\beta$ ($E_2$) and phenols (BPA, NP and OP) treatment. $E_2$ at concentrations of 10$^{-6}$ M or higher increased VTG levels significantly (P < 0.05). Exposure to 10^5\;M\;BPA\;or\;10^-4$M NP and OPinduced in vitro VTG synthesis (P < 0.01). However, $10^-3$ M BPA, NP or OP did not induce VTG synthesis. These results suggest that SPA has the highest estrogenic potential in Chinese minnow hepatocytes. Tamoxifen, an anti-estrogen, drastically blocked the production of VTG by phenols (BPA, NP and OP) suggesting that phenols (BPA, NP and OP) may act via binding to estrogen receptor (ER) in Chinese minnow hepatocytes.

• 한국어류학회지
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• 제12권3호
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• pp.173-179
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• 2000

Estradiol-$17{\beta}(E_2)$와 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2, 4- D)가 난황 전구물질의 합성에 미치는 영향을 넙치 Paralichthys olivaceus 간세포의 초대 배양을 통하여 조사하였다. 배양간세포의 생존율은 배양온도 $27^{\circ}C$에 서 가장 높게 나타났으며, $15^{\circ}C$에서는 생존율이 급격히 감소하여 약 50%의 생존율을 나타내었다. $E_2$에 의한 VTG 의 합성은 $10^{-6}M$에서 최대치를 나타내었다. 2, 4-D $10^{-7}\sim10^{-5}M$의 첨가에 의해 VTG의 합성은 이루어지지 않았다. 그러나, 저농도인 $10^{-8}M$에서는 VTG의 합성이 증가하였다. $E_2$ 및 2, 4-D에 의해 합성된 VTG는 $10^{-6}M$ tamoxifen의 첨가에 의해 유의하게 억제되었다 (P<0.01). 본 연구 결과에서 $E_2$와 2, 4-D의 동시 첨가는 VTG의 합성을 억제하지 않았다. 이러한 결과는 2, 4-D의 작용이 $E_2$와 유사한 작용을 가지지만, VTG의 합성에 있어서 $E_2$ 수용체에의 작용 양식은 서로 다른 것으로 추정된다.

• 한국간담췌외과학회지
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• 제27권4호
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• pp.342-349
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• 2023

Backgrounds/Aims: Liver organoids have emerged as a powerful tool for studying liver biology and disease and for developing new therapies and regenerative medicine approaches. For organoid culture, Matrigel, a type of extracellular matrix, is the most commonly used material. However, Matrigel cannot be used for clinical applications due to the presence of unknown proteins that can cause immune rejection, batch-to-batch variability, and angiogenesis. Methods: To obtain human primary hepatocytes (hPHs), we performed 2 steps collagenase liver perfusion protocol. We treated three small molecules cocktails (A83-01, CHIR99021, and HGF) for reprogramming the hPHs into human chemically derived hepatic progenitors (hCdHs) and used hCdHs to generate liver organoids. Results: In this study, we report the generation of liver organoids in a collagen scaffold using hCdHs. In comparison with adult liver (or primary hepatocyte)-derived organoids with collagen scaffold (hALO_C), hCdH-derived organoids in a collagen scaffold (hCdHO_C) showed a 10-fold increase in organoid generation efficiency with higher expression of liver- or liver progenitor-specific markers. Moreover, we demonstrated that hCdHO_C could differentiate into hepatic organoids (hCdHO_C_DM), indicating the potential of these organoids as a platform for drug screening. Conclusions: Overall, our study highlights the potential of hCdHO_C as a tool for liver research and presents a new approach for generating liver organoids using hCdHs with a collagen scaffold.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제13권4호
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• pp.355-358
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• 1990

In order to investigate the cellular mechanisms of hypoglycemic of brazilin, hepatocyte monolayer culture was introduced and, glycogen synthesis rate and insulin binding were measured as parameters. Glycogen synthesis and insulin sensitivity were remarkably augmented by the treatment of brazilin. Brazilin slightely increased insulin binding. Scatchard analysis revealed that this increase in insulin binding was not due to increase in the binding capacity but in binding affinity. These results suggest that the augmentation of hepatic glycogenesis and insulin sensitivity by brazilin may play an important role in the improvement of hyperglycemia.

• 한국환경농학회지
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• 제22권2호
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• pp.94-99
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• 2003

본 연구의 목적은 랫드 간세포 일차배양에서 카드뮴에 의해 유발된 세포독성 및 지질과산화에 대한 셀레늄의 항산화 및 간보호 효과를 조사하기 위함이다. 이를 위해 2개의 실험을 수행하였다. 실험 1에서는, 1, 10, 50, 100 및 $50\;{\mu}M$의 다양한 농도의 카드뮴으로 6시간 동안 간세포를 일차 배양하였다. 간세포 생존율과 지질과산화는 각각 MTT 방법과 TBARS 방법으로 측정하였다. 항산화 효과와 간보호 효과는 각각 GOT와 GSH-Px 활성을 측정함으로써 결정하였다. 카드뮴은 농도 의존적으로 세포 생존율을 감소시켰으며 지질과산화는 증가시켰다. 세포 생존율과 지질과산화 간에 유의적인 음의 상관관계(r=-0.943, p<0.01)가 관찰되었다. 카드뮴은 $50\;{\mu}M$ 농도에서 GOT의 활성을 증가시켰으나 GSH-Px의 활성은 감소시켰다. 실험 2에서는 셀레늄이 카드뮴에 의해 유발된 독성 및 지질과산화에 대한 효과를 연구하기 위해 $100\;{\mu}M$의 카드뮴과 0.01, 0.1 및 1 ppm의 다양한 농도의 셀레늄으로 6시간 동안 간세포 일차 배양하였다. 세포 생존율과 GSH-Px의 활성은 1 ppm의 셀레늄에 의해 증가되었다. 반면에, 지질과산화와 GOT의 활성은 0.1 ppm의 셀레늄에 의해 감소되었다. 이러한 연구 결과는 셀레늄이 카드뮴에 대한 항산화 및 보호 효과를 나타내 보이고 있다.

• 한국수산과학회지
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• 제30권2호
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• pp.282-290
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• 1997

Vitellogenin 합성 메카니즘을 밝히기 위한 연구의 일환으로써, 뱀장어의 간세포배양계를 이용하여 Vg합성에 대한 $E_2$ 및 뇌하수체호르몬들의 영향에 대해 조사하였다. 일반적으로 어류를 비롯한 난생 척추동물들의 Vg은 $E_2$의 자극에 의해 간장에서 합성분비되어 지나 뱀장어 Vg은 $E_2$으로는 충분한 합성은 이루어지지 않았다. 그러나 $E_2$와 GH 및 PRL을 함께 첨가하면 Vg합성이 활발하게 유도되어 지는 것이 관찰되었다. $E_2$ 만으로 Vg이 합성되어지지 않는다면 세포내에 Vg합성 및 $E_2$ 의 활성을 억제하는 내인성 요소들이 있을 것으로 생각되어 세포를 8일간 호르몬 첨가없이 preculture하여 시행하였으나, $E_2$만으로 Vg합성은 유도되어 지지 않고 GH 및 PRL의 도움이 필요했다. 또한 $E_2$ 만으로 10일간 배양하여 장기간 $E_2$ 로 노출시켜 Vg합성에 대한 영향을 조사한 바, 약 10일간의 $E_2$ 노출에 의해 Vg합성은 전기영동상의 확인에 의해 양적으로 다소 증가하는 것이 관찰되었으나 $E_{2}+GH$ 및 $E_{2}+PRL$의 첨가에 비해 현저한 차이를 나타내어 뱀장어의 Vg합성 유도에는 뇌하수체 호르몬들이 직접 관련되는 것으로 나타났다. 또한 $E_{2}+GH+PRL$을 함께 첨가하여 6일간 배양하여 Vg이 왕성하게 합성되어 질때에도 계속해서 GH 및 PRL들이 필요한가를 조사하였는데, 3일간 관찰한 결과 Vg의 합성 정도는 GH 및 PRL등의 첨가유무에 커다란 차이를 나타내지 않았다.는 초기균수 $3.4{\times}10^3\;CFU/g$ 및 $3.4{\times}10^4\;CFU/g$에서 각각 $2.8{\times}10^4\;CFU/g$와$9.8{\times}10^5\;CFU/g$로 $1\~1.5-log-unit$가 증가하였다.평가는 0.005였다.5IU/ml의 배지에서는 대조구의 배란율과 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 $E_2$를 제외한 스테로이드와 HCG는 동자개의 난모세포 성숙과 배란을 in vitro에서 유도할 수 있으며, $17\alpha\;20\alpha\;OHP$와 HCG는 다른 스테로이드에 비해 높은 율의 난모세포 성숙과 배란을 유도하였다.체로 잘 일치하였다. 또한 진해만의 저서동물 군집의 전반적인 계절별 공간분포는 다양도 분석 결과에서도 분명하게 나타나고 있으며, 주로 퇴적물 내의 유기물 함량에 의해 영향을 받고 있음을 알 수 있었다., Chlorella sp., yeast를 rotifer에 먹이로 투여했을 때 $S\;\pi-I$에서 lysine이 가장 높았고, PSB, Chlorellaal sp. 순으로 분석되었다. yeast에서는 검출되지 않았다./TEX>, betaine류$(0.1\~0.9\%)$의 순이었다. 연어 엑스분중의 질소분포 특징은 모든 시료에서 공통적으로 anserine과 creatine이 중요한 함질소 성분으로서 엑스분 질소에 대한 양 성분질소의 비율은 anserine이 평균 $38\%$, creatine이 평균 $31\%$로서 이 두 성분만으로 엑스분질소의 $60.9\~76.5\%$에 달하였다. 분석된 성분에 의한

• 한국어류학회지
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• 제12권3호
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• pp.180-185
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• 2000

플라스틱의 원재료로 이용되는 bisphenol-A (BPA)가 vitellogenin (VTG)의 합성에 미치는 영향을 넙치의 간세포를 초대 배양하여 조사하였다. 간세포는 2일간 사전 배양을 하였으며, estradiol-$17\beta(E_2)$ 및 BPA를 배양액에 동시 첨가하였다. 간세포는 6일간 배양한 후 배양액을 회수하여 SDS-PAGE로 분석하였다. BPA는 농도 의존적으로 총 단백질에 대한 VTG 비율은 증가하였으며, $10^{-6}M$과 $10^{-5}M$의 농도에서 유의한 차이를 나타내었다(P<0.05). 특히, BPA $10^{-5}M$의 농도에서의 총 단백질에 대한 VTG 비율은 26.36%로 $E_2$만을 첨가한 대조군과 유의한 차이를 나타내지 않았다. $E_2$와 BPA를 단독 또는 동시에 첨가하여 유도된 VTG합성은 배양액에 tamoxifen$(10^{-6}M)$을 첨가함으로서 $E_2$를 첨가한 대조군의 약 80%로 유의하게 억제되었다. 그리고, in vivo에서 $E_2$에 의해 유도된 VTG합성은 in vitro에서 간세포를 6일간 배양함에 따라 $E_2$를 첨가한 대조군의 약 22%까지 억제되었다. 이러한 감소효과는 BPA의 농도 의존적으로 지연되는 결과를 나타내었다. 따라서 넙치에서의 BPA는 $E_2$ receptor와의 반응을 통한 에스트로겐 작용에 의해 VTG합성을 유도하고, 난황형성기에서의 VTG 합성을 장시간 지속시킬 가능성이 있는 것으로 추측된다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제8권1호
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• pp.61-65
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• 2003

This study was investigated to identify the regulatory mechanism of ACC gene expression by hormones and nutrition. The fragment of ACC promoter I (PI) -220 bp region was recombined to pGL3-Basic vector with luciferase as a reporter gene. The primary hepatocyte from the rat was used to investigate the regulation of ACC PI activity. ACC PI (-220 bp)/luciferase chimeric plasmid was transfected into primary rat hepatocyte by using lipofectin. ACC PI activity was shown by measuring luciferase activity. The addition of insulin, dexamethasone, and triiodothyronine to the culture medium increased the activity of ACC PI by 2.5-, 2.3- and 1.8-fold, respectively. In the presence of 1 $\mu$M dexamethasone, the effects of insulin was amplified about 1.2-fold showing the additional effects of dexamethasone. Moreover the activity of luciferase was increased by insulin, dexamethasone, and triiodothyronine treatment approximately 4-fold. These results indicated that insulin, dexamethasone and thyroid hormone coordinately regulate ACC gene expression via regulation of promoter I activity. On the -220 to ＋21 region of ACC PI, the addition of the glucose to the culture medium increased the activity of ACC PI. With 25 mM glucose, luciferase activity increased by 7-fold. On the other hand, on the -220 bp region, ACC PI activity was not changed by polyunsaturated fatty acids. Therefore, it can be postulated that there are response elements for insulin, triiodothyronine, dexamethasone, and glucose, but not PUFAs on the -220 bp region of ACC PI.