This experiment was conducted to select and utilize the tolerant rice varieties for ozone stress through comparing the physiological responses. In SOD activity, Backunchalbyeo which treated once by 0.15 ppm $0_3$, Ilpumbyeo and Inbujinado treated twice showed significantly different SOD activity compared with $non-O_3$ treatment. No significant difference of SOD activity in three-times $0_3$ treated Sangnambatbyeo and Hangangchalbyeo was found as compared to ($non-O_3$ treated)control, POD activity, when Sangnammbatbyeo, Hangsngchalbyeo, Ilpumbyeo and Inbujinado were sequently treated by third ozone, showed no significant difference between $O_3$ treatment and $non-O_3$. In the comparison of amino acid content in rice leaf blade between three times $O_3$ treatment and $non-0_3$ treatment in 3 varieties, phenylalanine content represent as increased quantities. Especially, in three times $0_3$ treatment of Sangnambatbyeo, phenylalanine content(O.66 mg/g) was significantly increased as compared with $non-O_3$. Visual-growing characters of Sangnembatbyeo were significantly different between $0_3$ treatment and non-treatment. However, grain-filling rate showed no difference. SOD and POD related to resistant mechanism were high activity. In addition, phenylalanine known as precursor which is synthesized resistant materials was increased by $0_3$ treatment. These results suggested that Sangnambatbyeo which increased SOD and POD activity, and phenylalanine content under ozone stress could be selected as a tolerant variety.
Jin, Yinzhe;Zheng, Jinzhu;Polyakova, Yulia;Koo, Yoon Mo;Row, Kyung Ho
Korean Chemical Engineering Research
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v.44
no.5
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pp.453-459
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2006
D-tryptophan and N-CBZ-D-phenylalanine were separated using ionic liquid as additives for the mobile phase in high performance liquid chromatography (HPLC). The ionic liquid of 1-butyl-3- methylimidazolium tetrafluoroborate (${[BMIm]}^+{[BF_4]}^-$) was used. Mobile phases were 65%, 70%, and 80% methanol in water with addition of different concentrations (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0, and 15.0 mmol/L) of the ionic liquid. The experiments were performed on stainless steel column, $3.9{\times}300mm$ i.d., packed with $15{\mu}m$ octadecyl-bonded silica gel at laboratory.The retention factor of D-tryptophan was not negligibly changed while that of N-CBZ-D-phenylalanine was decreased. The resolution between the two components were affected by the contents of methanol and ionic liquid in the mobile phase. With the small content of methanol and the high concentration of ionic liquid, the resolution was improved.
In this untreated classic phenylketonuria (PKU) case, mental retardation is severe; however, there have been individuals- like the mother of this case- who have escaped mental retardation and all the other potential sequelae of phenylketonuria, despite having high blood phenylalanine levels, and very poor dietary control. It appears that they have nearly normal brain phenylalanine levels despite high blood phenylalanine (Phe) levels. A number of studies have now demonstrated considerable variability in blood vs. brain phenylalanine levels in phenylketonuria patients. Outcome of phenylketonuria appears to be related to brain phenylalanine levels. We report a case of "undiagnosed" maternal phenylketonuria syndrome. A female infant had low birth weight (2,400 g) with microcephaly. We examined her family and discovered that her mother was an undiagnosed phenylketonuria patient with a borderline intelligence quotient (IQ). The infant's sister, six years old, was diagnosed with phenylketonuria at the age of four years was mentally retarded and had received an operation for cleft lip and palate. the sister had also had a low birth weight (2,300 g). Her sister and mother were compound heterozygotes (mother: R243Q/Y325X; sister: Y325X/P407S). The infant and father were heterozygous carriers (baby: R243Q/ -; father: P407S/ - ).
Optimal cultivation conditions for the production of phenylalanine ammonia-lyase(PAL) from Rhodotorula aurantiaca K-505 were selected, and the kinetic parameters of the produced PAL were determined. The most suitable carbon and nitrogen sources were glucose and tryptone, respectively. The strain expressed PAL constituttively when using the optimized semi-complex media. High cell density culture could be critical for maximal production of PAl since the PAL ynthesis was growth associated. maximum PAL activity was observed at initial pH 6.0. although the ll growth was not markedly affected by temperature between 22 and 28$^{\circ}C$, the cells yielded the maximum PAL activity when cultivated at 22$^{\circ}C$. The maximum activity for deamination of L-phenylalnine to trans-cinnamic acid was observed around pH 8.8. The PAL activity gave the maximum at 45$^{\circ}C$, and greatly decreased at higher than 5$0^{\circ}C$. Activation energy({TEX}$E_{a}${/TEX}) calculated from Arrhenius equation was 6.28 kcal/mol in the range of 22$^{\circ}C$ to 4$0^{\circ}C$. A oolf plot showed that the enzyme reaction follows Michaelis-Menten equation, whose {TEX}$K_{M}${/TEX} and {TEX}$V_{max}${/TEX} values were 4.65$\times${TEX}$10^{-3}${/TEX} M and 0.89$\mu$ mol/mg-min respectively.
Cui, Jian Dong;Zhao, Gui Xia;Zhang, Ya Nan;Jia, Shi Ru
Food Science and Biotechnology
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v.18
no.4
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pp.954-958
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2009
Effects of controlled- and uncontrolled-pH operations on phenylalanine ammonia lyase (PAL) production by a recombinant Escherichia coli strain were investigated at uncontrolled-pH ($pH_{UC}$) and controlled-pH ($pH_C$) of 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.5, 8.0, and 8.5 in bioreactor systems. The results showed that the recombinant PAL activity was improved significantly by controlled pH strategy. Among the $pH_C$ operations, the highest PAL activities were obtained under $pH_C$ 7.5 strategy where cell mass ($OD_{600\;nm}$) and PAL activity was 1.3 and 1.8 fold higher than those of $pH_{UC}$, respectively. The maximum PAL activity reached 123 U/g. The $pH_C$ 7.5 strategy made recombinant plasmid more stable and therefore allowed easier expression of PAL recombinant plasmid, which increased PAL production. It was indicated that the new approach (controlled-pH strategy) obtained in this work possessed a high potential for the industrial production of PAL, especially in the biosynthesis of L-phenylalanine.
Phenylalanine ammonia-lyase (PAL; EC 4.3.1.5), the first enzyme in the phenylpropanoid biosynthesis, catalyzes the elimination reaction of ammonium ion from L-phenylalanine. PAL was purified from the cytosolic fraction of Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. napus var. pekinensis) through ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-200 chromatography, and Q-Sepharose chromatography. It consists of four identical subunits, the molecular mass of which was estimated to be about 38,000 daltons on SDS-PAGE. The optimal pH and temperature of the purified enzyme are 8~9 and $45^{\circ}C$, respectively. Its activity is greatly inhibited by $Zn^{2+}$ ion, and strongly activated by caffeic acid. The purified PAL has some different characteristics compared to those obtained with other PALs.
An auxotrophic regulatory mutant of Corynebacterium glutamicum ATCC 21674 produced 2.1-3.4g/1 of phenylalanine with 2.9-4.4g/l of tyrosine in the batch shake flask fermentations. At higher sugar concentration, the production of both amino acids was lower than that at low sugar concentration. There was a pronounced effect of temperature on the amino acid production. At $30^{\circ}C$, much higher levels of phenylalanine and tyrosine were produced than those at $37^{\circ}C$. The pH decrease in the shake flask fermentation was so fast that it was impossible to maintain a constant pH with calcium carbonate as a buffering agent. Even though the strains we have used are reported as tyrosine auxotrophs, they produced tyrosine and were able to grow on the minimal medium where no tyrosine was present.
This study was attempted to investigate the production of L-tyrosine by Brevibacterium flavum ATCC 14067. To select the strain which produce more L-tyrosine, mutants were induced by N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine (NTG) treatment and phenylalanine auxotrophic mutants were induced by NTG and penicillin treatments. PFP resistant mutant was isolated from a phenylalanine auxotroph by retreatment with NTG and screened for increase of L-tyrosine production. PFP-326 mutant resistant to PPP (100ug/ml) was derived from phenylalanine auxotroph by mutagenesis with NTG and PFP-106 mutant resistant to PFP (1201g/ml) was derived from PFP-326 by mutagenesis with NTG. The composition of media for L-tyrosine production in strain PFP-106 was studied. PFP-106 mutant strain produced 50mg 11 of L-tyrosine while the parent strain produced 0.56mg 11 of L-tyrosine. The optimum composition of medium for L-tyrosine by strain PFP-106 was 10cA sucrose as carbon source, 3% ammonium sulfate as nitrogen source. The optimum cultural condition for producing L-tyrosine by strain PFP-106 was L-phenylalanine at a concentration of 1000g/mg.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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