We isolated a promoter inducible by paraquat, a superoxide-generating agent, from Escherichia coli using a promoter-probing plasmid pRS415. From sequence analysis we found out the promoter is for fpr ENCODING nadph : ferredoxin oxidoreductase. We constructed on operon fusion of lacZ gene with fpr promoter to monitor the expression of the gene in the single-copy state. LacZ expression generators, menadione and plumbagin, also induced the expression of .betha.-galactosidase in the fusion strain. On the other hand, no significant induction was observed by treatment with hydrogen peroxide, ethanol, and heat shock. Induction of .betha.-galactosidase was significantly reduced by introducing a .DELTA. sox 8 :: cat of soxS3 :: Tn10 mutation into the fusion strain, indicating that fpr gene is a member of the soxRS regulon. The transcriptional start site was determined by primer extension analysis. Possible roles of fpr induction in superoxide stress were discussed.
Cancer is one of the major dreaded diseases causing high mortality. Lung cancer is second in position of all cancer related deaths and mainly divided into two morphologic sub-types: small-cell lung cancer and non-small cell lung cancer (NSCLC). NSCLC is an aggressive neoplasm which hardly responds to any conventional chemotherapy. Epidermal growth factor receptor (EGFR) belongs to the ErbB family of receptor tyrosine kinase that is mainly over-expressed in NSCLC. EGFR is mainly involved in the pathogenesis and progression of different carcinoma. In vivo and in vitro studies suggest that EGFR and EGF like peptides are often over-expressed in human NSCLC and these proteins are able to induce cell transformation. The conventional therapies mostly inhibit the EGFR activity and expression level in human NSCLC with the use of some EGFR-inhibitors like HKI-272, EKB569, CL-387785 etc. and some synthetic chemotherapeutic drugs like erlotinib, gefitinib, plumbagin, docetaxel, cisplatin etc., alone or in combination of two or more drugs. These therapies selectively act by competitive inhibition of the binding of adenosine triphosphate to the tyrosine kinase domain of the EGFR, resulting in inhibition of the EGFR signaling pathway. But these chemotherapeutic drugs have some cytotoxic activities to the normal cells and have some adverse side-effects. Recent studies on some traditional alternative therapies including some herbal and plant extracts, active ingredients like curcumin, different homeopathic drugs, etc. can target EGFR-signalling in NSCLC with less toxic side-effects are being currently developed.
S. coelicolor A3(2) cells were treated with various redox-cycling agents on nutrient agar plates and examined for their effect on the growth and differentiation. When treated with plumbagin, severe effect on cell viability was observed at concentrations above 250 $\mu$M. However, the surviving colonies differentiated normally. When treated with 100 $\mu$M paraquat, growth rate was decreased and morphological differentiation was inhibited, while the survival rate was maintained at about 100% even at 5 mM paraquat. Menadione or lawsone did not cause any visible changes at concentrations up to 1 mM. The effect of paraquat was also observed when it was added to nutrient agar plate before spore inoculation. Paraquat had also observed when it was added to nutrient agar plate before spore inoculation. Paraquat had no effect on colonies growing on R2YE agar plates. Among the components of R2YE medium selectively added to nutrient agar medium, CaCl$_2$ was found to have some protective function from the inhibitory effect of paraquat. As a first step to study the mechanism of the inhibitory effect of paraquat on differentiation, resistant mutants which sporulate well in the presence of paraquat were screened following UV mutagenesis. Three paraquat-resistant mutants were isolated with a frequency of 3 $\times$10${-5}$. Their mutation sites were determined by genetic crossings. All three mutations were mapped to a single locus near arg4 at about 1 o'clock on the genetic map of S. coelicolor A3(2).
유전자 lacZYA가 aces 유전자의 프로모터 하단에 연계된 $(P_{aceB}-lacZYA)$ 리포터 플라스미드를 함유하는 Escherichia coli를 이용하여 glyoxylate bypass를 매개하는 유전자중하나인 aceB의 발현을 조절하는 것으로 여겨지는 Corynebacterium glutamicum클론들을 색판독에 의해 분리하였다. 이 중 한 개의 클론을 선택하여 분석할 결과 이 클론을 함유한 E. coli는 리포터 플라스미드에서 발현되는 $\beta-galactosidase$의 활성 이 약 $40\%$ 감소하였고 이는 클론에서 발현되는 단백질이 aceB프로로터에 작용함에 기인한 것으로 판단되었다. 서열분석결과 ORF1과 ORF2의 두 개의 인접한 ORF가 발견되었고 이중 ORF2가 reporter plasmid의 $\beta-galactosidase$의 활성 감소에 직접적으로 기여함을 알 수 있었다. ORF1은 206아미노산으로 구성된 23,218 Dalton의 단백질을 발현하는 것으로 여겨졌고, 유사성 분석결과 ECF-type에 해당되는 RNA polymerase의 sigma factor를 암호화하는 것으로 보여 sigH로 명명하였다. 유전자 sigH의 기능을 밝히기 위해 gene disruption technique을 이용하여 sigH 유전자가 기능을 하지 못하는 돌연변이 균을 제작하였으며 이 균주는 야생형에 비해 성장속도가 저하됨을 관찰하였다. 또한 변이균은 oxidative stress를유발하는 pumbagin둥에 대해서도 민감성을 나타내었다. 이들 결과는, 유사성 분석결과에서도 볼 수 있듯이 sigH유전자가 세포성장과정 중 처하게 되는 각종 stress중 특히 oxidative stress에 대한 대응과 관련되어 발현될 수 있음을 암시한다.상관관계는 공간적인 범위가 10$\times$10km 이하인 경우에 높게 나타났다. 하지만 공간범위가 그 이상이 될 경우에는 그 내부에서 나타나는 다양성으로 인해 통계적인 상관성이 현격하게 낮아지는 것을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 지역 및 국가 단위의 환경변화모델에서 모델의 공간적인 구성범위가 일정한 수준을 넘으면, 그 내부에서 발생하고 있는 다양성이 급격하게 증가하여 지표피복변화의 원인과 결과를 정확하게 파악하기 힘들게 된다는 것을 의미한다. 10$\times$10km의 공간적인 범위는 농업생산이 위주가 되는 사바나 지역에서는 주로 개별 마을이 차지하고 있는 공간적인 범위와 대체적으로 일치한다. 따라서 사바나 지역에서 나타나는 지표피복변화의 다양성을 고려하면서 보다 정확하게 모형화하기 위해서는 마을단위에서 나타나는 지표피복변화과정이 최소의 모델단위가 되어야 함을 시사한다. 아니라 다른 방법으로 영향을 미치고 있다는 것을 알 수 있었다., 계절별로는 여름철에 강수가 집중됨으로서 습성강하물 침착량이 총량적으로 증가하였으며, 그 값은 $SO_4^{2-}\;2.118g/m^2/season,\;NO_3^-\;1.509g/m^2/season,\;Cl^-\;2.185g/m^2/season,\;NH_4\;^+\;1.096g/m^2/season$로. 나타났다. 계절별 잎의 평균 pH의 변화는 봄 pH $5.9\pm0.5$, 여름 pH $5.5\pm0.4$, 가을 pH $5.1\pm0.3$을 나타내었고, 엽중 수용성 황함량의 계절별 평균값은 봄 $0.012\pm0.004\%$, 여름 $0.012\pm0.002\%$, 가을 $0.020\pm0.007\%$ 수준을 보이고 있다. 수피 내 함유되어
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[게시일 2004년 10월 1일]
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