Eucalyptus is one of the major plantation species with wide variety of industrial uses. Polymorphic and informative simple sequence repeats (SSRs) have broad range of applications in genetic analysis. In this study, two individuals of Eucalyptus tereticornis (ET217 and ET86), one individual each from E. camaldulensis (EC17) and E. grandis (EG9) were subjected to whole genome resequencing. Low coverage (10×) genome sequencing was used to find polymorphic SSRs between the individuals. Average number of SSR loci identified was 95,513 and the density of SSRs per Mb was from 157.39 in EG9 to 155.08 in EC17. Among all the SSRs detected, the most abundant repeat motifs were di-nucleotide (59.6%-62.5%), followed by tri- (23.7%-27.2%), tetra- (5.2%-5.6%), penta- (5.0%-5.3%), and hexa-nucleotide (2.7%-2.9%). The predominant SSR motif units were AG/CT and AAG/TTC. Computational genome analysis predicted the SSR length variations between the individuals and identified the gene functions of SSR containing sequences. Selected subset of polymorphic markers was validated in a full-sib family of eucalypts. Additionally, genome-wide characterization of single nucleotide polymorphisms, InDels and transcriptional regulators were carried out. These variations will find their utility in genome-wide association studies as well as understanding of molecular mechanisms involved in key economic traits. The genomic resources generated in this study would provide an impetus to integrate genomics in marker-trait associations and breeding of tropical eucalypts.
Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers were used to survey genetic variability among 34 Botrytis cinerea isolates from nine different host plants in Korea. For RAPD analysis, 115 arbitrary decamer primers were initially screened for polymorphic major DNA bands with 11 representative B. cinerea isolates. Eleven primers that initially detected polymorphisms were tested a second time with additional 23 isolates of B. cinerea as well as one isolate of Botrytis squamosa as an outgroup. The RAPD analyses revealed that all isolates except one showed different molecular phenotypes. Dendrograms obtained from dissimilarity matrices using the unweighted paired group method of arithmetic means (UPGMA) showed the 36.4% to 90.0% similarity among all B. cinerea isolates. The B. squamosa isolate showed the least similarity to all B. cinerea isolates. The cluster analyses indicated no correlation among all the characteristics examined including molecular phenotypes, host and geographic origins, year of isolation, or pathogenicity. The RAPD data suggest that a high level of genetic variation exists among Korean populations of B. cinerea and it seems to be caused by heterokaryosis among preexisting molecular phenotypes.
An enrichment library of GATA-repeats from genomic DNA was constructed in this study to isolate and characterize microsatellite loci in Tsaiya duck (Anas platyrhynchos). Thirty-three microsatellite markers were developed and used to detect polymorphisms in 30 Tsaiya ducks. A total of 177 alleles were observed and all loci except APT022 were polymorphic. The number of alleles ranged from 2 to 9 with an average of 5.5 per microsatellite locus. The observed and expected heterozygosity of these polymorphic markers ranged from 0.07 to 0.93 with an average number of 0.60 and 0.10 to 0.86 with an average number of 0.61, respectively. Among the polymorphic markers, the observed heterozygosities of 23 loci were higher than 0.50 (69.70%). The polymorphism information content (PIC) in the 32 loci ranged from 0.09 to 0.83 with an average of 0.57. Seven of the 33 duck microsatellite loci had orthologs in the chicken genome, but only APT004 had a similar core repeat to chickens. These microsatellite markers will be useful in constructing a genetic linkage map for the duck and a comparative mapping with the chicken can also provide a valuable tool for studies related to biodiversity and population genetics in this duck species.
This study was carried out to construct mapping population and to evaluate the methods involved, including polymorphic DNA marker system and appropriate statistical analysis. As an initial step to establish chicken genome mapping project, White Leghorn (WL) and Korean Ogol chicken (KOC) were used for generating backcross population. From 8 initial parents, total 280 backcross progenies were obtained and 40 were used for genotyping and linkage analysis. For development of novel polymorphic markers for KOC, Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers specific for this chicken line were generated. Also included in this study were six microsatellite markers from East Lansing map as reference loci. For segregation analysis, 15 RAPD markers and 6 microsatellites were used to genotype the backcross population. Among the RAPD markers that we developed, 2 pairs of markers were identified to be linked and another 4 RAPD markers showed linkage with microsatellites of known map. In summary, this study showed that our backcross population generated from the mating of KOC to WL serves as a valuable genetic resource for genotyping. Furthermore, RAPD markers are proved to be valuable in linkage mapping analysis.
Su, Y.;Liu, C.W.;Liu, L.;Ye, C.H.;Cao, W.Q.;Huang, Y.Q.;Zheng, J.;Cai, D.Y.;Olowofeso, O.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.19
no.4
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pp.475-481
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2006
The genetic polymorphism and relationships of Muscovy, Cherry Valley Meat ducks, Partridge ducks and their crossbreds $F_1$ and $F_2$, respectively, were studied using a random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. The results showed that RAPD markers were effective for the analysis of genetic relationships among ducks. Amplification with 20-primers gave 760 reproducible amplified fragments. The percentage of polymorphic marker band was 74.70%, which indicates that the RAPD technique had higher efficiency of polymorphism detection and sensitivity in studying the genetic variations among ducks and showed that the genetic polymorphism was abundant between two species of duck populations. The average index of genetic distance in hybrid $F_2$ was 0.2341 and higher than that of its parents, which indicates that the genetic diversity was improved by crossbreeding with Muscovy.
Six breeds of riverine buffalo viz. Murrah, Mehsana, Jaffrabadi, Nagpuri, Nili-Ravi and Bhadawari were characterized using FAO-recommended cattle specific microsatellite markers. Among the total of twenty microsatellite markers screened to explore genomic variability of six buffalo breeds, only ten were polymorphic in nature. Four out of ten polymorphic microsatellite loci were rated as informative. The numbers of alleles detected ranged from 2 to 7, with a mean of $5.5{\pm}0.07$ per microsatellite marker. The most polymorphic marker was BM1818 with a total of 7 alleles present at this locus. One breed specific marker was found in each of Mehsana (BM1818) and Bhadawari (ILSTS030) and four were found in Jaffarabadi (BM1818, ILSTS030, ILSTS054 and ILSTS011). Genetic distance (Ds) between the Mehsana and Bhadawari breed was the maximum (0.29), followed by Murrah and Mehsana (0.27), and Nili-Ravi and Bhadawari (0.26). The lowest Ds was found between the Jaffrabadi and Nagpuri breeds which was only 0.05. The highest divergence time of 1318 years was established between Mehsana and Bhadawari breeds whereas it was found to be lowest (272 years) between the Jaffrabadi and Nagpuri breeds.
Cornus controversa is a long-lived woody species mostly distributed in East Asia. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers were used to investigate the genetic diversity and population structure of Korean populations of this species. A high level of genetic variation was found in seven populations of C. controversa. The mean genetic diversity (H) was 0.222 across populations, varying from 0.200 to 0.238. Eighty of the 93 loci (86.0%) showed detectable polymorphism in at least one population. Total genetic diversity values ($H_T$) varied between 0.192 and 0.231, giving an average overall polymorphic loci of 0.212. The interlocus variation of genetic diversity within populations ($H_S$) was high (0.167). Mean of genetic diversity in C. controversa was higher than average values for species with similar life history traits. The sexual reproduction, perennial habitat, and longevity are proposed as possible factors contributing to high genetic diversity. On a per locus basis, the proportion of total genetic variation due to differences among populations ($G_{ST}$) ranged from 0.169 to 0.278 with a mean of 0.216, indicating that about 21.6% of the total genetic variation was among populations. An indirect estimate of the number of migrants per generation (Nm=1.893) indicated that gene flow was extensive among Korean populations of C. controversa.
To develope a microbial pesticide for the control of mulberry longicorn beetle, Apriona germari, Beauveria spp. were isolated from the infected Apriona germari larvae. The morphology of Beauveria spp. was observed by phase contrast and scanning electron microscope. In addition, the Beauveria spp. isolated from Apriona germari were identified by the random amplification of polymorphic DNA using polymerase chain reaction. The results showed that the Beauveria spp., SFB-1A and SFB-3A, isolated from Apriona germari were identified with B. bassiana and B. brongniartii, respectively, suggesting that the random amplification of polymorphic DNA is effective for the identification of Beauveria spp.
Six parent and their 12 gamma ray-induced somatic flower colour mutants of garden rose were characterized to discriminate the mutants from their respective parents and understanding the genetic diversity using Random amplification of polymorphic DNA (RAPD) markers. Out of 20 primers screened, 14 primers yielded completely identical fragments patterns. The other 7 primers gave highly polymorphic banding patterns among the radiomutants. All the cultivars were identified by using only 7 primers. Moreover, individual mutants were also distinguished by unique RAPD marker bands. Based on the presence or absence of the 48 polymorphic bands, the genetic variations within and among the 18 cultivars were measured. Genetic distance between all 18 cultivars varied from 0.40 to 0.91, as revealed by Jaccard's coefficient matrix. A dendrogram was constructed based on the similarity matrix using the Neighbor Joining Tree method showed three main clusters. The present RAPD analysis can be used not only for estimating genetic diversity present in gamma ray-induced mutants but also for correct identification of mutant/new varieties for their legal protection under plant variety rights.
In the present study, we evaluated the informativeness of SNPs genotyped by the Illumina Bovine SNP50K assay in different cattle breeds. To investigate these on a genome-wide scale, we considered 52,678 SNPs spanning the whole autosomal and X chromosomes in cattle. Our study samples consists of six different cattle breeds. Across the breeds approximately 72 and 6% SNPs were found polymorphic and fixed or close to fix in all the breeds, respectively. The variations in the average minor allele frequency (MAF) were significantly different between the breeds studied. The level of average MAF observed in Hanwoo was significantly lower than the other breeds. Hanwoo breed also displayed the lowest number of polymorphic SNPs across all the chromosomes. More importantly, this study indicated that the Bovine SNP50K assay will have reduced power for genome-wide association studies in Hanwoo as compared to other cattle breeds. Overall, the Bovine SNP50K assay described in this study offer a useful genotyping platform for mapping quantitative trait loci (QTLs) in the cattle breeds. The assay data represent a vast and generally untapped resource to assist the investigation of the complex production traits and the development of marker-assisted selection programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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