This study was carried out to acquire some basic biochemical informations on the granulosis virus (GV) DNA of Pieris rapae and Pieris brassicae. The thermal denaturation temperature (Tm) and G+C content of the DNA of the viruses were $83.7^{\circ}C$ and 35.5% for P. rapae GV, $84.0^{\circ}C$ and 35.9% for P. brassicae GV, respectively. There were some differences in the DNA fragmentation patterns of the two GV's produced by digestion with restriction endonucleases such as EcoR I , BamH I and Hind m . The homololgy between the two DNAs was caculated to be 97.0%. The size of the genome was estimated to be 103 kbp for P. rapae GV and 108 kbp for P. brassicae GV.
This study was carried out to acquire some basic biological informations on the granulosis virus (GV) of Pieris rapae and Pieris brassicae. Purified fractions of GV capsules in an sucrose density gradient centrifugation yielded on homogenous and sharp peak without a shoulder. Electron microscopy revealed that GV capsules were mostly ovalglove in shape. P. rapae and P. rapae GV isolated from P. rapae comprised granules($396\pm38\times238\pm25nm$ for P. rapae GV. $375\pm40\times255\pm28nm$ for P. brassicae GV) which contained single virus particle. The virus particles were 250- $275{\times}63$ -73nm for P. rapae GV and 243-250 $\times$ 63-75nm for P. brassicae GV containing a nucleocapsid 225 $\times$ 31nm for P. rapae, 225 $\times$ 29nm for P. brassicae within an envelope. The virulent difference between the two viruses was very small in their virulence for P. rapae larvae showing the $LC_{50}$( -log) with 5.5673 for P. rapae GV and 5.8104 for P. brassicae GV. Also the $LT_{50}$ of the 3rd instar P. rapae larvae against $10^{-6}$ inoculum was 8.17 days for P. rapae GV and 7.16 days for P. brassicae GV.
This study was carried out to acquire some basic biochemical informations on the granulosis virus(GV) of Pieris rapae and Pieris brassicae. The capsule protein was composed of a single polypeptide with a molecular weight of 30,000 dalton for P. rapae GV and 31,000 dalton for P. brassicae GV. The major amino acids of capsule protein were glutamic acid, aspartic acid and lysine. When the capsule protein was partially digested with trypsin, chymotrypsin, papain or Staphylococcus aureus V8 protease, the digested products of the two viruses showed no difference in electrophoretic mobility. The patterns of the polypeptides of the two virus particle on SOS-polyacrylamide gel showed a little difference in high molecular weight region(over MW 100 kd).
Seven different strains of Beauveria bassiana were used in a bioassay on Pieris rapae larvae. The results showed that an B. bassiana strain showed relatively high pathogenicity towards P. rapae larvae. The adjusted mortality rate was 92.86 %, and the infection rate was 85.71 % in 10 days post inoculation. Molecular identification was performed to identify the unknown strain. Internal Transcribed Spacer sequence analysis showed that the polymerase chain reaction amplicon length of the unknown strain of Beauveria sp. was 573 bp, and sequence similarity to the known B. bassiana sequences in the NCBI database was 99 %. The B. bassiana strain was named Bb01. The changes of proteins and PPO of P. rapae larvae infected by B. bassiana Bb01 strain at different times was determined. The activity of PPO increased in 1-6 d and decreased in 7 d again after inoculation. The B. bassiana invaded into the insect body affected the balance of the proteins and PPO.
곤충의 탈피작용에서 일어나는 키틴 분해대사를 구명하기 위한 목적으로 배추흰나비 (Pieris rupae L.)에서 3종의 서N-acetylglucosaminldase(El, Ell, Elll)를 분리, 정제하였다. Polvacrylamide gel 상에서 이들 효소의 활성은 기질과 triphenvltetrazolium chloride와의 반응 결과 생기는 발색정도로 확인하였다. 각각의 분자량은 76,000, 55,000, 35,000 da, pl 값은 모두 5.8이었으며 후p$\beta$GlcNAc와 각p$\beta$GaINAc에 대해서 다같이 기질특이성을 나타내었다. 또한 El과 Elll는 탈피 시기와 일치하는 전용 말기에 최대 활성을 나타내었으며 Ell는 용화 직후에 최대 활성을 나타내었다.
To determine the metabolism of leucine during the cuticle formation and the sclerotization process in Pieris rapae L., $U-^3$H-leucine or $U-^4$C-tyrosine is injected into the haemolymph of newly molted pupa through dorsal cuticle of heart area. The results show that leucine as a common amino acid participates in the synthesis of cuticle protein over the first 3 hr after ecdysis. It is also shown that leucine in the haemolymph at ecdysis is freely being moved between major internal organs during the short time period post-ecdysis, providing the evidence for some involvements including haemolymph protein synthesis and storage of fat body and gut in metabolism of leucine.
A observation of the ovarian development and oogenesis of Pieris rapae Linne has been carried out during metamorphosis using stereo-microscope, light microscope and electron microscope. The results obtained through this experiment are as follows: 1. The ovarian development and vitellogenesis begin at the 3-day old pupa and the 6-day old pupa respectively, and the adult ovary right after their emergence contains a few mature eggs. 2. The species described above are further observed at six different stages in oogenesis, and the results are summarized as follows. 1) Pieris rapae has polytrophic ovarioles. The cell organelles of the nurse cells are transfered to the oocyte through the ring canal at the early oogenesis. 2) At stage 2, the nuclear envelope of oocyte nucleus is less infolding than that of nurse cell nucleus. In the oocyte cytoplasm a large number of ribosomes are observed. 3) At stage 3 and 4, many micropinocytotic vesicles are observed in the oocyte cytoplasm. These vesicles are fused together to form large proteid yolks. 4) At stage 5, the vitelline membrane is laid down in the intercellular space between the follicle cells and oocyte. 5) At stage 6, the chorion is formed by the follicle cells. 6) A micropyle and a number of aeropyle are observed on the surface of a mature egg.
Non-diapausing larvae and diapausing pupae of Pieris rapae L. were treated with 20-HE and JH, and the concentration of 20-HE and JH in body were also measured to determine mechanisms of diapause induction and termination. When early last instar larvae of non-diapausing stage were injected with 20-HE or JH-I, diapause was not induced in both cases. 20-HE concentration of pre-diapausing last instar larvae was very low, and 20-HE peak of non-diapausing two-day-old pupae was not present in diapausing pupae. There was no difference in concentration of JH-I between diapausing and non-diapausing stages. When early and late diapausing pupae were injected with 20-HE, JH-I, or JH-III. diapause was terminated by 0.1-0.5 $\mu$g of 20-HE, but not by JH-I, or JH-III. The above results indicate that diapause of Pieris rapae was induced by decrease of 20-HE concentration and also terminated by gradual accumulation of 20-HE during diapause process.
The corneal formation of compound eye of Pieris rapae L., which was mostly made during pupal stage, was morphologically investigated with light microscope, scanning electron microscope and transmission electron microscope. The regeneration of the microvilli were found on the surface membranes of corneagen cells and retinular pigment cells of preommatidium after apolysis pupal cuticle. The microvilli were finally differentiated to corneal nipples of the ommatidium. The corneal cuticle was generated on the superficial layer of the preommatidium from corneagen cells and retinular pigment cells. The corneal process was also formed under the cuticular layer from the corneagen cells. The pore canal was appeared within the cuticular layer and connected with the retinular pigment cell as if the root of interommatidial hair was connected. The interommatidial hair was projected randomly among the ommatidial facets and cornal nipple was arrayed regular on the ommatidial facets. The cornea was convex lens and the refracting power by its convex shape was 4 diopter.
Ultrastructural changes of the testis in Pieris rapae L. observed under the electron microscope during the metamorphosis from prepupa to pupa. The peritoneal sheath, epithelium of the follicle and cucticle have the maximum thickness at prepupa stage and afterthen gradually they began to degenerate. The epithelium of the follicle which formed by invagination of the peritoneal sheath is differently differentiationed from the peritoneal sheath and it is similar to the adult's from the pupa 2 days. The cell organelles begin to increase in the cytoplasm of the cyst cell enclosed the sperm bundles at pupa 3 hrs. The electron densed granules which observed in the peritoneal sheath and epithelium of the follicle at prepupa seem to be related with fusion of the testis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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