Porcine E coli infection is a disease caused by Enterotoxin produced by Enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC). Enteric colibacillosis has become an economically important disease in pigs as a result of increasing intensification of farrowing management. The present study undertaken to obtain the antibiotic sensitivity and distribution of serogroups and pili producibility test of ETEC from E. coli isolates in Chonnam. The results obtained were as follows. 1. A total of 71 isolates identified as E, coli employing IMViC system from rectal specimens of 54 piglets with diarrhea. 2. In antibiotic sensitivity test, isolates showed high sensitivity to AN, CM, Fox, GM, but resistance to EM, NA TC. 3. The distribution of 25 Isolates of serogroups were 0141:K85(11.3%), 08:K87(8.5%), 064:K (5.6%), 0138:K8l (4.2%), 0139 :K82(2.8%), 0157:K88ac(1.4%) and 0149:K9l (1.4%). 4. MRHA of guinea pig erythrocytes was detected in 8 out of 25OK serotypes and 9 out of 46 unidentified serotypes. MRHA titers of serotypes showed from 64 to 128 in 0141: K85, 2 in 0138:K8l and no titers in 0139:K82. 5. The production of heat labile enterotoxin of ETEC was detect 39 out of 52 isolates showed $\beta$-hemolysin, 7 out of 52 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin and 6 out of 52 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin by $GM_1$ganglioside ELISA. The distribution of LT toxin were in 12 isolate showed $\beta$-hemolysin, 2 isolates showed ${\alpha}$-hemolysin and 3 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin in 25 OK serotypes.
Enzyme-catalyzed polycondensatlon reaction of aliphatic polyesters with several repeating units was studied using the biocatalytic activities of lipases from different sources. Porcine pancreatic lipase (PPL) was found to be best in utilizing bls(2,2,2-trichloroethyl) glutarate and 1,4-butanediol as substrafes. The reaction was also catalyzed to some extent by the lipases from Humicola lanuginos and Psudomonas sp. In the series of short-chain diols(C2-C4), bis(2,2,2-trichloroethyl) glutarate was iransesterified fastest with 1,4-butanediol and for the long-chain diols (PEG-300-PEG-1000), the reaction was fastest with PEG-400. With PEGs, only monoesterification product was obtained. PPL functioned well in relatively hydrophilic organic solvents such as tetrahydrofuran(THF), ether and acetonitrile. The reaction rate was accelerated as the reaction temperature was raised from $20^{\circ}C$ to $60^{\circ}C$ while Mn values of the reaction products were not affected by the reaction temperature. End group analysis by NMR showed that Mn values of the polymer were in the range of 1500-4000 daltons.
Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is an infectious and highly contagious virus of swine. In order to develop the transgenic tobacco culture cells producing PEDV antigen protein, four vectors expressing PEDV spike protein (SP) gene under the control of a CaMV 35S promoter were constructed. Four fragments of the SP region of PEDV, SP1 (444 bp, 1487-1930 bp), SP2 (1.7 kb, 2300-3987 bp), SP3 (1.4 kb, 1559-2950 bp), and SP4 (2.6 kb, 9-2643 bp) were amplified by PCR and then C-MYC tag was fused to the end of each SP gene, respectively. These cassettes are inserted into the pCAMBIA2300 (named as 35S::SP1-M, 35S::SP2-M 35S::SP3-M, and 35S::SP4-M, respectively). Tobacco (cv. BY-2) cultured cells were transformed by co-cultivation with Agrobacterium tumefaciens harboring expression vector. We selected kanamycin-resistant calli and checked for the presence of the introduced SP gene using PCR, resulting 70% of them showed the foreign gene. We selected the lines with high-level expression of PEDV antigen protein based on dot blot analysis. Southern blot analysis confirmed that the PEDV SP gene was integrated into the genome of the tobacco cultured cells. Northern blot analysis showed that the introduced gene was highly expressed in transgenic cultured cells. Transgenic tobacco cultured cells-derived antigen induced immunogenicity in mice as determined by a plaque reduction neutralization assay. These results suggest that the vectors expressing PEDV spike protein gene in this study will be useful for the development of transgenic plants and cultured cells producing PEDV antigene protein.
This study was conducted to examine in vitro developmental ability of porcine embryos after somatic cell nuclear transfer. The porcine ear fell was cultured in vitro for confluency in serum-starvation condition(TCM-199 + 0.5% FBS) far 3~6 days of cell confluency. The zona pellucida of IVM oocytes were partially drilled using laser system. Single somatic cell was individually transferred into enucleated oocytes. And the reconstructed embryos were electrically fused(single DC 1.9kv/cm, 30$\mu$ sec) with 0.3M mannitol. After electrofusion, embryos were activated(single AC 5v/mm, 5sec) and cultured in HCSU-23 medium containing 10% FBS at 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air for 6 to 8 days. The fusion rate of donor cells was 45.6, 36.8 and 46.1% in 3~4, 5~6 days of serum starvation and non serum starvation(N-S), and were 52.7. 53.0 and 51.7% in 1~2. 5~6 and 13~14 passages of donor cell culture, respectively. No significant difference was found in the fusion rate of donor cells by the duration of serum starvation treatment or the number of donor cell passages. By the size of donor cells, however, the fusion rate was significantly higher(P<0.05) for reconstructed embryos derived from 25r $\mu$m $\geq$ site of donor cells (65.3%) than that of 25~30$\mu$ m(42.5%) or 30$\mu$ m(45.5%)$\leq$ cells. The cleavage rate was significantly (P<0.05) higher in 3~4 darts of serum starvation treatment(67.1%) than that in N-S (50.7%) or 5~6 days of starvation(57.1%). The activation rate by the size of donor cells in fused oocytes was 56.5, 68.8 and 58.5%, respectively, and was not significant.
Serum TBII measured by radioreceptor assay using $^{125}I-bovine$ TSH and porcine thyroid well membrane was checked before, 6 months and 12 months after initiation of thionamide regimens in 63 Graves' disease patients and was related with their remission state. 1) A significant difference (p < 0.01) in pre-treatment TBII was noted between the remitted [N = 45, TBII $40.9{\pm}18.2%$$(mean{\pm}S.D)$] and the unremitted (N = 18, TBII $64.1{\pm}15.3%$) groups. 2) After 6 months of therapy, TBII were significantly decreased in both groups (to $20.2{\pm}10.3%$ and to $45.2{\pm}16.3%$, p<0.05 for each group) 3) At 12th month, TBII activities were not significantly decreased compared to the 6th month levels in both groups. 4) 3 of the 58 patients who were initially TBII positive (over 15%) converted negative. All the 3 belonged to the remitted group. 5) No significant differences were seen in initial and posttreatment TBII levels between propylthiouracil treated (N = 36) and methimazole treated (N = 27) cases. with above mentioned results, we observed that the TBII decreased significantly with 6 months of thionamide therapy and concluded that the pretreatment measurement of serum TBII may be clinically useful in predicting the response to thionamide regimen in the treatment of Graves' disease.
Fifty cases of open heart surgery were done in the Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Busan National University Hospital during 16 months from July, 1981 to October, 1982. The clinical data were analyzed and summerized as follows. 1. There were 34 cases (68%) of congenital anomalies and 16 cases (32%) of acquired heart diseases. Among the congenital cases, 27 were acyanotic and 7 were cyanotic. All of the acquired heat diseases, 16 cases were valvular diseases and they had valvular replacement surgery. 2. The age distribution of the congenital anomalies ranged from 6 to 27 years with mean age of 14.2 years, and the acquired heart diseases from 18 to 44 years mean age of 27.5 years. The difference of sex distribution was no significance. 3. The clinical minifestations in acyanotic congenital anomalies were exertional dyspnea (81.5%), recurrent respiratory infection (55.6%) and palpitation (22.2%), and in cyanotic congenital anomalies were exertional dyspnea (100%), syncope(57.1%) and growth retardation(57.1%), and in acquired heart diseases were dyspnea(100%), edema (62.5%) and general weakness (62.5%) 4. During the cardiopulmonary bypass, mild to moderate core cooling was performed and added topical cooling for more accurate myocardial preservation. 5. Two kinds of cardioplegic solution used in our institute were Bretschneider solution for the first 7 cases and mixed Harmann's solution 1 L with glucose 5gm, potassium chloride 26 mEq and sodium bicarbonate 24 mEq, making 376 mosmol/L and pH 8.3 at $25^{\circ}C$, for the rest 43 cases. 6. Various kinds of postoperative complications occurred in 14 cases (28%) and showed overall mortality 12%. The mortality along with each disease was 7.4% in congenital acyanotic cases, 42.9% in congenital cyanotic cases and 6.3% in acquired valvular diseases. 7. Pre-and postoperative diagnostic incompatibility was seen in 6 cases (12%). 8. The artificial valves used in the replacement surgery were lonescu-Shiley bovine xenograft in 6 cases and Carpentier-Edwards porcine xenograft in 10 cases.
In this study, we examined the effects of the methanolic extract(CL-ex) of Codonopsis lanceolata on the angiogenesis stimulated with basic fibroblast growth factor(bFGF) in vitro, using porcine pulmonary arterial endothelial cells(PPAECs). In addition, we investigated the endothelial functions involved in angiogenesis, such as proliferation, migration and secretion of matrix metalloproteinases(MMPs), using human umbilical vein endothelial cells(HUVECS). CL-ex inhibited FGF-induced sprout formation in vitro at concentrations of 0.1-100 ug/ml. Although CL-ex did not affect the proliferation of endothelial cells, CL-ex strongly inhibited the FGF-induced migration of HUVECS at concentrations of 0.1-1 ug/ml; the degree of inhibition of endothelial cells by C-ex was 49.4% at 0.1 ug/ml and 71.9 % at 1.0 ug/ml. Moreover, CL-ex inhibited the secretion of MMPs from HUVECS stimulated with FGF. Therefore, the inhibitory effect of CL-ex on angiogenesis in vitro could be explained by the inhibition of endothelial cell migration. From these results, we suggest that Codonopsis lanceolata is a useful herb for the development of therapeutics or preventive food factors for angiogenesis related diseases, such as tumors.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.108-108
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2003
The purpose of this is to investigate the effects of vitrification in open pulled straws (OPS) on in vitro survival of porcine embryos. Blastocysts were produced by in vitro fertilization of slaughterhouse-derived, in vitro matured oocytes with frozen-thawed boar semen, and subsequent culture on granulosa cell monolayer. After frozen-thawing, embryos were culture in NCSU-23 medium with 5 mM hypotaurine, 4 mg/$m\ell$ BSA and 10 ng/$m\ell$ for 48 hrs to survival tests. When blastocysts were frozen-thawed by OPS methods, the embryos with normal morphology were 32.1, 34.5 and 38.9 % in early blastocyst, blastocyst and expanded blastocyat stages. The rates of partial damaged embryos were significantly (P<0.05) higher in early biastocysts than expanded blastocysts. In another experiment, the embryos frozen by OPS methods were cultured for 48 hrs for survival and developmental rates in vitro. The proportions of embryos hatched were 11.8, 20.2 and 33.3% in embryos frozen-thawed at stages of early blastocyst, blastocyst and expanded embryos. On the other hand, The proportions of embryo with normal morphology after culture were 23.5, 25.0 and 33.3% in embryos frozen-thawed at stages of early blastocyst, blastocyst and expanded embryos. These finding indicate the possible broader application for OPS methods that this procedure described is relatively harmless, that it can be used for blastocysts of different developmental stages.
Kim, In-Seop;Choi, Yong-Woon;Lee, Sung-Rae;Cho, Hang-Bok;Eo, Ho-Gueon;Han, Sang-Woo;Chang, Chong-Eun;Lee, Soung-Min
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.4
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pp.619-627
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2001
n order to increase the virus safety of a human intravenous immunoglobulin (IVIg) that was manufactured by a successive process of cold ethanol fractionation, polyethylene glycol precipitation, and pasteurization ($60^{\circ}C$ heat treatment for 10h), a low pH incubation process (pH 3.9 at $25{\circ}C$ for 14 days) was employed as the final step. The efficacy and mechanism of the fraction III cold ethanol fractionation, pasteurization, and low pH treatment steps in the removal and/or inactivation of blood-borne viruses were closely examined. A variety of experimental model viruses for human pathogenic viruses, including the Bovine herpes virus (BHV), Bovine viral diarrhoea virus (BVDV), Murine encephalomyocarditis virus (EMCV), and Porcine parvovirus (PPV), were selected for this study. The mechanism of reduction for the enveloped viruses (BHV and BVDV) during fraction III fractionation was both inactivation and partitioning, however, it was partitioning in the case of the nonenveloped viruses (EMCV and PPV). The log reduction factors achieved during fraction III fractionation were ${\geqq}$6.7 for BHV, ${\geqq}4.7$ for BVDV, 4.5 for EMCV, and 4.4 for PPV. Pasteurization was found to be a robust and effective step in inactivating all the viruses tested. The log reduction factors achieved during the pasteurization process were ${\geqq}7.5$ for BHV, ${\geqq}4.8$ for BVDV, 3.0 for EMCV, and 3.3 for PPV. A low pH incubation was very effective in inactivating the enveloped viruses as well as EMCV. The log reduction factors achieved during low pH incubation were ${\geqq}7.4$ for BHV, ${\geqq}3.9$ for BVDV, 5.2 for EMCV, and 2.0 for PPV. These results indicate that the low pH treatment successfully improved the viral safety of the final products.
Kim Y.S.;Song S.H.;Cho S.K.;Kwack D.O.;Kim C.W.;Park C.S.;Chung K.H.
Journal of Embryo Transfer
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v.21
no.2
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pp.101-107
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2006
The objective of this study was to investigative the effects of retinol supplement to IVM and/or IVC medium on maturation, fertilization and development of pig oocytes. North Carolina State University (NCSU) 23 medium containing porcine follicular fluid (pFF) was used as base medium. Each 1 uM, 5 uM and 10 uM concentration of retinol was supplemented to IVM and /or IVC medium. When the retinol was supplemented to maturation medium, the maturation rates were not different (p>0.05) among treatment groups ($66.7{\pm}6.0{\sim}69.2{\pm}5.3%$), but the developmental rate to blastocyst stage was higher (p<0.05) in $5{\mu}M$ group ($20.4{\pm}2.6%$) than in 0 uM ($13.6{\pm}2.1%$) and 10 uM groups ($9.7{\pm}1.7%$). Moreover, total cell number was significantly greater (p<0.05) in the 5 uM group ($37.0{\pm}1.6$) than in the other groups ($29.8{\pm}1.0{\sim}33.2{\pm}1.0$). Retinol supplement to maturation medium did not significantly affect the rates of fertilization and polyspermy (p>0.05). When the retinol was supplemented to culture medium or both maturation and culture medium, the rates of cleavage, and develop to morula and blastocyst stage were not affected, while those of 10 uM group were significantly decreased (p<0.05). These results indicate that 5 uM retinol supplement in maturation medium significantly stimulates embryo development, also improves the total cell number of blastocyst stage in pig.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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