When the light stimulus was presented continuously, habituations were formed, after 13 and 14 hrs in amoeba and planaria, repectively. As amoeba more habituated, the light-escaping velocity of streaming was decreased with a negative-exponential function. in two-dimensional electrophoretic patterns of proteins of amoeba habituated, a newly synthesized protein (pI 7.0, MW 20 kD) was detected. Therefore, it is conjectured that similarity or commonality may exist between amoeba and planaria habituations to light, and in these behavioral modifications, specific protein(s) may be involved in molecular level.
The epidermal tissue of Korean planaria Phagocata vivida(Ijima et Kaburaki) is composed of the simple columnar epithelium. The ventral epidermis of this animals is thinner than the dorsal epidermis and has a furrow in the median line in which dark cell is observed. The clear cells which are electron-lucent are located either side of the dark cells. Those are compactly covered with long cilia. The free surface of the latero-ventral epidermis is tightly contacted with the earth and this epidermal free surface has a great number of short cilia, and a lot of C-type of basophilic granule cell are migrated into the cytoplasm of epithelium from mesenchyme passing through the basement membrane and then this granules are put out of latero-ventral free surface. Dorsal epidermis is thickest among the whole epidermis of these animals and the rhabdite granules are more distributed in dorsal epidermis than in ventral epidermis. According to the cytochemical and ultrastructural research, composed epidermis of this planaria are divided into nine type cells, that is, ciliated columnar epithelium, dark cell, mucous cell, rhabdite-forming cell, sunk round cell, A type, B type, C type and D type of basophilic granule cell.
Planaria were recently reported to be a simple and sensitive model to investigate the mechanistic aspect of seizure and to screen potential anticonvulsants. Using planarian model, we analyzed the pharmacological effect of ukgansan (UGS), an oriental herbal medicine containing seven medicinal herbs, on the planarian locomotor velocity (pLMV) and glutamate-induced seizure-like activity (pSLA). To test whether D. japonica is suitable for studying anti-seizure agents, we investigated the effect of glutamate on pLMV and pSLA in D. japonica. In the present study we first confirmed that pSLA in D. japonica was induced by L-glutamate. Glutamate significantly produced pSLA in a dose dependent manner, but did not affect pLMV. These glutamate-induced paroxysms were decreased by antiepileptic drug, topiramate. A similar inhibitory effect on glutamate-induced pSLA was observed after the treatment of UGS. The present results suggest that UGS and its active constituents possess useful substance inhibiting seizure in planarian and that D. japonica provides a convenient model to search active herbs containing anti-seizure activity.
실험에 사용한 플라나리아는 Dugesia japonicia Ichikawa et Kawakatsu로서 核型分析에 의하여 種을 확인하였다. 이 種의 表皮上皮을 구성하는 세포들의 세포화학적 및 미세구조적 특징을 밝히고자 본 실험을 行하였다. 세포화학적 방법으로는 hematoxylin-eosin, periodic acid-schiff(PAS)反應, alcian blue(pH 2.5), PAS-alcian blue反應 그리고 methylene blue-basic fuchsin 등으로 염색을 시행하였고, 체표면을 走査電子顯微鏡으로, 또한 各部位의 微細構造를 透過電子顯微鏡으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 플라나리아의 表皮는 單層圓桂形上皮로 되어 있었고, 상피를 구성하는 세포들은 형태학적 및 세포화학적 특성에 의하여 6類型의 세포들도 區分되었다. 1) 纖毛上皮細胞 (Ciliated epithelial cell) : microtubule 배열이 9+2型인 섬모를 가지고 있었다. 2) 好酸性細胞(Eosinophilic cell) : 세포질에 소수의 큰 好酸性 顆粒을 가진 세포로서, 전자 현미경하에서는 顆粒들은 棒狀形이고, 전자밀도가 매우 낮은 基質에 섬유상 구조물이 분산되어 있었다. 3) 粘液細胞(Mucous cell) : 세포질에 PAS 반응에 강한 陽性을 보이는 다양한 모습의 과립($0.8\\times0.3 \\muM$) 들이 충만되어 있었다. 4) 棒狀體形成細胞(Rhabdite-forming cell) : 세포질쪽에 매우 강한 eosinophilia를 나타내는 다양한 크기의 棒狀體顆粒을 한 개 혹은 여러개 가지고 있었으며, 顆粒의 전자밀도는 높았다. 5) A型 好鹽基性顆粒細胞(Basophilic granule cell type A) 背腹部 상피에서 관찰되었고 그 세포질에는 alcian blue(ph2.5)에 강하게 염색되는 $1.5\\times1.0 \\mum$의과립들을 상당히 많이 포함하고 있었다. 과립들은 형태가 球形에 가깝거나 혹은 불규칙형이였고 전자밀도가 높았다. 이類型의 세포들은 柔組織에서 基底膜은 通過하여 表皮上皮로 이동되었다. 6) B型 好鹽基性細胞(Basophilic granule cell type B) 兩側部의 表皮上皮에서 관찰되었으며 세포질에는 PAS 반응에 강한 陽性을 보이는 $0.7\\times0.4 \\mum$의 과립들을 상당히 많이 包含하고 있었다. 전자밀도가 매우 높은 과립들의 형태는 비교적 불규칙하였다. 이類型의 세포들은 역시 柔組織에서 표피로 이동되었다.
All living things share some common life processes, such as growth and reproduction, and have the ability to respond to their environment. However, each type of organism has its own specialized way of managing biological events. Genetic sequences determine phenotypic and physiological traits. Based on genetic information, comparative genomics has been used to delineate the differences and similarities between various genomes, and significant progress has been made in understanding regenerative biology by comparing the genomes of a variety of lower animal models of regeneration, such as planaria, zebra fish, and newts. However, the genome of lizards has been relatively ignored until recently, even though lizards have been studied as an excellent amniote model of tissue regeneration. Very recently, whole genome sequences of lizards have been uncovered, and several attempts have been made to find regeneration factors based on genetic information. In this article, recent advances in comparative analysis of the lizard genome are introduced, and their biological implications and putative applications for regenerative medicine and stem cell biology are discussed.
실험에 사용한 플라나리아는 Dugesia japonia Ichikawa et Kawakatsu로서 核型分析에 의하여 種을 확인하였다. 이 種의 咽頭 및 腸을 구성하는 세포들의 세포화학적 및 미세구조적 특징을 밝히고자 본 실험을 行하였다. 세포화학적 방법으로는 hematoxylin-eosin, periodic acid-Schiff(PAS) 反應, alcian blue(pH 2.5), PAS-alcian blue 反應 그리고 methylene blue-basic fuchsin등으로 염색을 시행하고, 光學顯微鏡으로 관찰하였으며 또한 各部位의 微細構造를 透査電子顯微鏡으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 咽頭(pharynx) 內腔上皮는 遊離面에 미세융모를 가지고 있었다. 세포질에는 PAS반응에 양성을 나타내는 약 0.4$\\times$0.6 $\\mum$의 과립들이 있고, 小胞 및 液胞가 분화되어 있었다. 핵은 基底部 쪽으로 치우쳐져 있고 基底膜은 관찰되지 않았다. 咽頭外腔의 咽頭 측상피에서는 섬모와 미세융모가 발달되어 있었고 上皮內側에는 근육층이 발달되어 있었다. 咽頭外腔을 둘러싸는 壁側上皮細胞에서는 미세융모가 관찰되었고 세포질에는 전자밀도가 높은 과립들이 포함되어 있었다. 2. 腸(caeca) 腸上皮細胞는 食細胞와 顆粒性棍棒體細胞 그리고 이 세포들을 둘러싸고 있는 貯藏細胞와 幼若貯藏細胞로 구성되어 있었다. 1) 食細胞(phagocytic cell) 세포질에는 비교적 많은 lysosome을 포함하고 있었으며 無顆粒性小胞體와 mitochondria등의 細胞小器官도 잘 발달되어 있었다. 특히 無顆粒性小胞體의 cisternae는 대부분 팽윤되어 있었고 polyribosome도 풍부하게 관찰되었다. 2) 顆粒性棍棒體細胞(granular club cell) 세포질에는 PAS 반응에 강한 양성을 보이고 또 약한 eosinophilia도 나타내는 약 5 $\\mum$의 球形의 과립들을 포함하고 있었다. 특히 顆粒性小胞體가 잘 발달되어 있어TEk. 3) 貯藏細胞(storage cell) 세포질내에는 glycogen 과립들과 PAS에 각기 다른 정도의 양성반응을 보이는 다수의 中性多糖性 과립과 脂肪顆粒들이 포함되어 있었다. 4) 幼若貯藏細胞(immature storage cell) 세포질에는 PAS반응에 양성을 보이는 소수의 작은과립과 脂肪顆粒이 내포되어 있으며 세포질에 비하여 핵은 매우컸다. 핵막 주위의 세포질에서는 chromatoid body들이 관찰되었다.
The morphological study on different types of cells of reproductive organ including spermatogenesis in the adult planaria was performed to observe their cytochemical and ultrastructural characteristics. 1. Spermatogenesis The circular luminated material appears immediately inside the nuclear envelope of early spermatid and is found also in the nucleus of sperm, but typical acrosomal structures cannot be observed. Approximately ten of small-sized mitochondria occur around the nucleus in the transitional phase from primary spermatocyte to secondary spermatocyte, but in sperm a long mitochondrion is closely associated with nucleus, parellel to long axis of it. The sperm has a relatively long head connected with two tails via hollow neck. 2. Reproductive organ The penis bulb and the bursa stalk were observed. (1) Penis bulb The cells constituted penis bulb are classified into six types on the basis of ultrastructure of the cells and cytochemistry of the cytoplasmic granules. 1) A-type cells: These cells exhibiting low electron density are mainly occupied by large nucleus. These cells possess two different types of granules: highly electron-dense round granules with an average size of $0.9{\mu}m$, and electron-dense granules exhibit PAS-positive reaction. 2) B-type cells contain PAS-positive granules with the size of about $0.4{\mu}m$. They are rich in free ribosomes and mitochondria. 3) C-type cells are found to be dark cells due to high electron-density. These cells are largely occupied by large nucleus. 4) D-type cells: These cells are seen as light cells which have poorly developed cell organelles. 5) E-type tells: These cells contain a large number of glycogen granules which occupy most of cell. 6) F-type cells: These arc parietal epidermal cells surrounding the genital antrum. These cells are characterized by their finger-like shapes and the presence of a number of electron-dense, irregularly-shaped structures inside cells. The relatively large electron-lucent granules can be also found. The F-type cells possess numerous microvilli on their free surfaces. (2) Bursa stalk The cells constituted bursa stalk are classified into 3 types on the basis of cell shapes and presences of electron-dense or electron-lucent granules. 7) G-type cells with a long cytoplasmic process. They have large nuclei and poorly developed cell organelles. 8) H-type cells: These cells are characterized by the presence of a long cytoplasmic process and relatively highly electron-dense cytoplasmic profile. They have poorly developed cell organelles. 9) I-type cells contain large electron-lucent granules which exhibit negative reactions with three kinds of cytochemical staining methods used in this experiment. The fine electron-dense structures can be found inside these granules.
水畓棲息의 主要 모기 幼蟲과 기타 昆蟲의 個體群密度를 調査하기 위하여 京畿道 高揚郡 條里面 廣탄 3里의 一個 自然部落을 調査地域으로 選定하여 1980年 6月부터 9月末까지 週別로 채집을 實施하였다. 1. Culex tritaeniorhynchus 幼蟲 個體群密度의 계절적 변동은 다량의 降雨후에 급격한 증가 형상을 보였고 살충제 살포에 대해서 어느정도의 감소 영향을 받았다. 2. Anopheles sinensis 幼蟲의 個體群密度는 계절적으로 안정되어 있어 큰 변동을 나타내지 않았으며 강수량과 살충제 살포에 영향을 받지 않았다. 3. Odonata와 Ephemeroptera의 경우는 살충제 살포가 결정적인 억제 요인으로 작용하여 Odonata는 6월 중순의 첫 살포후에, Ephemeroptera는 7월 중순의 두 번째 살포후 각각 완전히 자취를 감추었고 그 후 個體群密度의 회복은 불가능 하였다. 4. Coleoptera의 個體群密度는 週別 변동이 심하였으며 이는 主로 살충제 살포에 의한 결과로 해석된다. 살충제 살포 前週와의 비교에 의한 감소율을 보면 Coleoptera는 69.5% (幼蟲 75%, 成蟲 58.3%)였고, Hemiptera의 경우는 75.5%였다. 5. 水畓에 棲息하는 planaria 1種의 個體群密度는 강수량에 영향을 받으며 살충제 살포에 對한 억제효과는 없는 것으로 나타났다.
한국산 플라나리아 뇌신경절을 실험에 사용할 수 있도록 적당한 크기로 적출하여 부위별로 잘라낸 후 2.5% paraformaldehyde-3% glutaraldehyde로 1시간 30분 전고정을 하고 이러서 $OsO_4$로 2시간 후 고정을 한 다음 전자현미경 관찰방법에 따라 실험한 후 다음과 같은 결론을 얻었다. 뇌신경절을 구성하고 있는 세포는 신경세포와 신경분비세포, 신경아교세포 그리고 신경섬유들로 이루어진 신경망 등이었다. 신경세포는 직경이 $5{\mu}m$ 정도인 원형 또는 타원형의 작은 세포로서, 핵은 타원형체로 세포질에 비해 크고 이질염색질이 고르게 발달해 있었으나, 세포질은 세포 소기관의 발달이 미진하여 비교적 단순하게 보였다. 신경분비세포는 그 모양이 긴 타원형이거나 방추형세포로서 타원형의 큰 핵을 소지하였다. 또한 이들의 세포질속에는 직경 60nm 정도의 분비성과립들로 가득차 있었다. 신경아교세포는 매우 드물게 나타나는 방추형의 세포로서 (크기, $6\times0.8{\mu}m$) 이들은 신경섬유 사이에서 주로 관찰되었다. 신경망을 구성하고 있는 신경섬유와 신경종말 속에는 사립체와 신경소관 그리고 4종류의 분비성소포(직경, 75nm, 50nm, 그리고 37nm 정도의 전자밀도가 높은 과립소포 3종과 30nm 크기의 전자밀도가 낮은 투명과 립소포 1종) 등이 존재하였는데, 이들은 단일소포 형태와 혼합소포형태로 존재하였다. 또한 이들의 신경연접 형태는 축삭-수상돌기연접과 축삭-축삭돌기연접 등의 신경 연합만이 주로 관찰되는 특징을 보였다.
Planarians show negative phototaxis and have extensive regenerative ability, including the ability to regenerate the brain. Recently the process of regeneration of the planarian brain has been divided into three steps based on the expression of neural markers. In this study, we have analyzed the process of recovery of the light response during head regeneration. Although morphological observations indicated that regeneration of the eyes and optic nerves appeared to be completed by the fourth day, the recovery of the evasion behavior against light was not recovered within 4 days after amputation. Functional recovery of the evasion behavior could be detected starting 5 days after amputation and then gradually recovered. We previously identified genes which are specifically expressed in the brain after the recovery of morphological structures. This characteristic suggested that these genes may be involved in functional recovery of the brain. To investigate the function of these genes, we performed gene knockout analysis using the RNA interference method. The results clearly indicated that these genes are involved in the functional recovery of the visual system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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