• 제목/요약/키워드: Presynaptic plasma membrane protein

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Rat Brain cDNA Library로부터 SNAP-25 유전자의 클로닝 (Cloning of SNAS-25 Gene from Rat Brain cDNA Library)

  • 조애리;지영미;유민;이순철;유관희
    • 대한의생명과학회지
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    • 제6권1호
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    • pp.11-17
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    • 2000
  • SNAP-25는 presynaptic plasma membrane에 위치하는 단백질로서 synaptic vesicle의 docking과 fusion에 있어서 매우 중요한 역할을 한다. 생쥐 SNAP-25$^{2)}$ 유전자와 99%의 높은 homology를 갖고 있는 Z2 cDNA를 probe로 사용하여 쥐의 뇌 cDNA library에서 SNAP-25유전자를 screening하였다. 그 결과 6개 의 양성 클론을 분리 해 냈으며, 이들 각각을 S1, S2, S3, S4, S5, S6으로 명명하였다. 이 중에서 생쥐 SNAP-25와 가장 높은 homology를 보여 주고 있는 S5 클론을 선택하여 염기서열을 분석하였다. 2,100 bp의 염기서열로 구성된 쥐 SNAP-25 cDNA는 206개의 아미노산을 coding하는 618 bp의 open reading frame을 가지고 있으며, ORF는 209~211 bp에 위치하는 AUG codon에서 시작하여 827~829 bp에 위치하는 stop codon TAA에서 끝난다. 3' untranslated region에서 는 28과 19개 의 CA 반복 염기서열을 보여주고 있었으며, SNAP-25 peptide sequence에서 4개의 cystein residues는 84~91에 위치하고 있었으며, amino terminus 부분에서 amphipathic $\alpha$-helix를 형성하고 있는 것을 볼 수 있었다. 사람과 쥐의 SNAP-25 유전자는 88%, 생쥐와 쥐의 경우는 97%의 homology를 보여 주고 있었다. 그리고 사람과 쥐의 ORF에서 염기서열은 94%,생쥐와 쥐의 ORF에서 염기서열은 100%의 homology를 보여주고 있었으며 사람, 생쥐, 그리고 쥐의 ORF에서 아미노산 서열은 100%의 homology를 보여주고 있었다.

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Alteration of Immunoreactivity for SNARE Proteins in the Rat Hippocampus after Middle Cerebral Artery Occlusion

  • Park, Jung-Sun;Huh, Pil-Woo;Jung, Yeon-Joo;Park, Su-Jin;Lee, Kyung-Eun
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제8권3호
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    • pp.141-146
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    • 2004
  • Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors (SNARE) proteins, composed of two presynaptic membrane proteins [synaptosomal-associated protein of 25 kDa (SNAP-25) and syntaxin] and a presynaptic vesicular protein [vesicle-associated membrane protein (VAMP)], serve as a core of exocytotic fusion machinery, which can be affected by ischemia. Synaptic protein in core region, striatum and cortex has been shown to alter after focal ischemia, however, little is known in hippocampus. Hippocampus is remote from ischemic core, but it is one of the most vulnerable regions. Using immunohistochemistry, the present study was undertaken to investigate the alteration of expression of SNAP-25, syntaxin, and VAMP in the hippocampus of rats which were subjected to middle cerebral artery occlusion (MCAO) for 2h and allowed to reperfuse. At 2 weeks of reperfusion, the SNAP-25 and syntaxin immunoreactivity was increased in the stratum oriens of the CA1 and the stratum lucidum of the CA3 in the ipsilateral hippocampus. However, VAMP immunoreactivity didn't show significant change. These results demonstrate that the level of the presynatpic plasma membrane proteins (SNAP-25 and syntaxin) in the rat hippocampus is more sensitively affected by focal ischemia than that of the synaptic vesicle protein (VAMP).