This study aims to evaluate the effect of Photodynamic Therapy (PDT) against methicillin-resistant Staphylococcus aureus with high-level mupirocin resistance (Hi-Mup MRSA). To examine the antimicrobial effect of photogem-mediated PDT against Hi-Mup MRSA, CFU quantifications, bacteria cell viability tests, and disk diffusion antimicrobial susceptibility tests were evaluated. In addition, one of PDT mechanisms was investigated by accumulating photogem ($10\;{\mu}g/ml$) in Hi-Mup MRSA. Photogem-mediated PDT properly inhibited the colony formation of Hi-Mup MRSA. Viable bacteria decreased greatly after a PDT application with photogem $10\;{\mu}g/ml$ at energy density $15\;J/cm^2$. The diameter of the inhibition zone around susceptible disks increased after PDT. In addition, we confirmed the accumulation of photogem in bacteria through fluorescent images. These results demonstrated that excellent photosensitization of Hi-Mup MRSA can be achieved using photogem with 630 nm LED irradiation. Thus, PDT may make survival Hi-Mup MRSA inactive.
The aim of this study was to evaluate the effects of the photosensitizer photogem with light-emitting diode (LED) on vancomycin-resistant enterococci (VRE). Two VRE strains isolated from the feces of patients. that was identificated Enterococcus faecium (vanA) and Enterococcus gallinarum (vanC1) using traditional biochemical tests and confirmed VRE genotyping from using polymerase chain reaction. In addition, three strains were used Enterococcus. faecalis CDC-286 (vanA), E. faecalis CDC-583 (vanB) and E. gallinarum CDC-42 (vanC1). To examine the antimicrobial effect of photogem mediated photodynamic therapy (PDT) against, CFU quantification and Disk diffusion antimicrobial susceptibility test were evaluated. The effects of Photodynamic therapy was not associated with genotype. Photogem mediated PDT perfectly inhibited the colony formation of E. faecalis CDC-286. The number of viable bacteria decreased greatly after PDT application with photogem $50{\mu}g/mL$ and energy density of $15J/cm^2$. The diameter of inhibition zone was increased to after PDT more than before PDT. The case of vancomycin disc on E. faecalis CDC-583 and E. galinanum-Patient were changed from resistant to intermediate resistant, from intermediate resistant to susceptable. These results demonstrate that lethal photosensitization of VRE can be achieved using photogem plus 630 nm LED irradiation.
Eradication of $H.$$pylori$, usually carried out by using antimicrobial agents, is essential for preventing gastric ulcers and cancers. The $H.$$pylori$ isolates, however, have continuously grown antimicrobial resistance, which have caused difficulty in treating the bacteria and in turn, photodynamic therapy (PDT) has been found to be effective in inducing deaths of variety of bacteria. After PDT treatment, the number of colony forming units (CFU), the morphologic changes, and flow cytometry were observed. In the PDT group containing 100 and 200 ${\mu}g$/ml photogem, no live $H.$$pylori$ was observed, while 10 and 50 ${\mu}g$/ml photogem were only partially effective. $H.$$pylori$ of the PDT group also displayed distortion and shrinkage in morphology. This study demonstrated that photogem-mediated PDT effectively induces deaths of $H.$$pylori$.
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is one of the most common nosocomial pathogens. It is associated with hospitals is now being isolated in the community. The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of photodynamic therapy using Photogem and 630 nm LED on MRSA and methicillin-sensitive Staphylococcus aureus (MSSA). The broth cultured MRSA and MSSA incubated with various concentrations of Photogem (500,50,5 and $0.5{\mu}g/mL$) for 4 h. Then 630 nm LED was given at $9\;J/cm^2$, $20{\mu}l$ of the exposed bacteria solution was inoculated onto agar plate. Plates were incubated for 24 hand colonies were counted. The PDT group was effective in killing MRSA and MSSA at the Photogem dose of $50{\mu}g/mL$. But MSSA is more sensitive than MRSA in photodynamic effect. Other groups (light only, sensitizer only, or no treatment) observed no bacterial cell killing. These results raise the possibility of using PDT with or without antimicrobial drugs to eradicate MRSA and MSSA. In order to confirm this result, we need to further study bacterial death mechanism and in vivo study.
The aim of this study was to evaluate the bacterial effects of Moraxella catarrhalis in otitis media with effusion (OME) by photodynamic therapy (PDT). Bacterial suspensions (10000 CFU/mL) were prepared. The colony forming units (CFU) of Moraxella catarrhalis have been measured after an application of photogem plus 632 nm diode laser irradiation. One ml of the bacterial suspensions have been incubated in the dark for 3h with various concentrations of photogem ($0.625{\sim}5.0_{\mu}g/mL$) and then irradiated with 632 nm diode laser ($15J/cm^2$). After, the PDT Moraxella catarrhalis suspensions ($50{\mu}L$) were inoculated on chocolate agar plate and cultured in the dark at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ condition for 18h. The colony forming units off the bacteria were measured. Also transmission electron microscopy (TEM) was employed to evaluate the effect of otitis media pathogens by PDT. The nucleus of Moraxella catarrhalis was stained using green fluorescent nucleic acid dye thiazole orange and the fluorescence intensity of the nucleus was measured by flow cytometry. The PDT was effective in killing Moraxella catarrhalis at the photogem dose of $5.0_{\mu}g/mL$, respectively, As assessed by flow cytometry analysis the fluorescence intensity of the nucleus got lower after PDT. TEM result appeared to able to cause damage to the bacterial membranes. On the basis of these findings, bacterial photodynamic therapy with photogem can be considered to be a promising new therapeutic approach for OME.
The aim of this study was to evaluate the photodynamic effect of various photosensitizing agents against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). MRSA was exposed to light from a 632 urn diode laser (15 J/$cm^2$) in the presence of various photosensitizer, such as photofrin, photogem, radachlorine and ALA. In vivo study was performed using ICR mice. Twenty eight mice had a standard wound ($100\;mm^2$) created on the dorsum, and MRSA was inoculated into the wound region. The four groups were classified as follows: (1) the untreated control group (bacteria alone), (2) the bacteria plus light group (15 J/$cm^2$), (3) the bacteria plus photofrin group (kept in the dark), and (4) the photodynamic therapy (PDT) group (bacteria, photofrin, and light). After photofrin (dose 1 mg/kg) injection, the experimental group was irradiated with 632 urn diode laser (15 J/$cm^2$) for 30 minutes after In vitro results of PDT showed the complete killing of MRSA at the photofrin, radachlorine, and photogem However, ALA-PDT was ineffective on MRSA viability. In vivo results showed that photofrin has therapeutic effect on the wound infection. These results demonstrate that selective lethal photosensitization of MRSA can be achieved using phofrin, photogem and radachlorin. Thus, PDT can inactivate MRSA survival.
Yoon, Sung Ho;Han, Kyung Taek;Kim, Gyung Nam;Lee, Seung Il
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.57
no.4
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pp.358-363
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2004
Background : Photodynamic therapy (PDT) involves the use of photosensitizing agents for treatment of malignant disease. PDT is approved by the U.S. Food and Drug Administration for the endobronchial microinvasive nonsmall cell lung cancer and for palliation in patients with obstructing tumors. We report our experience and results of PDT in lung cancer. Method : Ten patients with lung cancer who were diagnosed in Chosun university hospital by histologic confirm through bronchoscopy were included between August 2002 and May 2003. The photosensitizer (Photogem$^{(R)}$, Lomonosov institute of Fine Chemical, Russia/dose 2.0 mg/kg body weight) was injected 48 hours prior to the PDT session. For PDT with the photosensitizer (Photogem$^{(R)}$), Diode LASER system (Biolitec Inc., Germany, wavelength; 633nm) were used. PDTs were done at 48-72 hours after photogem injection. Follow up bronchoscopy and chest X-ray or thorax computerized tomography were done for evaluate PDT response. Results : 9 of 10 patients with endobronchial obstruction showed partial remission with bronchus opening after PDT. Direct reaction of the tumor to PDT was similar in despite of its localization. It was as follows; edema, hyperemia, in-situ bleeding, fibrin film occurrence. Any other complications such as sunburns of skin, inflammation within the PDT zone were not occurred by the end of the fourth week. Conclusion : In the advanced endobronchial disease, PDT has been shown to be useful in treating endobronchial tumors that are causing clinically significant dyspnea or are likely to progress and lead to further clinical complications, such as postobstructive pneumonia.
PDT-mediated cyototoxicity basically depends on the penetrated light-dose into the tumor tissue. This limits the efficiency of PDT to the superficial tumor region typically less than 1 cm. The localized photochemical generation of reactive oxygen species, including singlet oxygen is known to increase expression of assortment of early response genes including heat shock protein. In order to increase PDT cytotoxicity in the treatment of solid tumor, it is desirable to combine PDT with other therapeutic effects. In this preliminary study we evaluated enhanced cytotoxicity from the PDT-mediated expression of thymidine kinase in a transfected tumor cell line. Two types of photo sensitizers, a hematoporphyrin derivative(Photogem, Russia) and aluminium sulphonated phthalocyanine(Photosense, Russia) were used to evaluate the overexpression of hsp-70 in PDT-treated cell. Transient increase of hsp-70 was observed at 6-8 hrs later following irradiation in the photosense-treated cell whereas it was not observed in Photogem-treated cell. In the presence of ganciclovia, transfected cell showed a 17% increase in the cytotoxicity compared to the PDT only cell.
Photodynamic therapy consists of a photosensitizer, suitable light source and oxygen. The excitation of the photosensitizer at a cancer mass results in oxidation which would ultimately reduce the mass via apoptosis. Millimeter wave (MMW) therapy has also been known to be effective on cancer cell mass reduction, human cell regeneration and immunity enhancement among the Russian clinicians and scientists. In the present study, the two modalities were combined to achieve synergistic effects while reducing the administration dosage of the photosensitizer, photogem, thus minimizing the side effects. The CT-26 adenocarcinoma cell mass was implanted on mice and the tumors were exposed to a simple MMW irradiation or a combined treatment of MMW and PDT. The treatments continued for 4 weeks and the size of the tumor was measured continuously. The significant therapeutic result of MMW was not found during 4 weeks, preferably more cancer recurrence possibility after MMW irradiation was observed. The results of this study suggest that the combination of MMW irradiation and photodynamic treatment should not be recommended. The result of the MMW treatment alone, however, displayed suppressive effect on cancer cell proliferation for both in vitro and in vivo. The results of the present study suggest that the millimeter wave therapy deserves a further study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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