5-HT$_{2C}$ receptors have been considered as therapeutic targets for the treatment of various central nervous system disorders such as depression, anxiety, epilepsy, schizophrenia and sleep disorders. We chemically synthesized KKHQ80114 (K14) and KKHQ80109 (K09), selective 5-HT$_{2C}$ agonists, with the purpose of developing therapeutic agents for the treatment of obesity. The objective of this work is to investigate analytical methods of these compounds in the plasma and urine of rats by gas chromatography/mass spectrometry. In this experiment, K14 was determined in plasma and urine by using K09 as internal standard. Calibration curves give a good linearity in plasma (r$^2$=0.9993) and urine (r$^2$=0.9988). Among hexane, ethyl acetate and diethyl ether, the highest peak was observed in diethyl ether. However, ethyl acetate was used since more interfering peaks were observed with diethyl ether. Inter-day precision and accuracy were determined in the ranges of 50-500 ng/mL for plasma and 10-500 ng/ml for urine. Quantitation limits were 50 ng/mL plasma and 25 ng/ mL urine. These data may be applicable for further studies of these compounds including absorption and metabolism due to no pharmacokinetic or analytical data available.
뇌내 여러 신경전달물질계가 시상하부-뇌하수체-부신계(HPA)를 복잡하게 조절하고 있다는 증거가 많이 나오고 있다. 그 중에서도 5-HT(Serotonin)계의 stress시의 역할에 대해서는 많은 연구가 있어왔으나 아직 논란이 많이 제기되고 있다. 따라서 저자는 5-HT가 stress시 HPA axis를 조절하는데 필수적인 역할을 하는가를 말아보기 위해서 1) Stress전후에 5-HT의 steady state농도와 5-HT의 교체율(turnover rate) 및 합성율(synthesis rate)을 측정해 보았으며 2) 비교적 5-HT계에 특이하게 작용하는 여러 약물들을 주사한 후에 stress 반응을 측정해 보았다. 1) 1분간 ether stress 가한 직후에 시상하부와 다른 뇌부위에서의 5-HT와 5-HIAA농도는 즉각적으로 의미있게 상승하였으나 혈장 corticosterone농도는 즉각상승을 보이지 않다가 2분후에 상승을 보였다. 2) Stress(30분 immobilization & 1분 ether stress)가한 백서에서는 시상하부와 다른 뇌부위에서 5-HT합성을 혹은 교체율이 2배-4배까지 상승하였다. 3) 5-HT합성 전구물질(L-tryptophan)과 수용체 자극제 (5-MeODMT)를 투여하였을 때는 투여용량에 비례해서 혈장 corticosterone함량이 상승하였다. 4) L-tryptophan과 MAO억제제 (pargyline) 혹은 L-tryptophan과 5-MeODMT의 병합 투여로 stress시 혈장 corticosterone의 상승이 더 높게 나타났다. 5) 5-HT 합성억제제(PCPA), 5-HT 신경독약(5,7-DHT)을 투여하고 stress를 가하였을 때는 시상하부와 다른 뇌 부위에서 5-HT의 하강이 별로 나타나지 않았으며, 동시에 혈장 corticosterone의 하강도 의미있게 나타나지 않았다. 그러나 midline raphe핵을 파괴하였을 때는 5-HT와 corticosterone의 하강이 나타났다. 6) 비교적 특이하게 serotonin제에 작용하는 여러 약물들을 투여한 후에 나타나는 5-T와 혈장 corticosterone함량 사이에는 상당히 높은 양의 상관관계계가 있었다(r>0.81). 이상의 결과를 종합해 볼때 serotonin(5-HT)은 시상하부-뇌하수체-부신계의 스트레스반응조절에 중요한 자극적 역할을 하리라고 생각된다.
The effect of $\alpha-Tocopherol\;(\alpha-Toc)$ level in diet on the biochemical property of sweet smelt, Plecoglossus altivelis, was investigated. The cultured sweet smelt fish were fed two different diets for 8 weeks; a control diet was added $0.01\%$ of $\alpha-Toc$ (CO group) and an experimental diet was added $1.00\%$ of $\alpha-Toc$ (HT group). Both diets were rich in docosahexaenoic acid (DHA, 22:6n-3) and eicosapentaenoic acid (EPA, 20:5n-3), accounting for $12.3-13.2\%$ and $12.1-12.4\%$, respectively. Growth rate (GR) and feed efficiency (FE) were almost no difference between both groups, but female fish of both groups were superior to male fish in GR and FE. Lipid contents of muscle and ovary were high in CO group compared with HT group, but that of testis showed a similar level in both groups. The proportion of polyunsaturated fatty acids (PUFA) in muscle showed almost no difference in sex and between both groups. In testes, the proportion of PUFA was 1.35 times for HT group to 1.54 times for CO group as much as in ovaries, in which was high approximately 1.5 times compared with muscle. Thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) and hydroxyl (OH) radical levels of plasma were higher in CO group than HT group and superoxide dismutase activity was also slightly high in the former. The intensity of watermelon-like or cucumber -like aroma was related positively with TBARS and OH radical levels in plasma. The level of triglyceride (TG) and total cholesterol (CHOL) in plasma of CO group was higher than those of HT group. Survival rate was high in CO group with higher level of TG and CHOL in plasma.
1985년 7월부터 1987년 6월까지 2년 동안 영남대학교 의과대학 부속병원 소아과에 입원한 환자중 신기능에 영향을 미치는 인자가 없는 1세부터 15세까지의 남녀환아 81명을 대상으로 키와 혈장 creatinine 농도를 이용한 공식 $GFR=k{\cdot}Ht/Pcr$ (k=상수)을 이용하여 실제 측정된 creatinine clearance와 Ht/Pcr에서 구해진 $k_M$ (measured k)의 적합성을 연령별로 1~5세(I군), 6~10세(II군), 11~15세(III순) 그리고 전 연령군으로 나누어 검정하였다. 1) 실제 측정된 creatinine clearance ($m{\ell}/min/1.73m^2$)는 I군에서 $109.73{\pm}9.97$, II군에서 $108.26{\pm}9.02$, III군에서 $96.20{\pm}4.72$ 그리고 전 연령군에서는 $105.48{\pm}5.23$이었다. 2) Ht/Pcr과 실제 측정된 creatinine clearance를 이용한 공식에서 얻어진 $k_M$값은 I군에서 $0.49{\pm}0.03$, II군에서 $0.48{\pm}0.02$, III군에서 $0.43{\pm}0.02$ 그리고 전 연령군에서는 $0.47{\pm}0.02$이었다. 3) Ht/Pcr(x)과 실제 측정된 creatinine clearance(y)를 이용하여 각 군별 및 전 연령군의 회귀방정식과 이들간의 얻어진 상관계수(r)는 I군에서 y=0.82x-65.63(r=0.99), II군에서 y=0.61x-23.46(r=0.72), III군에서 y=0.18x+54.44(r=0.54) 그리고 전 연령군에서는 y=0.58x-22.13(r=0.81)로 모두에게 상관관계가 높게 나왔다. 4) 이 회귀방정식을 이용하여 추정된 creatinine clearance($Ccr_E$) 값을 정리한 후, 추정된 creatinine clearance와 Ht/Pcr에서 구한 $k_E$(estimated k)값은 I군에서 $0.48{\pm}0.01$, II군에서 $0.49{\pm}0.01$, III군에서 $0.43{\pm}0.01$ 그리고 전 연령군에서는 0.47이었다. 5) 간군별 $k_M$과 $k_E$의 적합도는 I, II군에서 95~97.5%, III군에서 90~95% 그리고 전 연령군에서는 97.5%~99%로 모두에서 높게 나왔다. 이상의 연구결과를 종합해 보면 Ht/Pcr과 본 연구에서 계산된 $k_M$값을 이용한 공식을 사용하여 신속하고 간편하게 사구체여과율(GFR)을 산출하여 사구체기능을 평가할 수 있다.
In Paralichthys olivaceus and Nibea japonica, response to live air (5hr) or ship (25hr) transportation was assessed, by determining the levels of plasma cortisol, glucose, lactic acid and osmolality, as well as hematological parameters namely hematocrit (Ht), red blood cell (RBC) count, hemoglobin (Hb), corpuscular volume (MCV), corpuscular hemoglobin (MCH) and corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). In the experimental series I, the olive flounder was subjected to stress or no stress for 1hr, prior to its air transportation for 5hr. The stress suffered by the flounder prior to air transportation resulted in significant reduction in Ht, but increases in MCH and MCHC. Air transportation led to increases in MCV and MCH in both the stressed and non stressed groups. In the non stressed group it led to significant increase in Ht but decrease in MCHC. In the stressed group, the air transportation led to significant increases in osmolality and plasma cortisol from 5 to 38.5ng/$m\ell$. Non stressed groups did not show significant differences in this before and after transportation. In the experiment II, the red blood cell (RBC) count ranged from 2.5$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ to 2.7$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ in the flounder and 1.9$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ to 2.1$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ in the croaker during the pre- and post-transportation, respectively. In the croaker the shipping led to significant increase in plasma cortisol from 26 to 35ng/$m\ell$ but decrease in glucose from 91.0 to 26.4mg/㎗. For glucose the reverse (39.0 to 51.0mg/㎗) was true for the flounder.
신장기능조절에 있어서 중추 tryptamine계가 관련되어 있으며, $5-HT_1$수용체는 이뇨적인 역할을 하고 있는 반면에 $5-HT_2$ 및 $5-HT_3$수용체는 항이뇨적인 영향을 미치고 있음이 밝혀진 바 있다. 또한 $5-HT_1$수용체도 단일하지 않고 여러 subtype가 존재함이 알려져 있다. $5-HT_{1A}$수용체의 역할에 관해서는 신기능에 이뇨적인 영향을 미치고 있음이 시사된 바 있다. 본 연구에서는 중추 tryptamine성 신기능 조절에 있어서 $5-HT_{1B}$수용체의 역할을 구명하고자 하였다. 선택적 $5-HT_{1B}$ agonist인 TFMPP $8{\sim}750\;{\mu}g/kg$을 가토 측뇌실내로 투여하면 투여량에 비례하여 이뇨 및 Na과 K 배설의 증가를 초래하였으며, $250\;{\mu}g/kg$ 투여시에는 Na의 배설 분획이 5.44%까지 증가하였다. Na배설 촉진작용은 신혈류역학의 증가 보다도 훨씬 지속하여, 세뇨관에서의 Na재흡수 감소작용이 체액성 기전임을 시사하였다. TFMPP $250\;{\mu}g/kg$ icv투여시에 natriuresis와 함께 혈장내 atrial natriuretic peptide 농도가 약 6배 증가되었다. TFMPP $250\;{\mu}g/kg$을 정맥내로 투여하였을때는 뇌실내 투여시와는 상이하게 신기능에 별다른 유의한 변동을 초래하지 않았다. 이와같은 TFMPP의 diuresis 및 natriuresis는 각각 $5-HT_2$ 및 $5-HT_3$ 수용체의 선택적 antagonist인 ketanserin과 MDL 72222의 전처치에 의하여 차단되지 않았으며, methysergide에 의해서도 억제되지 않았다. 또한 $5-HT_{1A}$ antagonist로 알려진 NAN-190도 TFMPP의 작용을 차단하지 못하였으며 S(-)-propranolol도 영향을 미치지 않았다. 본 연구의 결과 중추 $5-HT_{1B}$수용체는 신장기능에 이뇨 및 Na배설 촉진적인 영향을 미치고 있고 이작용에 atrial natriuretic peptide가 관여함을 알 수 있었다.
1) 성기능장애 빈도는 정신분열병 환자군이 80%로 대조군 42%에 비해 유의하게 높았다(p<0.001). 성반응 주기에 따른 장애유형은 성적욕망장애 76%, 발기장애 75%, 발기유지장애 75%, 성적극치감의 질적감소 61%, 지루 50%, 사정시 정액량의 감소 44% 순서로 많았다. 성적극치감 횟수의 감소는 32%로 다른 장애유형에 비해 적었으며, 조루를 호소하는 경우도 15%나 되었다. 2) PRL 및 5-HT 측정치는 환자군에서 $28.5{\pm}20.6ng/ml$, $298.5{\pm}89.1ng/ml$으로서 대조군 $10{\pm}5.6ng/ml$, $169.2{\pm}37.8ng/ml$보다 유의하게 높았다(p<0.001). TST 측정치는 환자군이 $4.3{\pm}1.5ng/ml$, 대조군이 $4.5{\pm}1.2ng/ml$로 양군 모두 유의한 차이가 없었다. 3) 성기능장애를 증가시키는 변인은 결혼(미혼), 초발연령, 이병기간, 입원기간, 총약물투여기간 그리고 5-HT 측정치이었다. 특히 5-HT 비정상치군이 정상치군보다 성기능장애가 유의하게 높았다. 그러나 연령, 교육연한, 종교, 경제상태, PRL 및 TST 측정치, 항정신병약물용량, 약물역가, benztropine, ACSE, CGI, BPRS, PANSS, PANSS-CF, MMSE-K 점수와 성기능장애와는 무관하였다. 성기능장애는 정신분열병군에서 높았고, 성기능장애 유형별로는 성적욕망장애와 발기장애가 많았다. 미혼이거나, 초발연령이 높을수록, 질병에 이환된 기간이 길수록, 5-HT 농도가 높을수록 성기능장애가 증가하였다. 비록 혈중 5-HT 농도가 뇌 5-HT 활성을 어느정도 반영하는지는 알 수 없으나, 정신분열병 환자의 일차 병인인 과도한 5-HT 활성으로 인한 직접적인 성기능 억제효과 때문에 장애가 초래한다고 생각된다.
Serotonin (5-hydroxytryptamine (5-HT))는 신경계의 세포-세포 간의 신호전달의 주요한 신경전달물질이다. 세포막에 존재하는 serotonin transporter (SERT)는 연접간격에 존재하는 5-HT를 세포 내로 재흡수 하여 세포외부의 5-HT 농도를 조절하지만 그 기전은 아직 밝혀지지 않았다. 본 연구에서는 yeast two-hybrid system을 사용하여 SERT의 C-말단이 protein kinase C-$\varepsilon$ (PKC-$\varepsilon$)과 특이적으로 결합함을 알았다. PKC-$\varepsilon$는 PKC의 isotype으로 calcium 비의존적이며 phorbol ester/diacylglycerol 민감성 serine/threonine kinase이다. $Na^+/Cl^-$ 의존성 SLC6 gene family의 다른 수송체는 PKC-$\varepsilon$과 결합하지 않았다. Deletion mutant들을 사용하여 SERT는 PKC-$\varepsilon$의 C-말단부위와 결합함을 알았으며, 또한 이 단백질간의 결합을 GST pull-down assay로 확인하였다. PKC-$\varepsilon$는 in vitro에서 SERT의 N-말단의 펩티드를 인산화시켰다. 이러한 결과들은 PKC-$\varepsilon$에 의한 SERT의 인산화가 세포막에 존재하는 SERT의 활성을 조절하는 역할을 할 가능성을 시사한다.
The black seabream Acanthopagrus schlegelii is an important species for aquaculture in Korea. There are, however, no reports on the physiological responses to hypoxia in this species. The objective of this study was to evaluate the effects of acute hypoxia on the physiological stress responses (plasma cortisol as the primary response, and plasma glucose, hematocrit (Ht), hemoglobin (Hb), sodium, chloride, osmolality, AST, ALT and total protein as the secondary responses) of the fish. The experimental fish were exposed to 0.5 ppm dissolved oxygen (DO) in the seawater via two methods (progressive stepwise decline (Exp. I), and direct decline (Exp. II)). A highly significant increase was detected in plasma cortisol levels due to the hypoxia treatments, and fish in Exp. I had hormone levels that were significantly higher than the fish in Exp. II. For plasma glucose, there was no significant difference between the Exp. I fish and the control fish, whereas Exp. II fish showed significantly higher plasma glucose levels than Exp. I fish and control fish. Ht values increased in both hypoxia treatments; however, Hb concentrations increased only in Exp. I. Although plasma chloride levels were unaffected by acute hypoxia, plasma sodium and osmolality levels increased in Exp. I. Progressive hypoxia (Exp. I fish) increased plasma AST, ALT and total protein. These results suggest that the value and direction of changes to the investigated parameters can be used to determine the resistance of black seabream to acute hypoxia.
$5HT_{2C}$ receptor among fourteen 5-HT subtypes plays important roles in several disorders such as depression, anxiety, epilepsy, schizophrenia and sleep disorders. The purpose of the study is to investigate pharmacokinetic parameters and bioavailability of a newly synthesized selective agonist of $5-HT_{2C}$ receptor, KOPC-20010 (KP10) in rats after intravenous and oral administration for the development of therapeutic anti-obesity agents. KP10 was administered orally (40 mg/kg) or intravenously (20 mg/kg), blood was collected via a catheter, and analyzed by GC/MSD. The calibration curve of KP10 in plasma and urine showed high linearity ($r^2$ >0.999). The retention times of KP10 in plasma and urine were 8.7 and 9.7 min, respectively. After oral administration of 40 mg/kg, pharmacokinetic parameters were calculated as follows; $C_{max}$ value was $1242.9{\pm}1195.5$ ng/mL at $1.1{\pm}0.6$ hr ($T_{max}$). $AUC_{0->24hr}$ and $AUC_{0>{\infty}}$ were $8034.2{\pm}960.7$ and $10464.1{\pm}681.5\;ng{\cdot}hr/mL$, respectively. The terminal half-life was $21.9{\pm}7.6$ hr. $AUC_{0->24hr}$ and $AUC_{0>{\infty}}$ were $4292.4{\pm}523.0$ and $6111.2{\pm}756.2\;ng{\cdot}hr/mL$, respectively, after 20 mg/kg of intravenous administration. The terminal half-life after intravenous administration was $25.1{\pm}9.4$ hr. Bioavailability of KP10 was determined to 86%. The excretion amount into the urine within 48 hr was approximately 4.7 to 6.7% of the dose administered. These data may be beneficial to the anti-obesity drug development of KP10.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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