The Mafriwal dairy cattle was developed to meet the demands of the Malaysian dairy Industry. Although there are reports on its production and reproductive performance, there has been no work on its molecular characterization. This study was conducted to characterize the Mafriwal dairy cattle using microsatellite markers. Fifty two microsatellite loci were analysed for forty Mafriwal dairy cows kept at Institut Haiwan Kluang, Malaysia. The study showed two microsatellite loci to be monomorphic. Allele frequencies for the polymorphic loci ranged from 0.01 to 0.31. Genotype frequencies ranged from 0.03 to 0.33. The mean overall heterozygosity was 0.79. All polymorphic microsatellite loci deviated significantly (p<0.01) from Hardy-Weinberg equilibrium. The Mafriwal dairy cattle showed high genetic variability despite being a nucleus herd and artificial insemination being practiced.
The highly polymorphic variable number of tandem repeat (VNTR) loci in the human genome are informative markers for the genetic characterization of individuals in the paternity test and forensic science as well as for the study of human disease. In this study, VNTR loci D1S80 and D2S123 have been amplified by PCR and the amplified length polymorphic alleles were detected with a discontinuous vertical PAGE system and silver staining. For explicit DNA typing, PCR optimization, in which amplification efficiencies are similar over a wide range of allele sizes, non-specific amplifications are minimal, and new longer alleles have high amplification efficiency, has been performed by changing the PCR reaction buffer composition and thermal cycling conditions. It turned out that adding an appropriate amount of Tween 20 and NP40 to the PCR reaction buffer and raising the annealing temperature to $68^{\circ}C$ in thermal cycling made it possible for optimal VNTR loci amplification. A modified PAGE system for VNTR separation was established. Under these conditions, new longer alleles in the 01580 locus were discovered and 025123 pattern changes in colorectal tumors were observed. These technical tips are valuable for detecting various amplified fragment length polymorphisms.
Glycine soja Sieb. et Zucc., a predominantly selfing annual, has been served as a reservoir of germplasm for soybean, G. max (L.) Merr., cultivar improvement. This study describes the levels and distribution of genetic variation within and among 22 Korean populations of G. soja using starch gel electrophoresis. The species maintains very similar levels of genetic variability within populations observed in most other annuals. At the population level, the mean percent of polymorphic loci (P) was 32.6%, mean number of allele per locus (A) was 1.32, and mean expected heterozygosity (He) was 0.112. In addition, total genetic diversity (HT) calculated only for polymorphic loci was 0.347. However, significant differences in allele frequencies among populations were found for all loci (P<0.001 in each case) and, on average, about 70% of the total variation in the species is common to all populations. Indirects estimate of the number of migrants per generation (Nm=0.58, calculated from mean GST) indicates that gene flow is low among Korean populations of the species. In addition, analysis of fixation indices revealed a substantial heterozygote deficiency in most populations and at all loci. This indicates that most populations sampled may have been substructed largely due to inbreeding (predominantly selfing) and restricted gene flow, coupled with founder effect and genetic drift. Considering a high genetic divergence among populations, it is recommended that several Korean populations of the species should be preserved, especially such as populations in the eastern and southeastern Korean peninsula with high variation.
Isozymes and chromosomes of Bufo bufo and B. kangii were studied by starch gel electrohporesis and bone marrow air-drying method. Twently-three enzymes and nonenzymatic proteins in Bufo species collected in Korea provided a basis for the estimating the proportion of polymorphic loci in the genum. Of 23 loci controlling the proteins examined, 26% and 17$% were polymorphic in B. bufo and B. kangii, respectively. In B. bufo, 4 loci had 3 alleles and no loci had more than 2 alleles in B. kangii. Both species had same karyotypes with 22 chromosomes except one pair of chromosome which had sat-chromosomes in B. bufo karyotypes. The genetic similarity was approximately 0.5.
Genomic DNA isolated from two Porphyra species, P. tenera and P. dentate from Wando located on the southern coast of Korean peninsula was amplified by PCR reaction. The amplified products were separated by agarose gel electrophoresis (AGE) with decamer primer and stained with ethidium bromide. The eight arbitrarily selected primers OPA-04, OPA-06, OPB-01, OPB-08, OPB-10, OPB-11, OPB-14 and OPC-10 generated the shared loci, polymorphic, and specific loci. The size of DNA bands varies from 100 bp to 2,200 bp. The complexity of the banding patterns varies dramatically between the primers and two Porphyra species. A total of 528 loci observed were identified in P. tenera and 443 in P. dentata: 22 polymorphic loci (4.2%) in P. tenera and 30 (6.8%) in P. dentata. 154 shared loci observed, the average 19.3 per primer, were identified in P. tenera and 143 loci, the aver-age 17.9 per primer, in P. dentata species. The number of specific loci in P. tenera and P. dentata was 73 and 77, respectively. The average bandsharing value was $0.623{\pm}0.008$ with P. tenera and $0.560{\pm}0.009$ within P. dentata. The average bandsharing value between two Porphyra species was $0.408{\pm}0.004$, ranged from 0.305 to 0.564. The dendrogram obtained by the eight primers indicates four genetic clusters. The genetic distance between two Porphyra species ranged from 0.076 to 0.627. The individual no. 02 of P. tenera was genetically closely related to no. 01 of P. tenera(genetic distance=0.082). Especially, two entities between the individual DENTATA no.21 and DENTATA no. 19 of P. dentata showed the longest genetic distance (0.627) in comparison with other individuals used. In this study, RAPD-PCR analysis has revealed the significant genetic distance between two Porphyra species pairs (P<0.001).
HONG Kyung-Pyo;MYOUNG Jung-Goo;SON Jin-Ki;PARK Chul-Won
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.1
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pp.83-88
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1994
For the purpose of genetic stock indentification of three species of salmonid fishs and their hybrid, lactate dehydrogenase(LDH), malate dehydrogenase(MDH), isocitrate dehydrogenase(IDH), a-gylycerophosphate dehydrogenase(a-GPDH), malic enzyme(ME), 6-phospho-gluconate dehydrogenase(6-PGD), phosphoglucose isomerase(PGI) and phospho-glucomutase(PGM) from skeletal muscle, liver, heart and gill tissues in all three species were analyzed. Chum and masu salmon showed no polymorphic patterns in all isozyme loci, however rainbow trout were found to have polymorphic patterns at MDH-B, LDH and IDH loci. Especially, significant differences were found at MDH-B loci between the three species and the IDH patterns of rainbow trout were also different from the other two species. These loci therefore can be utilized as efficient genetic markers for the identification of hybrids and improve the efficiency of fish breeding. There was no difference except PGI between diploid and triploid isozyme patterns but PGI showed some potential as a marker for triploid in masu salmon.
Kumar, S. Naveen;Jayashankar, M.R.;Nagaraja, C.S.;Govindaiah, M.G.;Saravanan, R.;Karthickeyan, S.M.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.5
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pp.622-626
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2006
Molecular characterization of Hallikar, the native cattle breed of Karnataka, was undertaken using 19 cattle specific, highly polymorphic microsatellite markers recommended by FAO. The genomic DNA was subjected to PCR amplification and alleles were resolved through six per cent denaturing PAGE with a 10 bp DNA ladder followed by silver staining. Genotyping of animals was done based on allele size. The number of alleles ranged from three to nine with allele sizes ranging from 102 bp to 294 bp. These alleles were distributed in the frequency range between 0.0306 and 0.8673 in the population. The mean observed number of alleles was $6.368{\pm}1.4225$. The mean observed and expected heterozygosities were $0.7515{\pm}0.1734$ and $0.7850{\pm}0.1381$, respectively. The high heterozygosity observed implies presence of higher genetic variability within Hallikar breed. The PIC (Polymorphism Information Content) values ranged from 0.2322 (ETH152) to 0.8654 (ETH225). The percentage of polymorphic loci obtained was 100 as all the 19 microsatellite markers were found to be polymorphic. Except for ETH152, all the other loci had high PIC values, indicating that these markers are highly informative for characterization of Hallikar breed. The population was tested for Hardy-Weinberg equilibrium at 19 microsatellite loci, and at 74 per cent of the loci the population was found to be in disequilibrium.
Genomic DNA isolated from three geographical gizzard-shad (Konosirus punctatus) populations in Seocheon (SC), Busan (BS) and Gochang (GC) collected in the West Sea and the southern sea, respectively, off the Korean Peninsula, were PCR-amplified repeatedly. Eight selected decamer and 20-mer primers generated a total of 713 loci in the SC population, 791 in the BS population, and 732 in the GC population, with a DNA fragment size ranging from 100 bp to 2,800 bp. We identified 50 unique loci for the SC population, 70 unique loci for the BS population and 130 for the GC population: 120 shared loci for the three populations. There were 108 specific loci (15.1%) for the SC population, 74 (9.4%) for the BS population, and 67 (9.2%) for the GC population. Eight primers also generated 48 polymorphic loci (6.7%) for the SC population, 26 (3.3%) for the BS population, and 16 (2.2%) for the GC population. The similarity matrix ranged from 0.756 to 0.936 for the SC population, from 0.800 to 0.938 for the BS population, and from 0.731 to 0.959 for the GC population. The dendrogram obtained by the eight primers indicates three genetic clusters: cluster 1 (SEOCHEON 01~SEOCHEON 10), cluster 2 (BUSAN 11~BUSAN 20 and GOCHANG 23~GOCHANG 24), and cluster 3 (GOCHANG 21, 22, 25, 26, 27, 28, 29 and 30). As stated above, some individuals of the GC population appear to belong in BS population. When seeing this result, it was thought with the fact that some individuals of 2 populations seem to come and go partially. Thus, RAPD-PCR analysis revealed a significant genetic distance between the three geographical gizzard-shad populations. Using various decamer and 20-mer primers, RAPD-PCR may be applied to identify specific/polymorphic markers that are particular to a species and geographic population, and to define genetic diversity, polymorphisms, and similarities among geographical gizzard-shad populations.
A horizontal starch gel electrophoresis for enzyme proteins extracted from three Korean species and one Chinese species of Semisulcospira was carried out in order to elucidate their genetic relationships. A total of 10 enzymes were employed in three different of buffer systems. Two loci from each enzyme of GAPDH, GOT, ICDH, IDH and PEP(VL); three loci from each of three enzymes, EST, PEP(LGG) and PGDH; and five loci from GPI were observed. Most of the loci in three pleurocerid species employed showed homozygous monomorphic banding patterns and some of them were specific as genetic markers between two different species. However, EST-2, PEP(LGG-3) and PGDH-1 loci in Korean S. libertina and PEP(LGG-3), PGM-1 and PGM-2 loci in Chinese S. libertina showed polymorphic banding patterns. Three Korean Semisulcospira species including S. libertina were more closely clustered in a dendrogram within the range of genetic identity values of 0.818-0.936, and these clusters were lineated with Chinese S. libertina at the value of 0.621.
Kim, Kee-Young;Kang, Pil-Don;Ryu, Kang-Sun;Kim, Ki-Hwan;Sung, Gyoo-Byung;Ji, Sang-Deok;Kim, Mi-Ja;Kim, Ik-Soo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.25
no.1
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pp.81-92
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2012
A total of 85 Chinese-origin silkworm strains preserved in Korea were genotyped for eight polymorphic micro-satellite loci. We obtained per-locus number of alleles, ranging from 5 to 14 with an average value of 9.5, perlocus observed heterozygosity, ranging from 0.07 to 0.99, and per-locus polymorphic information content (PIC), ranging from 0.34 to 0.82, indicating that some loci are highly variable. Phylogenetic analysis with the eight concatenated microsatellite loci showed no clustering on the basis of known strain characteristics. A total of 22 strain-specific apomorphic alleles, which discriminate 19 among 85 silkworm strains were obtained from eight loci. These strain-specific alleles, thus, can casually be utilized for the discrimination of applicable strains without any further typing of other loci. Furthermore, a substantial number of homozygote strains, represented by 27 among 76 alleles in eight loci were found. These results collectively suggest that the silkworm microsatellite DNA is actually and potentially important molecular markers for the eventual discrimination of silkworm strains that are preserved as hundreds in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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