Cultivation of a native wild vegetable, Ligularia fischeri, is hampered by Phytophthora sp. Infected plants showed wilt and eventual death due to rots on the root and basal portion. Eight isolates collected were all identified as P. drechsleri based on their mycological characteristics. The fungi showed relatively strong pathogenicity to L. Fischeri, mild to Aster scaber and Codonoposis lanceolata, and none to Circium setidens and Pimpinella brachycarpa. This is the first report of Phytophthora root rot on wild vegetables in Korea.
A technique based on the polymerase chain reaction (PCR) for the specific detection of genus Phytophthora and Phytophthora cryptogea-P. drechsleri complex group was developed using nucleotide sequence information of ribosomal DNA (rDNA) regions. The internal transcribed spacers (ITS) including 5.8S were sequenced for P. cryptogea-P. drechsleri complex group and its related species. Two pairs of oligonucleotide primers were designed. Primer pair ITS1/Phy amplified ca. 240 bp fragment in 12 out of 13 specie of Phytophthora, but not in Pythium spp., Fusarium spp.and Rhizoctonia solani. Primer pair rPhy/Pcd amplified 549 bp fragment only in P. cryptogea-P. drechsleri complex group, but not in other Phytophthora spp.and other genera. Specific PCR amplification using the primers was successful in detecting Phytophthora and P. cryptogea-P. drechsleri complex group in diseased plants.
Intraspecific genetic diversity of Korean isolates of Phytophthora drechsleri was investigated based on PCR-RFLP of rDNA along with closely related species in the genus; P. cryptogea, P. melonis, P. erythroseptica, P. cinnamomi, P. cambivora and P. cactorum. Gene regions of nuclear small subunit and internal transcribed spacer (ITS) in rDNA were amplified with polymerase chain reaction and digested with 9 restriction enzymes. Phytophthora species was readily differentiated from each other based on the digestion patterns, however, P. cryptogea was not separable from some isolates of P. drechsleri. Twenty one isolates of P. drechsleri originated from 15 host plants were divided into three distinct groups designated as PdG1, PdG2 and PdG3, respectively. Four isolates in PdG1 were originated from green vegetables and tomato and nine isolates in PdG2 were mainly isolated from medicinal plants. The two groups showed 95.3% homology and four isolates of P. cyptogea came under the groups. However, Eight isolates in PdG3 collected from cucurbits were clearly differentiated from those of PdG1 and PdG2 by 66.5% homology, but completely matched with a Taiwan isolate of P. melonis. Results indicated that three distinct groups exist in Korean isolates of P. drechleri and each group has host preference. In addition, reclassification of the cucurbits isolates are reserved because of their distinct genetic characters from other intraspecific groups in P. drechsleri.
Since 1995, boxthorn bight caused by Phytophthora spp. has occurred at Chongyang areas in Chungnam province. Infected plants showed yellows and wilt at early stage, but the symptom rapidly progressed into blight due to the decay of roots and basal stem tissues. The disease was relatively severe in poorly drained lowlands and incidence reached ca. 20% in some fields. Two species of Phytophthora were constantly isolated from freshly infected roots and asal stems. Among 39 isolates collected, 26 were identified as P. nicotianae and 13 as P. drechsleri based on their mycological characteristics. Both fungi showed strong pathogenicity to boxthorn cv. Chongyang No. 1. However, the former expressed stronger pathogenicity than the latter. Phytophthora blight of boxthorn caused by the fungi has not been reported n Korea previously.
Kim, Dayeon;Lee, Sang Yeob;Ahn, Seong Ho;Han, Ji Hee;Park, Jin Woo
The Plant Pathology Journal
/
v.36
no.3
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pp.244-254
/
2020
Gom-chwi (Ligularia fischeri) is severely infected with Phytophthora drechsleri, the causal organism of Phytophthora root rot, an economically important crop disease that needs management throughout the cultivation period. In the present study, Phytophthora root rot was controlled by using bacterial isolates from rhizosphere soils collected from various plants and screened for antagonistic activity against P. drechsleri. A total of 172 bacterial strains were isolated, of which, 49 strains showed antagonistic activities by dual culture assay. In the seedling assay, six out of the 49 strains showed a predominant effect on suppressing P. drechsleri. Among the six strains, the ObRS-5 strain showed remarkable against P. drechsleri when treated with seed dipping or soil drenching. The ObRS-5 strain was identified as Enterobacter asburiae based on 16S ribosomal RNA gene sequences analysis. The bacterial cells of E. asburiae ObRS-5 significantly suppressed sporangium formation and zoospore germination in P. drechsleri by 87.4% and 66.7%, respectively. In addition, culture filtrate of E. asburiae ObRS-5 also significantly inhibited sporangium formation and zoospore germination by 97.0% and 67.6%, respectively. Soil drenched bacterial cells, filtrate, and culture solution of E. asburiae ObRS-5 effectively suppressed Phytophthora root rot by 63.2%, 57.9%, and 81.1%, respectively. Thus, E. asburiae ObRS-5 could be used as a potential agent for the biological control of Phytophthora root rot infecting gom-chwi.
Phytophthora root rot of lettuce, which has not been reported in Korea before, occurred severely in liquid hydroponic culture. The disease occurred in all seasons and was most severe in summer from June to August, showing over 90% infection rate in some farms. A total of 51 isolates collected from various farms were all identified as Phytophthora drechsleri. The fungus showed strong pathogenicity to lettuce and Chinese cabbage, moderate pathogenicity to cucurbits and tomato, and weak pathogenicity to pepper. However, the fungus was not pathogenic to other leafy vegetables namely: chicory, kale, endive, garland chrysanthemum, spinach beet, and perilla. Among 10 species of Phytophtora inoculated to lettuce, only P. drechsleri and P. cryptogea were found pathogenic.
To investigate genetic relationships either interspecies or intraspecies of 14 Korean Phytophthora species, sequence analyses of nuclear DNA (ypt gene and rDNA-IGS region) and mitochondrial DNA (Cox gene, $\beta$-tubuline gene, and EF1A gene) were performed. All of 14 Korean Phytophthora species clearly clustered into foreign isolates of each species. These Korean isolates in Phytophthora species also showed no correlation between molecular classification and morphological classification like as in case of foreigners. P. palmivora KACC 40167 reported previously from genetic groups of Phytophthora species in Korea was not consistent with the classification system, and therefore was required re-examination for the genetic group analysis. Korean isolates of P. drechsleri KACC 40195 showed very close relationship with P. cryptogea KACC 40161 above 94% bootstrap value in P. cryptogea-P. drechsleri complex group. Identification of these isolates is still unclear, because P. cryptogea and P. drechsleri were not differentiated in this study. On the other hand, it was required to unify species for these two species, since P. parasitica and P. nicotianae were clustered into a group on the level of 99 to 100% sequence homology. Comparing to the sequences of foreigners, Korean isolates were newly divided to ten groups in the phylogenic system. These results could be prepared useful informations to understand genetic diversity of Phytophthora species in Korea.
Phytophthora root rot of Chniese cabbage and spinach is reported for the first time in Korea. The diseases ocurred at Yangju, Seosan and Yeocheon in Korea from 1995 through 1998, mainly in lowland and submerged areas. Symptoms consisted of stunt, yellows, wilt and eventual death due to root rot. Fourteen isolates collected from naturally infected plants were all identified as P. drechsleri based on mycological characteristics. PCR-RFLP analysis of rDNA of the isolates confirmed the above result, since the restriction band patterns of the small subunit and internal transcribed spacers were identical to P. drechsleri and P. cryptogea, but distinct from closely related species of P. erythroseptica, P. cambivora, P. sojae and P. megasperma. The pathogen showed strong pathogenicity to Chinese cabbage, moderate to spinach, radish, cabbage and tomato, and weak or none to brown mustard, kale, chicory and pepper in pathogenicity tests.
Bioassay techniques using young leaves and roots were developed to screen resistance of Atractylis spp. against Phytophthora drechsleri. Among 638 plants collected from various regions of Korea from 1994 to 1996, 67 were pre-screened in fields naturally infested with P. drechsleri, which is the causal pathogen of rhizome rot of Atractylis. Among the pre-screened sources, 18 (ca. 26.8%) were highly resistant to the pathogen in leaf inoculation. In the root inoculation test, abundant sporangia were formed in susceptible plant roots, while only a few or no sporangia were produced on the roots which were found resistant in the leaf inoculation test. Among the selected resistant plants, A. japonica 96066 and 96104 were used to cross with another species, A. macrocephala 96362 that showed high yield with good quality of rhizome but susceptible to the pathogen. The F$_1$hybrids designated as HA03 turned out to be resistant to the pathogen, indicating that resistant gene(s) was inherited. Among intra-species hybrids of A. japonica, HA07 and HA09 were resistant to the pathogen in leaf inoculation and moderate in root inoculation. However, HA08 was susceptible in both inoculation tests. This result suggests that the parent material might be genetically heterogeneous. Further genetic study should be carried out to verify this phenomenon.
Antagonistic rhizobacteria, more specifically fluorescent pseudomonads and certain species of Bacillus, are known as biocontrol agents of fungal root diseases of agronomic crops. In this study, 144 bacteria were isolated from cucumber rhizosphere and screened as potential biological control agents against Phytophthora drechsleri, the causal agent of cucumber root rot, in vitro condition. Non-volatile compounds of 23 isolates showed noticeable inhibition zone (> 30%) against P. drechsleri, whereas volatile compounds of 7 isolates could prevent more than 30% of the mycelial growth of the fungus. All promising isolates, except of Pseudomonas flourescens V69, promoted significantly plant growth under in vitro condition. P. flourescens CV69 and V11 exhibited the highest colonization on the root. Results of the greenhouse studies showed that a reduction in disease incidence by use of some strains, and particularly use of strains CV6 and V11 as a soil treatment, exhibited a reduction in disease incidence so that suppressed disease by 85.71 and 69.39% respectively. Pseudomonas flourescens CV6 significantly suppressed disease in comparison to Ridomil fungicide. The use of mixture bacterial strains in the soil inoculated by the fungus resulting in falling down the most of the plants which didn't show significant difference with infected control soils without bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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